王艳华
- 作品数：36 被引量：74H指数：6
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- 晶状体蛋白促大鼠视网膜神经节细胞存活和突起生长的体外研究被引量：13
- 2007年
- 目的 探讨晶状体内各主要可溶性晶状体蛋白对离体培养的大鼠视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells，RGCs）存活和突起生长的作用，为视神经损伤后再生的研究提供新的思路。方法 采用分子排阻凝胶色谱法分离纯化晶状体中各主要可溶性晶状体蛋白——α、β-H、β-L、γ晶状体蛋白，再通过SDS-PAGE电泳、肽质量指纹图谱方法鉴定其为目的蛋白质后，按组分别进行RGCs离体培养试验，观察RGCs的最长突起长度和存活细胞数。结果 RGCs的最长突起长度6d时达最大值，分别为：对照组（92．27±35．93）μm，α晶状体蛋白组（181．59±43．78）μm，β-H晶状体蛋白组（123．33±52．81）μm，β-L晶状体蛋白组（89．55±22．40）μm，γ晶状体蛋白组（86．01±39．15）μm。6d时，各组RGCs存活细胞数分别为：对照组（9．80±3．25）个／视野，α晶状体蛋白组（13．00±4．25）个／视野，β-H晶状体蛋白组（11．33±6．28）个／视野，β-L晶状体蛋白组（8．10±1．83）个／视野，γ晶状体蛋白组（5．74±2．82）个／视野。α、β-H晶状体蛋白组RGCs的最长突起长度和存活细胞数明显高于对照组，α晶状体蛋白组作用更明显，β-L晶状体蛋白组与对照组比较，差异无统计学意义，γ晶状体蛋白组存活细胞数在6d时明显少于对照组。结论 仅晶状体蛋白有明显的促进体外培养的RGCs存活和突起生长的作用，是一种晶状体源性神经保护物质。β-H晶状体蛋白也有一定的促RGCs突起生长和保护存活的作用。γ晶状体蛋白有一定的抑制RGCs存活的作用。
- 刘康王一王艳华牛建军曾玉晓
- 关键词：视网膜神经节细胞
- 视神经损伤后RhoA在大鼠视网膜中的分布及表达变化
- 目的:观察视神经损伤后RhoA在视网膜中的分布及表达变化,为进一步研究视神经再生机制奠定基础。方法:取36 只成年Long Evans大鼠为研究对象,分为正常组,视神经损伤1d,3d,及7d组共4组,每组9只,通过免疫组...
- 王艳华王一陈丽峰曾玉晓
- 文献传递
- α晶体蛋白促进视网膜神经节细胞轴突再生的机制研究
- α晶体蛋白是晶状体来源的“神经保护物质”之一，它能有效地促进损伤后的视神经再生，但其作用机制不明。视神经损伤后RGCs的继发性死亡，是视神经难以再生的原因之一，但是，单纯保护RGCs存活并不能引起视神经的有效再生，因为损...
- 王艳华
- 关键词：视网膜视神经损伤神经节细胞细胞培养
- 文献传递
- α晶体蛋白与视网膜神经节细胞结合的细胞定位研究被引量：2
- 2007年
- 目的对α-晶体蛋白与视网膜神经节细胞（RGCs）之间的作用进行定位研究。方法原代培养RGCs，Thy1．1免疫荧光法鉴定RGCs并进行纯度检测，将α-晶体蛋白与RGCs共孵育，应用免疫细胞化学方法，对α-晶体蛋白在RGCs上的靶分子进行间接免疫标记，再以光镜、激光共聚焦显微镜和电镜观察标记物，对α-晶体蛋白与RGCs的结合进行亚细胞定位。结果Thy1．1鉴定RGCs纯度为90％～95％。RGCs免疫组化染色结果显示，α-晶体蛋白与其靶分子结合复合物在RGCs膜上呈阳性表达；共聚焦显微镜下发现RGCs有免疫荧光复合物沉积，大量呈“戒指”状分布于细胞膜，少量分布于细胞轴突上。电镜结果显示，RGCs上有免疫复合物沉积，呈“线状”分布在细胞膜上，对照组呈阴性。结论α-晶体蛋白能与RGCs发生结合，其作用靶点在RGCs膜上。α-晶体蛋白与RGCs的结合不是吸附作用，但是否为受体-配体性质的结合还需进一步验证。
- 王晓芹王贵波吴楠赵海生王艳华王一阴正勤余涛曾玉晓
- 关键词：视网膜神经节细胞
- α晶体蛋白对LPS刺激及视神经损伤后大鼠视网膜小胶质细胞增殖及数量的影响
- 2008年
