石君帆
- 作品数：38 被引量：49H指数：4
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 结核杆菌H37Rv株重组PstS1蛋白的表达纯化研究
- 目的:表达纯化结核杆菌H37Rv株重组PstS1(简称rPstS1)蛋白，为结核病血清学诊断价值研究及亚单位疫苗研制提供物质基础。
方法：重组质粒pET15b-PstS1转化大肠埃希菌表达菌株BL21(DE3)...
- 石君帆宋广忠泮结超漏磊君John T.Belisle
- 关键词：亚细胞定位结核
- 文献传递
- 结核分枝杆菌rESAT-6-CFP-10融合蛋白的制备及其血清学诊断价值被引量：4
- 2010年
- 目的 表达、纯化结核分枝杆菌rESAT-6-CFP-10（rEC）融合蛋白,评价其在结核病血清学诊断方面的应用价值.方法 用镍离子螯合亲和层析柱纯化融合蛋白,用ELISA法检测血清样本中的抗结核抗体,以37例PPD阴性患者正常血清A492＋2s为正常限值,评价rEC诊断的特异性及灵敏度.结果 rEC融合蛋白在大肠埃希菌中以可溶性非包涵体形式表达,表达浓度为0.19 mg/mL.rFC检测抗结核抗体在PPD阳性健康人群中的特异性为100%（30/30）,在痰涂片或细菌培养阳性和两法均阴性的结核病患者中灵敏度分别为75.56%（34/45）和67.3]%（35/52）.结论 结核分枝杆菌rEC融合蛋白以可溶性形式高效表达,具有较强的免疫反应性和较高的血清学诊断价值.
- 石君帆宋广忠泮结超漏磊君杨明瑾李召东
- 关键词：血清学诊断
- ^(60)Co-γ射线辐照对蛤蟆油营养成分的影响研究被引量：2
- 2010年
- 目的:研究食品原料蛤蟆油经60Co-γ射线照射后营养成分的变化。方法:采用0、5、10、15 kGyγ射线对蛤蟆油进行辐照,以加速试验来评价辐照前后营养成分变化与辐照剂量的相关性。结果:在5~15 kGy剂量范围内,5 kGy辐照前后维生素D,E含量变化均无显著性差异(P>0.05),而10~15 kGy辐照以及加速试验均使蛤蟆油中维生素A,E含量显著降低(P<0.01),维生素D受照射影响较小;脂肪酸在5~15 kGy辐照后变化不明显,但加速试验发现15 kGy使脂肪酸含量显著提高;经SDS-PAGE分析其分子量为20 KD的蛋白区带随辐照剂量增加而变深。结论:60Co照射动物性高蛋白、低脂肪、低维生素固体样品,在高辐照剂量下加速试验均有不同程度影响,但5 kGy剂量辐照还是安全的。
- 江月仙王晗石君帆王茵
- 关键词：食品辐照蛤蟆油营养成分
- 结核分支杆菌重组蛋白rCFP-10的表达、纯化及免疫反应性分析
- 2009年
- 目的表达、纯化结核分支杆菌H37Rv株重组蛋白rCFP—10，评价其免疫反应性，为结核病血清学诊断价值研究及亚单位疫苗研制提供物质基础。方法重组质粒pET23b—CFP-10转化E．coli表达菌株BL21（DE3）pLysE，IPTG诱导重组蛋白rCFP-10表达。经SDS—PAGE电泳和Westernblotting鉴定后，优化表达条件用镍离子鳌合亲和层析柱HisTrap^TMHP纯化重组蛋白，最后用斑点金免疫渗滤法初步评价纯化蛋白的免疫反应性。结果成功构建了重组质粒pET23b—CFP-10并且重组蛋白rCFP-10以可溶性形式高效表达，表达量约占菌体总蛋白的10％。经亲和层析后得到高纯度有免疫反应性的重组蛋白（纯度约为98．5％）。结论高纯度有免疫反应性的重组蛋白rGFP-10为新型亚单位疫苗的研发及其结核病血清学诊断价值研究奠定了基础。
- 宋广忠石君帆泮结超杨明瑾漏磊君John T. Belisle
- 关键词：CFP-10血清学诊断亚单位疫苗结核
- 人源性rhG-CSF单链抗体基因的克隆和表达
- 2005年
- 从构建的噬菌体表面展示文库中,筛选出全新的人源抗重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)特异单链抗体(ScFv)的噬菌体克隆.ScFv被克隆到pCANTAB5E载体上,以E.coliTG1为宿主,进行噬菌体表面呈现,以rhGCSF为靶抗原进行免疫亲和富集筛选,经酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定,得到一株高亲和力克隆.DNA序列分析表明,该ScFv基因全长733bp,其中重链可变区(VH)为366bp,轻链可变区(VL)为322bp.抗rhG-CSF的ScFv在E.coliHB2151中以可溶形式分泌表达,产物主要分布于周质中,占周质总蛋白的质量分数为20%～25%,经免疫印迹试验(Westernblot)分析显示该单链抗体黏均分子量为31kD.
