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谢靖: 作品数：13 被引量：26H指数：4; 供职机构：军事医学科学院疾病预防控制所更多>>; 发文基金：“重大新药创制”科技重大专项国家自然科学基金“十一五”国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

合作作者

hTERT基因组成型过量表达的Vero细胞系的建立被引量：2: 2010年; 目的:建立组成型过量表达hTERT的Vero细胞系。方法:从质粒pCI-neo-hTERT酶切、分离纯化hTERT cDNA,克隆入phEF/chMAR-hyg载体中,构建重组真核表达质粒phEF/chMAR-hyg-hTERT。采用脂质体转染法转染Vero细胞,经潮霉素筛选、克隆分离培养,用RT-PCR检测转染阳性细胞克隆的hTERT mRNA表达丰度,Western blotting验证高丰度表达hTERT mRNA克隆的hTERT表达。用Cedex AS20细胞密度和活力分析系统考察过量表达hTERT Vero细胞在组织培养板中批次培养的生长特性。结果:从phEF/chMAR-hyg-hTERT转染阳性细胞中筛选出hTERT mRNA和蛋白高丰度表达的Vero细胞系(Vero-T1),Vero-T细胞在批次培养中后期的细胞密度和活力均高于野生型Vero细胞。结论:成功建立了hTERT基因组成型过量表达的Vero细胞系,为探索以组成型过量表达hTERT的技术途径改善细胞培养特性、提高病毒疫苗生产工艺水平奠定了基础。; 王海涛叶玲玲李世崇刘红谢靖吴本传陈昭烈; 关键词：HTERT VERO细胞细胞系

一种新的半月板切断导致小鼠骨关节炎方法的建立被引量：7: 2013年; 目的建立一种创面小、操作简单且重复性高的半月板切断术诱发小鼠骨关节炎的手术方法。方法小鼠膝关节内侧皮肤剪开暴露术野,剪断内侧副韧带形成一个小切口,切断半月板上下缘的关节囊暴露内侧的半月板,从切口处进针,将内侧半月板用改造过的胰岛素注射笔针头钩出并剪断,缝合肌肉及皮肤。结果番红O染色结果表明,与对照侧关节相比,术后1周,全部手术侧关节表面开始发生磨损,关节软骨胞外基质蛋白聚糖减少;随着时间延长,手术侧关节表面磨损范围逐步扩大,关节软骨胞外基质蛋白聚糖丢失程度明显加剧,直至软骨下骨暴露于关节腔中。手术侧Mankin分值显著高于对照侧,且随术后时间延长手术侧Mankin分值逐步稳定递增。结论建立了一种新的半月板切断术,可简便、可靠地诱导小鼠发生骨关节炎。; 谢靖杨冠; 关键词：小鼠

软骨细胞特异性敲除Pten基因导致小鼠发生骨关节炎: 骨关节炎/(osteoarthritis, OA/)是由多种因素引起的关节软骨的退行性病变及关节腔内骨赘形成并伴随关节周围滑膜炎症的一种关节疾病。年龄、肥胖、性别、关节创伤、炎症、遗传等多种因素都参与到OA的发生及进展中...; 谢靖; 关键词：骨关节炎 PTEN; 文献传递

心肌特异性启动子表达载体的构建及其功能鉴定: 2009年; 本研究构建了心肌特异性α-肌球蛋白重链(α-MHC)启动子表达载体,并对其功能进行了鉴定。以小鼠基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到α-MHC启动子,插入pGEM-TEasy载体,酶切后回收目的片段,置换pcDNA3.1(+)-EGFP-hygro中的CMV启动子,成功构建出α-MHC-EGFP表达载体。对其进行酶切鉴定后,通过电穿孔法转染原代小鼠心肌细胞,转染阳性的心肌细胞出现绿色荧光,而非心肌细胞无荧光出现。α-MHC-EGFP表达载体具有心肌特异性表达特性,可用于纯化胚胎干细胞来源的心肌细胞。; 何文俊李世崇叶玲玲王启伟王海涛谢靖刘红陈昭烈; 关键词：心肌细胞胚胎干细胞启动子增强型绿色荧光蛋白