- 目的研究α晶体蛋白对大鼠视网膜小胶质细胞增殖能力及视神经损伤后小胶质细胞数量的影响。方法脂多糖激活离体培养视网膜小胶质细胞，模拟视神经损伤，采用MTr分析α晶体蛋白对激活的小胶质细胞增殖能力的影响；建立大鼠视神经不全损伤模型，损伤后玻璃体腔注射α晶体蛋白，采用视网膜铺片及免疫荧光标记小胶质细胞并计数，比较不同组小胶质细胞的数量。结果10^-6g／L～10^-2g／L浓度的脂多糖均可激活小胶质细胞（P〈0．05），10^-6g／L和10^-4g／L浓度的α晶体蛋白可明显抑制10^-6g／L浓度的脂多糖激活的小胶质细胞的增殖；视神经损伤1～3周，α晶体蛋白注射组小胶质细胞的数量明显少于损伤组（P〈0．05）。结论α晶体蛋白可抑制视网膜上小胶质细胞的增殖和活化，减轻小胶质细胞对RGCs的过度吞噬和继发性损害，可能是视神经损伤后α晶体蛋白间接保护RGCs存活的另一机制。
- 吴楠王艳华王晓芹刘东宁应希张莉王一
- 关键词：脂多糖类
- 晶状体源性蛋白分子保护视网膜神经节细胞和促视神经再生的研究
- 王一王艳华应希吴楠阴正勤刘志敏刘康王晓芹赵海生
- 主要内容视神经病损后难以再生，常致失明，寻找促进视神经再生的因子迫在眉睫。研究发现：晶状体损伤后能显著促进视神经损伤后的再生修复。然而晶状体来源的神经保护物质是什么？作用机制如何？能否形成临床可用的药物？不清楚。为此，课...
- 关键词：
- 关键词：晶状体蛋白视网膜神经节细胞视神经再生
- LEDGFp52对RGFs无血清Neurobasal培养上清SOD活性和MDA含量的影响研究
- 目的：明确 LEDGp52是否是通过抗氧化途径而对 RGCs 起到保护作用。方法：无血清的 Neurobasal 培养体系培养 RGC,在此基础上分为实验组和对照组,实验组在大鼠 RGCs 培养36h 后分别将 LEDG...
- 赵海生吴楠王一曾玉晓王艳华王晓芹
- 文献传递
- 新生Long Evans大鼠视网膜小胶质细胞原代培养及鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的:建立稳定高产的新生Long Evans大鼠视网膜小胶质细胞(retinamicrogliacellRMG)体外培养、分离的方法。方法:取出生3d内的LongEvans新生大鼠视网膜神经上皮层进行混合细胞培养,10～12d后振荡分离,纯化培养得到小胶质细胞;小胶质细胞的特异性标记IB-4及CD11b进行组化及细胞免疫荧光鉴定,扫描电镜观察细胞表面突起。结果:得到纯度较高的小胶质细胞,IB-4组化及CD11b细胞免疫荧光鉴定纯度分别为94.5%和95.8%,扫描电镜观察细胞表面为棘状突起,明显与巨噬细胞的细胞表面区别。结论:本方法可以得到纯度高的视网膜小胶质细胞。
- 吴楠王艳华刘东宁王一
- 关键词：视网膜小胶质细胞细胞培养LONGEVANS大鼠
- α晶体蛋白对LPS诱导的视网膜小胶质细胞iNOS表达影响研究
- 田春雨王艳华应希王一
- 视神经损伤后Rock在大鼠视网膜中的分布及表达研究被引量：2
- 2006年
- 目的观察视神经损伤后Rock在视网膜中的分布及表达变化。方法取36只成年Long Evans大鼠为研究对象,分为正常,视神经损伤1、3及7d组共4组,每组9只,通过免疫组化染色,研究Rock在视网膜中的分布变化；western blot分析统计Rock表达变化。结果正常及视神经损伤后1d,Rock主要分布于视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)层；3d分布于RGCs及内丛状层；7d分布于RGCs、内丛状层、内核层及外丛状层。western blot示：视神经损伤后3、7d,Rock表达均高于正常组(P＜O．01～0．05)。但7d表达量最高。结论视神经损伤可显著增加Rock在视网膜中的表达量及分布范围,它在视神经损伤后再生过程中发挥重要的作用。
- 王艳华王东武吴楠刘东宁王一
- 关键词：视神经损伤蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶视网膜
