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禽呼肠病毒P10、P17非结构蛋白基因的克隆及序列分析被引量：4: 2006年; 根据GenBank上的禽呼肠病毒（ARV）S1基因序列，设计并合成了一对跨越P10和P17非结构蛋白基因的特异性引物，对13个ARV毒株进行RT—PCR扩增、克隆及序列测定。结果显示，13个ARV毒株的P10蛋白基因ORF全长均为297bp，编码98个氨基酸；P17蛋白基因ORF全长为441bp，编码146个氨基酸。这13个ARV毒株P10、P17蛋白基因核苷酸同源性分别在96．6%～100%和95．2％～99．3%之间，推导的氨基酸同源性分别在98．2％～100%和91．9%～99．0%之间。将这13个ARV毒株与Gen Bank上其他正呼肠病毒毒株，包括番鸭株（DRV）和飞狐上分离到的内尔森海湾病毒（Nelson Bay Vir US，NBV）及两个澳洲分离株（ARM—1和SOM-4）进行同源性比较和遗传进化树分析，结果表明，呼肠病毒有地域和种类的差别。; 秦春香谢芝勋谢丽基; 关键词：禽呼肠病毒克隆

禽呼肠孤病毒非结构蛋白的克隆表达及重组蛋白ELISA方法的建立: 根据GenBank上的禽呼肠病毒(ARV)S1基因序列，设计并合成了一对跨越P10和P17非结构蛋白基因的特异性引物，对13个ARV毒株进行RT-PCR扩增、克隆及序列测定。结果显示，13个ARV毒株的P10蛋白基因OR...; 秦春香; 关键词：禽呼肠孤病毒非结构蛋白蛋白纯化酶联免疫吸附试验; 文献传递

禽呼肠孤病毒P10、P17非结构蛋白基因的克隆及序列分析: 本文根据GenBank上的禽呼肠孤病毒(ARV)S1基因序列,设计并合成了一对跨越P10和P17非结构蛋白基因的特异性引物.对ARV的13个毒株进行RT-PCR扩增、克隆及序列测定.结果显示,13个ARV毒株的P10蛋白...; 秦春香谢芝勋谢丽基; 关键词：禽呼肠孤病毒非结构蛋白基因克隆; 文献传递

禽呼肠孤病毒δNS和P17非结构蛋白作为ELISA鉴别诊断抗原的研究: 采用已构建好的PGEX-4T-1-δNS和PGEX-4T-1-P17质粒,原核表达了禽呼肠孤病毒(ARV)的两个非结构蛋白δNS和P17,将这两个蛋白进行包涵体纯化后作为包被用抗原,分别进行间接ELISA,并确定它们的最...; 谢芝勋秦春香谢丽基刘加波庞耀珊邓显文谢志勤; 关键词：禽呼肠孤病毒原核表达间接ELISA; 文献传递

利用σ3和σ2重组蛋白检测禽呼肠孤病毒抗体ELISA的建立被引量：9: 2009年; 将纯化好的两个ARV结构蛋白σ3和σ2作为包被用抗原,分别进行间接ELISA,并确定它们的最佳抗原包被浓度分别为9.5、12.0μg/mL;一抗血清的稀释度为1∶200;HRP酶标羊抗鸡IgG稀释度为1∶5000,初步建立了能检测ARV抗体的σ3-ELISA、σ2-ELISA以及σ3、σ2两个蛋白同时包被的σ3-σ2-ELISA检测方法。分别用上述3种方法对制备的ARV SPF鸡阳性血清进行检测,结果阳性检出率分别为90.91%、69.70%和100%。表明σ3-σ2-ELISA方法在ARV抗体检测方面具有较高的敏感性。; 秦春香谢芝勋谢丽基刘加波庞耀珊邓显文谢志勤; 关键词：禽呼肠孤病毒结构蛋白间接ELISA

禽呼肠孤病毒μNS非结构蛋白基因的克隆及序列分析: 本文根据GenBank中禽呼肠孤病毒(ARV)M3基因序列设计并合成了一对跨越μNS非结构蛋白基因完整开放阅读框(ORF)的特异性引物。对ARV的10个毒株进行RT-PCR扩增、克隆及序列测定。结果表明,10个毒株μNS...; 秦春香谢芝勋谢丽基; 关键词：禽呼肠孤病毒克隆

禽呼肠孤病毒σNS基因的克隆及其功能分析被引量：5: 2007年; 采用RT-PCR技术对8株禽呼肠孤病毒(ARV)σNS基因进行了扩增,将获得的PCR产物分别与pMD18-T载体连接。测序结果表明,所构建的克隆质粒中均含有相应的σNS蛋白基因,大小为1 107bp。经DNAStar软件分析,除R1株外,其他ARV毒株的σNS基因核苷酸及其推导氨基酸序列与标准毒株S1133和1733株的同源性很高。Antheprot 5.0蛋白分析软件的分析结果表明,σNS蛋白无跨膜区,拥有较多的疏水区和抗原位点,可作为诊断候选蛋白。; 谢丽基谢芝勋秦春香; 关键词：禽呼肠孤病毒克隆

禽呼肠孤病毒P17蛋白基因在大肠杆菌中的表达及其ELISA检测方法的建立被引量：7: 2007年; 用设计合成的1对跨越禽呼肠孤病毒(ARV)P17非结构蛋白基因完整开放阅读框(ORF)的特异性引物,对ARV S1133株进行了RT-PCR扩增。扩增产物与pGEX-4T-1原核表达载体连接后,转化大肠杆菌BL21感受态细胞。经0.2 mmol/LIPTG诱导,表达的融合蛋白分子质量为42.4 ku,占菌体总蛋白的34%。表达产物P17蛋白经不同浓度尿素纯化后,纯度达到85%。Western-blotting显示,纯化的P17蛋白能与感染ARV的阳性血清反应,说明其具有抗原性。以此重组蛋白为包被抗原初步建立了用于鉴别检测ARV活病毒感染与灭活疫苗免疫的SPF鸡血清的ELISA。; 谢芝勋秦春香谢丽基; 关键词：禽呼肠孤病毒原核表达酶联免疫吸附试验

禽呼肠孤病毒δ3和δ2重组蛋白作为ELISA检测抗原的研究: 将纯化好的两个ARV结构蛋白δ和δ作为包被用抗原,分别进行间接ELISA,并确定它们的最佳抗原包被浓度分别为9.5μg/mL和12.0μg/mL;一抗血清的稀释度为1:200;HRP酶标羊抗鸡IgG稀释度为1:5000。...; 秦春香谢芝勋谢丽基刘加波庞耀珊邓显文谢志勤; 关键词：禽呼肠孤病毒结构蛋白间接ELISA; 文献传递

禽呼肠孤病毒感染禽和疫苗免疫禽ELISA鉴别方法的建立: 采用已构建好的PGEX-4T-1-δNS和PGEX-4T-1-P17质粒,原核表达了禽呼肠孤病毒(ARV)的两个非结构蛋白δNS和P17,将这两个蛋白进行包涵体纯化后作为包被用抗原,分别进行间接ELISA,并确定它们的最...; 谢芝勋秦春香谢丽基刘加波庞耀珊邓显文谢志勤; 关键词：禽呼肠孤病毒原核表达间接ELISA; 文献传递

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秦春香