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淫羊藿素和脱水淫羊藿素对骨髓间充质干细胞成骨性分化影响的比较研究被引量：12: 2011年; 目的比较研究淫羊藿素和脱水淫羊藿素对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone marrow stromal cells,rBMSCs)成骨性分化的影响。方法贴壁筛选法体外培养rBMSCs,以1×10-5 mol.L-1的淫羊藿素和脱水淫羊藿素对rBMSCs的成骨性分化进行药物干预,比较淫羊藿素组、脱水淫羊藿素组以及不加药的对照组之间碱性磷酸酶(ALP)活性、ALP阳性克隆数(colonies stained positive for alkaline phosphatase,CFU-FALP)、骨钙素分泌量、钙盐沉积量以及钙化结节数量的差异,Real TimeRT-PCR法检测IGF-1、Osterix和Runx-2的基因表达情况。Western-blot法检测Ⅰ型胶原蛋白的分泌量。结果淫羊藿素可显著增强rBMSCs的ALP活性,促进钙盐沉积和骨钙素的分泌,增加CFU-FALP和钙化结节数量,提高IGF-1、Osterix和Runx-2的mRNA水平,同时也可增强Ⅰ型胶原蛋白的分泌,而脱水淫羊藿素并未表现出类似效应。结论淫羊藿素促进rBMSCs成骨性分化的活性显著高于脱水淫羊藿素,可能是二者异戊烷链上的构型差异,导致淫羊藿素的生物活性强于脱水淫羊藿素,提示我们可以通过对药物进行化学结构的改造,增强药效,降低毒性,从而研究开发出新型抗骨质疏松药物。; 翟远坤李志忠陈克明张娜程国政朱瑞清; 关键词：淫羊藿素骨髓间充质干细胞成骨性分化 I型胶原

8-异戊烯基柑橘素促进体外骨髓基质干细胞成骨性分化的研究被引量：3: 2011年; 目的研究8-异戊烯基柑橘素对体外培养大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)的增殖与成骨性分化的影响。方法取大鼠股骨及胫骨全骨髓,利用全骨髓培养法培养于含体积分数为10%FBS的DMEM-F12培养液中。以碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)为指标,96孔板梯度筛选作用最佳浓度。增殖分析采用MTT法。以1×10-6 mol.L-1的最佳浓度作用并成骨性诱导(1×10-7mmol.L-1地塞米松、10 mmol.L-1β-甘油磷酸钠和50 mg.L-1抗坏血酸)培养的d 4、8、12、16测ALP活性、钙盐沉积量,d 16进行ALP和钙化结节组织化学染色及计数。成骨性诱导后不同时间点提取Total RNA,RT Real-Time PCR法检测bFGF、IGF-1、Osterix、Runx-2、BMP-2及COL-Ⅰ的基因表达情况。结果 8-异戊烯基柑橘素不能促进BMSCs增殖,但8-异戊烯基柑橘素在1×10-6 mol.L-1时能促进其向成骨性分化,表现为提高BMSCs的ALP活性、促进钙盐沉积、增加钙化结节数量、提高bFGF、IGF-1、Osterix、Runx-2、BMP-2及COL-Ⅰ的mRNA表达水平。结论 8-异戊烯基柑橘素可诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化,作为促进骨修复和抗骨质疏松的有效成分具有较大的药用价值。; 明磊国陈克明葛宝丰马慧萍翟远坤; 关键词：骨髓基质干细胞骨形态发生蛋白 OSTERIX