- 石君帆钱凯先杜润潘
- 关键词：单链抗体克隆
- 结核杆菌重组抗原的克隆表达及其
- 石君帆曾肖芃宋广忠丁建祖闻礼永杨明瑾漏磊君严晓岚泮结超楼涤
- 简要技术说明本研究通过克隆表达及纯化结核杆菌H37Rv重组抗原及蛋白ESAT-6、Pst-S1、CFP10、KatG、CW、LAM等作为靶抗原，对其免疫原性进行鉴定，检测结核病人TB患者血清，观察其在免疫学诊断中的敏感性...
- 关键词：
- 关键词：抗原
- 单克隆抗体的制备及其应用研究进展被引量：2
- 2009年
- 抗体是机体免疫系统的重要效应分子,从第一代多克隆抗体(polyclonal antibody,PcAb)到第二代单克隆抗体的成功制备,人们投入了大量的临床应用研究。
- 泮结超石君帆
- 噬菌体展示抗体库技术及其应用
- 2011年
- 噬菌体抗体库技术的出现为人源性抗体的制备提供了良好的技术平台，并且逐渐成为目前获得人源性抗体的主要手段之一。噬菌体抗体库技术是20世纪90年代初期抗体工程领域的一项重大进展，它是噬菌体展示和抗体文库两种技术的集成，目前广泛应用于生物医学领域。此文对该技术的构建、亲和筛选方法及其应用价值进行了综述。
- 泮洁超石君帆
- 关键词：细菌噬菌体抗体库
- 结核分支杆菌耐药基因KatG的克隆、表达及活性测定
- 目的 KatG基因与结核杆菌耐异烟肼有关,若KatG基因突变或缺失可致结核分支杆菌对INH产生耐药性。有必要在蛋白水平对耐药机制进行进一步研究,这对深入研究INH耐药机制以及探索消除耐药途径等均有重要意义。克隆表达结核分...
- 石君帆宋广忠漏磊君杨明瑾John T.Belisle
- 关键词：KATG耐药机制亚细胞定位结核
- 结核杆菌H37Rv株重组PstS1蛋白的表达纯化及其免疫反应性分析被引量：2
- 2011年
- 目的表达、纯化结核杆菌H37Rv株重组PstS1(简称rPstS1)蛋白,为结核病血清学诊断价值研究及亚单位疫苗研制提供物质基础。方法重组质粒pET15b-PstS1转化大肠埃希菌表达菌株BL21(DE3)plysE,IPTG诱导rPstS1蛋白表达。经SDS-PAGE电泳和Western blot鉴定后,优化表达条件,用镍离子鳌合亲和层析柱纯化rPstS1蛋白,并用斑点金免疫渗滤法评价纯化蛋白的免疫反应性。结果成功构建了重组质粒pET15b-PstS1,相对分子质量为38×103的rPstS1蛋白约有30%以可溶性蛋白形式表达,经亲和层析后的rPstS1蛋白纯度为94.8%,有较好的免疫反应性。结论构建的重组质粒pET15b-PstS1能高效表达有免疫反应性的rPstS1蛋白,经亲和层析后可得到高纯度的纯化蛋白。
- 石君帆宋广忠泮结超漏磊君李召东
- 关键词：亚细胞定位结核
