袁艳军
- 作品数：3 被引量：1H指数：1
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- JNK信号传导通路在抗人DR5单克隆抗体mDRA-6诱导白血病细胞凋亡中的作用
- 2009年
- 目的:探讨JNK信号传导通路在抗人DR5单克隆抗体mDRA-6诱导白血病细胞Jurkat和U937凋亡过程中的作用。方法:MTT法检测mDRA-6对Jurkat和U937细胞的生长抑制作用;以Caspase抑制剂Z-VAD-FMK和JNK抑制剂SP600125进行干预,采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术定量分析Jurkat和U937细胞凋亡;利用免疫印迹技术检测mDRA-6作用下凋亡细胞的JNK蛋白的表达情况。结果:mDRA-6对Jurkat和U937细胞具有明显的生长抑制作用;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测显示,10μg/ml的mDRA-6作用Jurkat和U937细胞3小时,其凋亡率分别为62.62%和35.65%,JNK抑制剂干预后细胞凋亡明显增加;免疫印迹技术检测显示,mDRA-6作用细胞5分钟后JNK即呈现活性片段表达,并随作用时间的延长其活性增强,而Caspase全抑制剂干预后,5、15分钟JNK磷酸化增强,但随后随时间递减。结论:mDRA-6抑制Jurkat和U937细胞生长并诱导其凋亡,其凋亡过程中有JNK的激活并发挥抗凋亡作用。
- 蔡静李淑莲王靖王赟袁艳军蒋祺秦方园马远方
- 关键词：JNK白血病细胞凋亡
- 水流动力学方法进行基因免疫制备高效价抗体被引量：1
- 2009年
- 用水流动力学方法进行基因免疫,制备小鼠高效价多克隆抗体。采用水流动力学方法和肌肉注射pcDNA3.0/DR5免疫小鼠,分批在0、2、4、6周进行免疫,初次免疫8周后取鼠尾血用ELISA方法检测小鼠抗DR5抗体效价,用Westernblot、免疫组化染色法检测抗体的特异性。结果表明,ELISA结果显示末次免疫后水流动力学免疫组抗体滴度最高可达到为1∶102 400,肌肉注射免疫组抗体滴度最高可达1∶25 600。Western blot结果显示,小鼠抗DR5多克隆抗体识别Jurkat细胞的DR5蛋白条带。免疫组化结果表明,转染的DR5蛋白主要分布在食管癌细胞膜附近,与预期相符。用水流动力学的方法可以成功制备比肌肉注射更高效价的多克隆抗体。
- 袁艳军王艳鸽刘峰涛马远方
- 关键词：肌肉注射多克隆抗体DR5
- 水流动力学进行基因免疫制备单克隆抗体
- 自抗体技术产生以来，通常以蛋白质作为抗原免疫小鼠。这些用于免疫的蛋白质通常从组织细胞中分离提纯或通过基因工程表达，其制备过程操作繁杂，且实验周期长;有些蛋白质的构象表位易发生改变，有些蛋白质甚至无法获得。用合成肽来取代蛋...
- 袁艳军
- 关键词：基因免疫单克隆抗体基因工程血清学诊断特异性抗体基因克隆
- 文献传递