黄芩苷通过Wnt/β-catenin信号通路对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的促进作用被引量：27: 2015年; 目的研究黄芩苷（baicalin）对大鼠骨髓间充质干细胞（rat bone marrow derived mesenchymal stem cells,rBMSC）成骨分化过程中Wnt/β-catenin信号通路的影响.方法采用贴壁筛选法体外培养rBMSC,给予黄芩苷3、5、7d后,比较药物处理组与对照组之间碱性磷酸酶（ALP）的活性.同时检测给予黄芩苷对碱性磷酸酶阳性克隆和矿化结节形成的影响.提取总mRNA和总蛋白,用实时荧光定量PCR检测黄芩苷对Wnt10a、GSK-3β、β-catenin以及LEF1mRNA水平的影响.免疫印迹检测药物处理对β-catenin以及Runx2蛋白表达量的影响.结果黄芩苷明显提高ALP的活性.10μmol·L-1浓度的黄芩苷还可增加碱性磷酸酶克隆数和钙化结节的形成.黄芩苷还可提高Wnt10a、β-catenin、GSK-3β、LEF1以及osteocalcin的mRNA水平,并提高β-catenin和Runx2的蛋白表达量.结论黄芩苷在0.1～50μmol·L^-1的给药浓度下可促进rBMSC的成骨分化成熟,Wnt/β-cate-nin信号可能参与调控rBMSC的成骨分化.; 李晨睿孟志远牛银波翟远坤潘亚磊谢丽梅其炳; 关键词：黄芩苷大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化 WNT/Β-CATENIN信号通路碱性磷酸酶

柚皮苷对体外培养乳鼠颅骨成骨细胞增殖和分化成熟的影响被引量：33: 2013年; 目的:研究柚皮苷对体外培养大鼠乳鼠颅骨成骨细胞(rat calvarial osteoblasts,ROB)增殖和分化成熟的影响。方法:取新生SD大鼠颅骨,多次酶消化法培养ROB,每3 d换液1次,铺满80%皿底后传代培养。采用终浓度分别为1×10-4,1×10-5,1×10-6,1×10-7mol·L-1的柚皮苷进行药物干预,MTT法检测细胞增殖率,同时检测成骨性诱导培养9 d后的碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,筛选出最佳浓度。以最佳药物浓度干预ROB的分化成熟,比较柚皮苷组和不加药的对照组之间的骨钙素(osteocalcin,OC)、骨桥蛋白(oesteopontin,OPN)、骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)的分泌量;提取总RNA,Real-time RT-PCR检测bFGF,IGF-1,Runx-2,Osterix,ERα和ERβ的mRNA水平;Western-blot法检测ERα,ERβ和Ⅰ型胶原蛋白的表达量;并用雌激素竞争性抑制剂ICI 182.780进行阻断,观察阻断前后各指标的变化情况。结果:柚皮苷剂量依赖性刺激成骨细胞的增殖,并可强烈促进ROB的分化成熟。最佳药物浓度为1×10-5mol·L-1,该浓度下的柚皮苷可明显提高OC,OPN和BMP-2的分泌量,促进与成骨相关的因子bFGF,IGF-1,Runx-2,Osterix和雌激素受体基因ERα及ERβmRNA的表达,同时也可增强ERα,ERβ和Ⅰ型胶原蛋白的分泌,但以上效果均可被阻断剂ICI 182.780所抑制。结论:浓度为1×10-5mol·L-1的柚皮苷可显著促进ROB的增殖与分化成熟,并且该促进效果会被雌激素通路阻断剂ICI 182.780所抑制,表明柚皮苷属于植物雌激素,通过雌激素信号通路发挥其促骨形成活性,可以用于骨质疏松症的防治。; 翟远坤牛银波潘亚磊李晨睿武祥龙梅其炳; 关键词：柚皮苷成骨细胞植物雌激素

淫羊藿苷含药血清对体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖与分化的影响被引量：8: 2009年; 目的研究淫羊藿苷含药血清（Serum of rat sadministered icariin,SI）对体外培养大鼠颅骨成骨细胞（Rat calvarial osteoblasts,ROB）增殖和分化成熟的影响。方法以每1kg体重0.25g淫羊藿苷的剂量灌服成年大鼠制得淫羊藿苷含药血清,以灌服等体积生理盐水制得对照血清。分别以2.5%,5%和10%3种浓度加入ROB培养基,检测对成骨细胞增殖、碱性磷酸酶（ALP）活性和钙化结节数等的影响。结果2.5%和5%SI均促进细胞的增殖,尤以5%浓度更为明显,该浓度含药血清提高ROB的ALP活性,增加Ⅰ型胶原表达,并显著提高钙化结节形成数量。结论淫羊藿经口服后的代谢产物可刺激成骨细胞增殖,促进其分化成熟,是淫羊藿抗骨质疏松的有效成分。; 程国政李志锋翟远坤陈克明; 关键词：淫羊藿苷血清分化成骨细胞