一种支持CHO细胞大规模高密度悬浮培养的无血清培养基: 本发明公开了一种适于CHO细胞大规模高密度悬浮培养的无血清培养基。该培养基是以DMEM/F12(v/v，1∶1)为基础培养基，并添加了胰岛素、腐胺、转铁蛋白及微量元素等其它物质。本发明提供的无血清培养基具有以下优点：能够...; 刘兴茂陈昭烈刘红李世崇吴本传叶玲玲谢靖王启伟

骨关节炎软骨细胞发生内质网应激被引量：1: 2013年; 目的:研究骨关节炎软骨细胞是否发生内质网应激现象。方法:对关节置换术后的人类骨关节炎软骨标本和正常关节软骨标本切片进行内质网应激标志分子免疫球蛋白重链结合蛋白(BiP)的免疫组织化学检测;对小鼠膝关节进行半月板切断术诱发实验性骨关节炎,在术后1、3和6周取材,对组织切片进行番红花"O"染色、Mankin评分及BiP的免疫组织化学检测。结果:所有人类骨关节炎标本中软骨细胞BiP的表达明显升高。番红花"O"染色结果表明,在小鼠骨关节炎模型中,全部手术侧关节表面发生磨损,且随着术后时间延长关节表面磨损范围逐步扩大,手术侧Mankin分值显著高于对照侧;此外,手术侧的软骨细胞内BiP呈阳性表达,且表达量随术后时间延长而增加。结论:在人类骨关节炎标本和实验性小鼠骨关节炎模型中,关节软骨细胞均发生明显的内质网应激现象。; 谢靖杨冠; 关键词：骨关节炎内质网应激

细菌信号小分子耐药机制的相关研究进展被引量：1: 2015年; 细菌耐药性问题已逐渐成为社会广泛关注的问题。然而,可运用于临床的新型抗生素却十分匮乏。这主要是因为细菌的耐药机制极其复杂,我们对细菌耐药机制的理解不够全面和深入。近几年,多种生物小分子被发现能够使细菌获得广谱的耐药性,并被证明是广泛存在于细菌中的一种耐药机制,这是对目前细菌耐药理论和模型的一个非常重要的补充,更有助于在抗生素的研发过程中寻找新的作用靶标。我们通过总结分析一氧化氮、硫化氢及吲哚这3种信号小分子与细菌耐药的相关研究进展,探讨信号小分子使细菌获得耐药性的相关机制。; 易胜杰谢靖邱少富宋宏彬; 关键词：信号分子细菌耐药机制氧化应激

CHO工程细胞(11G-S)悬浮培养的无血清培养基的设计被引量：6: 2010年; 以悬浮适应的表达重组尿激酶原(Pro-urokinase,pro-UK)CHO工程细胞系11G-S为对象,采用Plackett-Burman实验设计及响应面分析法,设计支持CHO工程细胞(11G-S)悬浮生长的无血清培养基。以细胞密度为评价指标,在单因素实验的基础上采用Plackett-Burman实验设计对影响细胞生长的培养基添加成分进行考察,确定了3种对细胞生长明显促进作用的培养基添加成分:胰岛素、转铁蛋白及腐胺。继而利用响应面法分析了这3种添加成分的最佳水平范围,设计了一种适用于CHO工程细胞(11G-S)悬浮培养的无血清培养基SFM-CHO-S。11G-S细胞在SFM-CHO-S批次悬浮培养的细胞最大生长密度达到4.12×106cells/mL,pro-UK的最大累积活性达到5614IU/mL,培养效果优于商品化的同类无血清培养基。; 刘兴茂刘红叶玲玲李世崇吴本传王海涛谢靖陈昭烈; 关键词：CHO工程细胞无血清培养基

一种支持CHO细胞大规模高密度悬浮培养的无血清培养基: 本发明公开了一种适于CHO细胞大规模高密度悬浮培养的无血清培养基。该培养基是以DMEM/F12(v/v，1∶1)为基础培养基，并添加了胰岛素、腐胺、转铁蛋白及微量元素等其它物质。本发明提供的无血清培养基具有以下优点：能够...; 刘兴茂陈昭烈刘红李世崇吴本传叶玲玲谢靖王启伟; 文献传递