贺艳艳
- 作品数：16 被引量：24H指数：2
- 供职机构：塔里木大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金兵团博士基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 新疆多浪羊白细胞介素8 cDNA的克隆测序及其变异SNP的分析被引量：1
- 2011年
- 采集多浪羊的血液,分离白细胞,提取总RNA,用白细胞介素8(IL-8)的引物进行两步法的RT-PCR扩增、克隆与酶切鉴定,测序后进行序列比对,与NM_001009401.1同源性高达99%,初步判定为多浪羊的IL-8编码全长cDNA。通过序列比对,发现多浪羊IL-8的基因起始密码子上游第七个碱基发生突变,在NM_001009401.1中是T,而在测序的多浪羊的IL-8中是C。对该测序序列进行数据库搜索和序列比对,发现该碱基变异很独特,并对该变异可能对mRNA蛋白翻译的影响进行了初步的分析。
- 杨威华左文斌潘辉贺艳艳刘书东徐丽君王娟娟李莲瑞
- 关键词：多浪羊白细胞介素8SNPMRNA二级结构
- 高致病性蓝耳病毒与低致病性蓝耳病毒RT-PCR检测方法被引量：7
- 2011年
- 将高致病性蓝耳病和低致病性蓝耳病病毒接种于Marc145细胞培养并观察细胞病变情况,将有细胞病变的病毒进行连续传代培养。根据高致病性蓝耳病与低致病性蓝耳病在NSP2基因上有87 bp连续缺失,从NCBI上下载7对高致病性蓝耳病保守序列设计一对引物。通过RT-PCR方法进行检测证明实验室所保存的这两株毒株分别为高致病性蓝耳病和低致病性蓝耳病,并且建立了高致病性蓝耳病与低致病性蓝耳病的检测方法。
- 顾海洋左文斌贺艳艳潘辉刘书东李莲瑞
- 关键词：蓝耳病NSP2基因RT-PCR
- 新疆卡拉库尔羊Fas基因原核表达载体的构建及表达被引量：2
- 2013年
- 根据GenBank的羊Fas细胞凋亡因子序列设计1对特异性引物,将EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点引入到引物两端,同时加上保护性碱基。利用RT-PCR技术,从新疆卡拉库尔羊外周血淋巴细胞总RNA中扩增出特异性基因片段。将分离纯化后的PCR产物与pMD-18T载体进行连接,利用双酶切反应与菌液PCR对阳性重组克隆进行鉴定筛选,然后进行序列测定。使用原核表达载体pET28a来完成Fas的定向克隆,成功构建重组融合表达质粒pET-28a-Fas,然后将质粒转化至E.coli BL21感受态,设置不同IPTG浓度和诱导温度,选择最佳的表达条件,然后初步纯化重组融合蛋白。结果表明,在pET28a表达载体中,Fas基因的插入方向和读码框均正确;同时Fas基因也完成在E.coli BL21融合表达的目的,融合蛋白分子质量为39.7ku。
- 贾山岭潘伊微潘辉贺艳艳李莲瑞
- 关键词：FAS基因原核表达
- 新疆卡拉库尔羊TNF-α原核表达及多克隆抗体的制备
- 2013年
- 【目的】克隆卡拉库尔羊TNF-α基因,在大肠杆菌中表达、纯化,并对TNF-α蛋白的抗原性进行分析。【方法】采用PCR技术扩增TNF-α基因核酸片段,并克隆入pET-28b表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)株中表达。用电洗脱法纯化目的蛋白,并用免疫印迹法分析纯化蛋白的抗原特异性。【结果】重组质粒在BL21(DE3)菌株中经IPTG诱导表达一个相对分子质量约为49 KD的融合重组蛋白,原核表达质粒pET-28b-TNF-α表达的目的融合蛋白是以可溶的形式存在。用纯化的pET-28b-TNF-α免疫家兔,在免疫后的第45 d,Western-blotting和琼脂糖扩散试验分析表明,表达的pET-28b-TNF-α能被家兔的阳性血清所识别。【结论】表达蛋白pET-28b-TNF-α具有较好的反应原性和免疫原性。