3,4,5-三甲氧基苯甲酰胺类化合物的合成及抗疲劳活性被引量：2: 2014年; 3,4,5-三甲氧基苯甲酸与三氟乙酸琥珀酰亚胺酯反应生成活性中间体,再与含氮杂环缩合得到3,4,5-三甲氧基苯甲酰胺化合物1a^1e。以小鼠负重游泳实验模型评价目标化合物的抗疲劳活性,并测定对大鼠大脑皮质AMPA受体结合的半数抑制浓度IC50值,结果显示1a、1b具有较好的抗疲劳活性且与AMPA受体结合力较强。; 范於菟武祥龙潘亚磊翟远坤梅其炳

不同干预时间正弦电磁场对大鼠骨髓基质干细胞成骨性分化的影响被引量：3: 2010年; 目的:研究不同治疗时间正弦电磁场(50 Hz,1.8 mT)对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞成骨性分化的影响,筛选出最佳临床治疗时间。方法:采用贴壁筛选法培养原代大鼠骨髓间充质干细胞,每天在频率为50 Hz,强度为1.8 mT的磁场环境中处理0.5 h、1.0 h、1.5 h、2.0 h和2.5 h;同时设立未经电磁场处理的细胞作为对照组。于处理后的第3 d、6 d、9 d和12 d分别测定细胞碱性磷酸酶活性、骨钙素分泌量、钙化结节数以及Ⅰ型胶原表达量,并比较各组间差异;于处理后12 h提取细胞总RNA,用RT Real-TimePCR法检测成骨性分化基因Osterix表达情况。结果:正弦电磁场干预1.0 h能明显促进骨髓间充质干细胞的成骨性分化,表现在该组的碱性磷酸酶活性、骨钙素分泌量、钙化结节数、I型胶原表达量以及成骨性分化基因的表达量最高,亦显著高于对照组(P<0.05)。结论:50Hz、1.8mT强度的正弦电磁场能促进骨髓间充质干细胞的成骨性分化,以作用1.0 h成骨效果最为明显。; 程国政王鸣刚陈克明翟远坤朱瑞清韩桂秋周建明磊国; 关键词：正弦电磁场间充质干细胞分化

黄芪总黄酮对大鼠原代成骨细胞的影响及其机制研究被引量：3: 2012年; 在大鼠颅骨原代成骨细胞中加入不同浓度的黄芪总黄酮(ATF),用MTT法检测细胞增殖,用碱性磷酸酶(ALP)活性、Ⅰ型胶原及骨钙素水平检测细胞分化,用茜素红染色法检测细胞矿化,用ELISA法和Western blot方法检测成骨细胞中骨形成蛋白(BMP-2)及核心结合因子(Runx-2)的表达。结果表明,ATF能剂量依赖性地促进大鼠原代成骨细胞的增殖、分化及矿化,同时上调成骨细胞中BMP-2和Runx-2蛋白的表达。提示ATF可能通过上调成骨细胞中BMP-2和Runx-2的表达来促进成骨细胞的成骨活性。; 孔祥鹤牛银波武祥龙翟远坤潘亚磊李晨睿梅其炳; 关键词：黄芪总黄酮增殖分化矿化 BMP-2

一种杜仲叶大枣饮料的制备方法: 本发明涉及一种杜仲叶大枣饮料的制备方法，其特征在于步骤如下：首先将杜仲叶分拣、淋洗、烘干，再将干杜仲叶和大枣分别用一定量纯净水煮沸浸提一定时间，其次，将杜仲叶浸提液、大枣浸提液、少量蜂蜜和白砂糖以一定比例配比，最后加入一...; 潘亚磊武祥龙翟远坤牛银波孔祥鹤范於菟梅其炳; 文献传递

一种治疗骨质疏松的中药组合物及其制备工艺: 本发明主要涉及一种治疗骨质疏松的中药组合物及其制备工艺，所述的配方按照重量份数由原料药黄芪25-35份、党参13-17份、当归10-14份、杜仲14-16份、淫羊藿14-16份、元胡9-11份、没药9-11份和鸡血藤16...; 孔西建杜天信郭艳幸叶进吴丹翟远坤毛春焕李盈盈李智红; 文献传递

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翟远坤

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