王朝霞
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 供职机构：鲁东大学更多>>
- 发文基金：烟台市科学技术发展计划项目山东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 九州虫草Zn^(2+)胁迫下金属硫蛋白的诱导产生规律及性质研究
- 2013年
- 目的探讨Zn2+胁迫下九州虫草Cordyceps kyusyuensis金属硫蛋白(MT)的产生及性质。方法以培养基中添加ZnSO4的方式,研究九州虫草在Zn2+胁迫下MT的产生规律。通过超声波细胞破碎、提取和凝胶柱色谱法对MT进行分离纯化,利用考马斯亮蓝法进行纯度鉴定。用电喷雾质谱法测定MT的相对分子质量,以Ellman’s方法测定巯基的量,以原子火焰吸收法测定Zn的量,以Ag饱和分析法结合原子吸收光谱(AAS)测定MT的量,用氨基酸自动分析仪对Zn-MT进行氨基酸组成分析。通过对羟基自由基(HO)、DPPH自由基(DPPH)和超氧阴离子自由基(O2)的清除率实验探讨九州虫草MT的抗氧化活性。结果菌丝体中Zn和MT的量随着培养基中Zn2+质量浓度(0~15 g/L)的增加而增加。在10 L发酵罐培养时,培养基中Zn2+质量浓度为15 g/L,培养时间为56 h,金属硫蛋白的量为14.335 mg/g菌丝体(湿质量)。对九州虫草的菌体蛋白通过2次凝胶柱色谱,冷冻干燥得到九州虫草MT,电喷雾质谱法测得其相对分子质量为6 750,每分子Zn-MT氨基酸总量为56个,含有20个半胱氨酸,含极少量的芳香族氨基酸,可结合6个Zn原子。九州虫草Zn-MT对于HO、DPPH、O2有较好的清除作用,清除效果依次为O2>DPPH>HO,其半数清除率质量浓度(IC50)分别为71.49、80.58、100.65 mg/L。结论通过紫外扫描图谱分析、蛋白柱色谱图谱分析、九州虫草Zn-MT理化性质以及抗氧化活性的测定,可以判断其与标准的兔肝MT非常相似,进一步可以确定通过九州虫草菌丝体液态发酵法可生产MT,以期为工业生产提供可靠的理论依据。
- 张琪程显好郭文娟刘凤红王朝霞
- 关键词：金属硫蛋白分离纯化氨基酸组成抗氧化活性
- 烟台地区葡萄根部内生真菌多样性研究被引量：2
- 2014年
- 为了解烟台地区葡萄根部内生真菌的菌群组成和多样性,采集生长在张裕卡斯特酒庄的四个品种的健康葡萄,对其根部的内生真菌进行分离,采用形态观察和ITS序列测定相结合的方法进行鉴定。结果表明:所分离出的1331株内生真菌可归于19属,以镰孢属Fusarium(33.9%)、Ilyonectria(17.35%)和柱孢属Cylindrocarpon(15.7%)为优势菌群。多样性指数的结果反映出所获得的葡萄根部内生真菌菌群具有不同的丰富度及均匀度,同时具有一定的相似性。
- 王朝霞程显好李维焕刘凤红王臣君李坤孙磊
- 关键词：葡萄内生真菌分离率
- 亚香棒虫草菌丝体金属硫蛋白的提纯及性质被引量：1
- 2014年
- 【目的】探讨锌离子诱导亚香棒虫草(Cordyceps hawkesii)菌丝体金属硫蛋白的产生及性质。【方法】亚香棒虫草菌丝体以18 g/L Zn2+在10 L发酵罐中诱导培养64 h后收集菌丝体,产率为每升发酵液收集12.2 g菌丝体(干重),细胞破碎取上清液通过2次凝胶柱层析,冷冻干燥得到亚香棒虫草菌丝体金属硫蛋白纯品。利用考马斯亮蓝法(Bradford法)进行含量测定,用银饱和分析法结合原子吸收光谱(AAS)测定MT含量,用Ellman’s方法和火焰原子吸收法分别测得巯基含量和结合锌原子数,用电喷雾质谱仪测得分子量,全自动氨基酸分析仪测氨基酸组成。通过对羟基自由基、DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除率试验探讨亚香棒虫草金属硫蛋白的抗氧化活性。【结果】发酵终点金属硫蛋白产量为15.3 mg/g菌丝体湿重。金属硫蛋白的分子量为7 680 Da,每分子蛋白质含有18个巯基、结合4个Zn原子。氨基酸组成分析结果显示,每分子蛋白质共含60个氨基酸,其中含有15个半胱氨酸,且含有组氨酸和芳香族氨基酸。亚香棒虫草金属硫蛋白的抗氧化活性稍强于谷胱甘肽,弱于动物金属硫蛋白。【结论】亚香棒虫草在Zn2+胁迫下能够大量合成金属硫蛋白,且其金属硫蛋白的性质与哺乳动物金属硫蛋白有相似性。
- 张琪程显好郭文娟刘凤红王朝霞
- 关键词：金属硫蛋白氨基酸组成抗氧化活性
- 蛹虫草金属硫蛋白分离纯化及性质研究被引量：3
- 2014年
- 研究探讨锌离子胁迫下蛹虫草Cordyceps militaris金属硫蛋白的产生及性质。蛹虫草菌丝体以15g/L Zn2+在10L发酵罐中诱导培养56h后收集,产率为每升发酵液收集12.021g菌丝体(干重),细胞破碎取上清液通过两次凝胶柱层析,冷冻干燥得到蛹虫草金属硫蛋白纯品。利用Bradford法进行蛋白质含量测定,用银饱和分析法结合原子吸收光谱(AAS)测定MT含量,发酵终点处金属硫蛋白含量为12.876mg/g菌丝体(湿重)。用电喷雾质谱法测得金属硫蛋白的分子量为7 390Da,用Ellman’s方法和火焰原子吸收法分别测得每分子蛋白质含有14个巯基、结合5个Zn原子。氨基酸组成分析结果显示,每分子蛋白质共含57个氨基酸,其中含有13个半胱氨酸,疏水氨基酸占29.8%,且含有组氨酸。以上表明,研究中的蛹虫草金属硫蛋白与哺乳动物金属硫蛋白结构差异较大,但与酵母菌金属硫蛋白结构组成类似。
- 张琪程显好郭文娟刘凤红王朝霞
- 关键词：蛹虫草金属硫蛋白氨基酸组成
