王青林
- 作品数：28 被引量：67H指数：6
- 供职机构：中国水产科学研究院北戴河中心实验站更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家现代农业产业技术体系建设项目中国水产科学研究院基本科研业务费专项基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学经济管理更多>>
- 牙鲆卵原细胞鉴定、分离及纯化的初步研究被引量：1
- 2018年
- 为获得高比例和高数量的卵原细胞,采用酶组合消化和Percoll梯度离心法开展了不同月龄牙鲆卵原细胞分离纯化的研究。通过光学观察及Vasa蛋白在生殖细胞的定位对卵原细胞进行了鉴定区分。结果表明,所获卵巢单细胞悬液中,6月龄每毫克卵巢组织获得的卵原细胞量为(9.86±1.02)×10~4个,显著高于18月龄和30月龄(P<0.05)。Percoll梯度离心后,卵原细胞主要分布于L-15与20% Percoll梯度液间、20%~35% Percoll梯度液间,其占比高达75%以上,显著高于纯化前卵原细胞占比(P<0.05);且细胞存活率高达84%以上,与纯化前细胞存活率无显著性差异(P>0.05)。除18月龄外,6月龄和30月龄每毫克卵巢组织获得的卵原细胞量纯化前后均无显著性差异(P>0.05)。该文通过酶组合消化和Percoll梯度离心的方法对最适月龄—6月龄牙鲆卵原细胞进行分离纯化,最终可获得高比例、高数量和高活性的卵原细胞,为进一步开展牙鲆生殖细胞移植、基因修饰等研究提供了必备的细胞来源。
- 孙朝徽于清海周勤宋立民姜秀凤王青林任建功王玉芬任玉芹
- 关键词：牙鲆纯化VASA
- 一种牙鲆卵原细胞分离纯化方法
- 本发明涉及一种牙鲆卵原细胞分离纯化方法，包括：1).将牙鲆雌鱼性腺组织剥去白膜剪碎、离心后得到的沉淀用组合酶液消化，所得细胞消化液经细胞筛网过滤、离心后重悬得到细胞悬液；其中，所述组合酶液中含有胰蛋白酶以及DNA酶Ⅰ；2...
- 任玉芹孙朝徽王玉芬于清海周勤宋立民姜秀凤王青林司飞
- 文献传递
- 鱼卵模拟运输装置及系统
- 本实用新型提供了一种鱼卵模拟运输装置及系统，包括：水槽、溢流管道、集水管道、泵循环装置、水温调控装置、支架、造流装置；集水管道通过溢流管道与水槽内部连通；泵循环装置进水口通过进水管道与集水管道底部连通，泵循环装置的出水口...
- 司飞于清海王青林孙朝徽任建功王玉芬姜秀凤
- 文献传递
- 亲本高温驯化和囊胚期热应激对刺参幼体生长、发育影响的初步研究被引量：4
- 2015年
- 文章探讨了刺参(Apostichopus japonicus)亲本南方驯化和囊胚期幼体热应激对浮游幼体生长、发育的影响。刺参亲本分为未度夏(DA)组和已度夏(XP)组,每组设置对照组(C)和热应激组(H),在囊胚期对H组进行45min、26℃的高温应激,然后分别在18℃和23℃下培育至变态。结果表明,培育温度对H组和C组幼体的生长有显著影响,C组幼体在23℃下的特定生长率高于18℃,而H组正好相反。从耳状幼体第2天开始,DA组和XP组幼体的最大体长开始出现在H组,这与幼体对饵料的摄取有关。H组幼体的变态率要显著低于C组,这归因于高温应激导致的高畸形率。DA组和XP组幼体的生长、成活以及附着变态率之间差异不显著。鉴于之前研究结果,可通过下述途径获取耐高温刺参苗种:首先在囊胚期进行高温应激获取耐高温幼参,然后在南方进行幼体培育和中间养成,性成熟后进行苗种繁育,最后经过累代选育固定耐高温性状。
- 于姗姗王青林董云伟
- 关键词：刺参热应激
- 干海参的分子生物学鉴别方法
- 干海参的分子生物学鉴别方法，包括以下步骤：采用高盐法提取干海参基因组DNA；利用简并引物PCR扩增CO I基因片段，用限制性内切酶Csp6 I对PCR产物进行酶切；对酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，通过电泳条带的数量和长...