- 潘伊微贺艳艳潘辉贾山岭李莲瑞
- 关键词：表达纯化抗原性分析
- 新疆卡拉库尔羊Fas基因重组蛋白包涵体的纯化及抗原性分析
- 2012年
- 目的:为了探明Fas基因重组蛋白是否保留天然蛋白的抗原性,为下一步大量制备基础诊断、预防、控制、治疗试剂奠定基础。本实验将Fas基因与原核表达载体pET-28a成功构建了重组融合表达质粒pET-28a-Fas然后转化至E.coliBL21(DE3)感受态当中,找到最佳表达条件,初步纯化了重组融合蛋白,通过对家兔免疫后的血清进行琼扩实验与蛋白质印迹实验分析其抗原性。结果表明,纯化后的包涵体有明显的条带,经测定融合蛋白分子量为39.7 KDa。结论:说明纯化效果好,优化融合蛋白表达量占菌体总蛋白的15.6%,并且证明Fas具有免疫原性和反应原性。
- 潘伊微贾山岭潘辉贺艳艳李莲瑞
- 关键词：FAS基因包涵体抗原性分析
- 新疆卡拉库尔羊TNF-α基因的克隆及核苷酸序列分析
- 2011年
- 根据普通绵羊的碱基序列和相关文献设计引物,用RT-PCR扩增并测定了卡拉库尔羊肿瘤坏死因子-α基因的cDNA序列。结果表明,TNF-αcDNA序列包含了一个705 bp的开放阅读框,通过GenBank中的Blastn序列比较分析,卡拉库尔羊的TNF-α基因与普通绵羊的同源性高达99.86%。这为将来制备卡拉库尔羊TNF-α基因探针及卡拉库尔羊分子免疫学的发展提供了理论依据。
- 贺艳艳潘辉刘书东左文斌李莲瑞
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α核苷酸序列分析
- 棉酚对多浪羊淋巴细胞凋亡的影响被引量：2
- 2011年
- 通过棉酚对多浪羊淋巴细胞的研究,探索棉酚体积分数对淋巴细胞的影响.主要用细胞培养、瑞氏-吉姆萨染色、DNA电泳等方法观察棉酚对多浪羊淋巴细胞的凋亡效应.结果表明:当细胞培养液中棉酚体积分数为0.071mol/L,培养淋巴细胞8h后,可抑制多浪羊淋巴细胞的增殖,并且促进其凋亡.
- 刘书东左文斌贺艳艳潘辉徐丽君顾海洋杨威华李莲瑞
- 关键词：棉酚多浪羊淋巴细胞凋亡
- 棉酚对多浪羊淋巴细胞凋亡及其对核酸降解的研究被引量：2
- 2012年
- 主要通过使用RPMI 1640培养基培养淋巴细胞、瑞氏—吉姆萨染色、DNA和RNA电泳等方法来研究棉酚对多浪羊淋巴细胞的凋亡效应和对淋巴细胞核酸影响。研究结果表明,经瑞氏—吉姆萨染色4 h淋巴细胞出现凋亡小体;DNA和RNA通过琼脂糖凝胶电泳检测在4 h分别出现梯状条带和18S降解。可见,当细胞培养液中棉酚浓度为1.35μmol/L,培养淋巴细胞4 h后,可抑制多浪羊淋巴细胞的增殖,并且促进凋亡及其核酸的降解。
- 刘书东左文斌贺艳艳潘辉徐丽君顾海洋杨威华李莲瑞
- 关键词：棉酚多浪羊淋巴细胞核酸凋亡
- 羊外周血淋巴细胞的分离方法
- 本发明公开了一种羊淋巴细胞分离的方法，其特征在于包括如下步骤：a.准备有抗凝剂的注射器，从羊颈静脉中采取外周血；b.用等体积的Hank’s液稀释外周血，后混匀；c.将人淋巴细胞分离液以0.6-1.0mL/管的量分别置于容...
- 李莲瑞潘辉贺艳艳左文斌刘书东李剑
- 文献传递
- 新疆卡拉库尔羊Fas基因的克隆及核苷酸序列分析被引量：1
- 2011年
- 为了分析新疆卡拉库尔羊的Fas基因,根据普通绵羊的碱基序列和相关文献设计引物,用RT-PCR扩增并测定了卡拉库尔羊Fas基因的cDNA序列。结果表明,Fas基因cDNA序列包含了一个750 bp的开放阅读框,通过GenBank中的Blastn序列比较分析,卡拉库尔羊的Fas基因与普通绵羊的同源性高达99.69%。这为将来制备卡拉库尔羊Fas基因探针及卡拉库尔羊分子免疫学的发展提供了理论依据。
- 潘辉贺艳艳李莲瑞
- 关键词：FAS基因核苷酸序列分析