- 董云伟孟宪亮纪婷婷董双林岳欣王青林田相利王芳
- 文献传递
- 盐度骤变对仿刺参hsp70及hsp90基因表达的影响被引量：12
- 2012年
- 为研究夏季暴雨导致的养殖池塘盐度变化对仿刺参(Apostichopus japonicus)生理的影响,在实验室内模拟野外盐度变化,采用半定量RT-PCR的方法研究了其hsp70、hsp90a及hsp90b基因的表达。实验中,盐度先以每6h降2.5的速度由30降至20;保持96h后,再以同样的速度由20升至30,随后在盐度为30条件下保持96h。在盐度变化过程中随机取样。hsp70和hsp90b基因在盐度降至20后表达量开始显著升高(P<0.05),hsp90a基因在盐度降至22.5时表达量开始显著升高(P<0.05);但保持在盐度为20条件下,3个基因的表达量均逐渐降低至初始值。在之后的盐度升高及恢复阶段,3个基因表达量均有先升高后降低的趋势,表明hsp70、hsp90a和hsp90b基因是仿刺参在盐度胁迫下的重要响应因子。
- 于姗姗王青林孟宪亮董云伟董双林
- 关键词：仿刺参盐度热休克蛋白
- 夏眠期间仿刺参生长、肠体比以及RNA／DNA比值变化的研究被引量：4
- 2014年
- 为了深入了解夏眠期间仿刺参(Apostichopus japonicus Selenka)的生长和生理变化,研究了夏眠仿刺参的体质量、肠体比以及RNA/DNA(简称R/D)比值.实验期间,夏眠组水温以每周5℃(0.7℃/d)由16℃缓慢升至26℃,然后在26℃后保持5周;对照组水温在16℃维持7周.期间每周称量仿刺参体质量并取样,测定仿刺参的肠体比比值以及肠、呼吸树和体壁中的R/D比值.实验结果显示,夏眠组仿刺参体质量和肠体比缓慢下降,当进入夏眠阶段后,夏眠组肠体比比值显著低于对照组.夏眠组仿刺参肠、呼吸树和体壁中R/D比值均表现出先升高后降低的趋势,其中夏眠初期的R/D比值显著高于对照组.这说明夏眠过程中仿刺参肠道严重退化,R/D比值可以用于反映夏眠阶段仿刺参的生长特征.本研究丰富了仿刺参的基础研究,对于夏季仿刺参养殖生产有一定的理论指导意义.
- 王青林于姗姗董云伟
- 关键词：仿刺参夏眠RNA
- 一种鱼类早期生活史耳石样品制备方法
- 本发明涉及生物标本制备领域，具体而言，涉及一种鱼类早期生活史耳石样品制备方法，该方法为：于镜下滴加腐蚀性溶液以暴露耳石；用纯化水清洗暴露的耳石多次，同时吸除清洗后的液体和/或组织残余；待耳石室温干燥后用封片剂将耳石包埋，...
- 任玉芹周勤王玉芬王青林司飞姜秀凤于清海张红涛
- 文献传递
- 一种用于刺参夏季培育的复合维生素制剂
- 一种用于刺参夏季培育的复合维生素制剂，涉及一种复合维生素制剂。提供一种能减弱高温对刺参各生长阶段的负面影响的用于刺参夏季培育的复合维生素制剂。包含葡萄糖载体、维生素、微量元素及中草药，维生素包含维生素C和维生素E；微量元...
- 王青林董云伟于姗姗
- 文献传递
- 红鳍东方鲀精原干细胞鉴定、分离及纯化
- 2019年
- 为获得高比例精原干细胞,开展了不同月龄红鳍东方鲀精原干细胞分离纯化研究。采用组合酶消化法制备不同月龄的精巢单细胞悬液,通过形态学观察和生殖细胞特异基因vasa免疫荧光鉴别精原干细胞,Percoll不连续梯度(10%、30%和50%)纯化精原干细胞。结果显示: 14月龄雄鱼精巢生殖细胞主要为A型精原细胞,精原干细胞占比极显著性地高于22月龄(P<0.05)。纯化后精原干细胞主要分布在10%—30%Percoll梯度带中,14月龄雄鱼生殖细胞主要分布在此层,且纯化后精原干细胞占比远高于纯化前以及22月龄纯化前后。结果表明,14月龄更适用组合酶消化分离,并通过Percoll梯度离心法获得高比例的红鳍东方鲀精原干细胞。
- 任玉芹周勤孙朝徽宋立民于清海姜秀凤王玉芬王青林
- 关键词：红鳍东方鲀精原干细胞PERCOLL免疫荧光
