贾晓会
- 作品数：27 被引量：53H指数：3
- 供职机构：上海海洋大学水产与生命学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划上海市科学技术委员会资助项目更多>>
- 相关领域：生物学环境科学与工程农业科学医药卫生更多>>
- 白斑综合征病毒(WSSV)基因VP28原核表达与检测被引量：1
- 2017年
- VP28是对虾白斑综合征病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)的囊膜蛋白。将VP28基因序列密码子优化后合成,经限制性内切酶NdeⅠ、XhoⅠ酶切后,按正确的阅读框顺序插入到p ET-28a(+)表达载体上。重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经质粒双酶切、测序鉴定后成功地构建了VP28基因原核表达载体p ET-28a-VP28。转化菌经IPTG诱导,SDS-PAGE显示含有与预期大小一致的约30 ku蛋白带,主要以包涵体形式表达。采用Ni-IDA-Sepharose CL-6B亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,获得了纯度为95%的大肠杆菌重组蛋白VP28。该纯化蛋白作为绝对定量Western的标准品,梯度稀释建立标准曲线,以定量检测转基因鱼腥藻7120中的VP28绝对表达量。实验结果表明,大肠杆菌BL21(DE3)表达的重组蛋白VP28与鱼腥藻7120中表达的VP28分子量基本相同,纯化后的大肠杆菌重组蛋白梯度稀释作为绝对定量Western标准曲线,计算出转基因鱼腥藻7120在培养第17天时,VP28的表达量最大,为5.14μg/m L,占转基因鱼腥藻7120总蛋白浓度的1.45%。这不仅对转基因鱼腥藻的高效培养具有重要意义,也为日后确定投喂对虾口服疫苗有效剂量防治白斑综合征奠定了基础。
- 张正阳张春莉施定基贾晓会贾睿何培民
- 关键词：对虾VP28鱼腥藻7120
- 巢湖蓝藻水华形成原因探索及“优势种光合假说”被引量：33
- 2011年
- 为探索蓝藻水华的形成原因,从2007年以来对巢湖西区浮游藻类种类、优势种季节变化、初级生产力、水质参数及优势种的光合生理生态学特性作了观测。关于蓝藻水华形成过程中迅猛发展的原因,近80a已提出了10种假说,但对解释巢湖形成的蓝藻水华,尚显不足。基于对蓝藻水华的了解,提出了如下"优势种光合假说":(1)蓝藻水华包含各种藻类,蓝藻水华发生不仅与藻细胞浓度有关,还与水体初级生产力直接有关。巢湖中这两者在夏季最大,在冬季最小。但无定量关系。(2)水华藻类中生长最快、细胞密度最大的是优势种,含有多个优势种时可能随季节更替。巢湖几乎整年发生蓝藻水华,已检测出4种优势种都是蓝藻,从早春起先是水华鱼腥藻,以后有绿色微囊藻、惠氏微囊藻和铜绿微囊藻。(3)各种环境因子都影响优势种生长,其中少数主导因子影响较大。在巢湖富营养条件下,光强、温度和pH值是主导因子。(4)主导因子对优势种光合活性的影响,可决定其能否处于优势。巢湖的温度和pH值变化可能促进了惠氏微囊藻取代绿色微囊藻,铜绿微囊藻取代惠氏微囊藻,而光强变化可能调节冬季时水华鱼腥藻取代了绿色微囊藻,春季时正好是相反的取代。
- 贾晓会施定基史绵红李仁辉宋立荣方昊虞功亮李轩杜桂森
- 关键词：蓝藻水华优势种巢湖
- 转基因蓝藻的纯化方法研究
- 朱嘉诚贺婵娟贾晓会顾娟张正阳施定基温丹凤庄旻敏孙溢华卢慧冯思豫张荣斌贾睿栾必华何培民
- 一种微藻培养架
- 本实用新型公开了一种微藻培养架，该培养架结构近似“円”，内部具有一横梁，横梁下安装有至少一个光照灯管，所述培养架包括至少一个摇床，摇床上安置有若干个三角瓶，所述培养架的侧柱上固定有光度计和温度计，所述定时器一端连接电源开...
- 张正阳徐文婷何培民贾睿施定基贾晓会杨亚云孙溢华
- 文献传递
- 水华鱼腥藻的光合生态生理学研究
- ＜正＞水华鱼腥藻（Anabaena flos-aquae）在国内外发生的蓝藻水华中经常有报道。这是一种具有异形胞的丝状体蓝藻,有固氮的功能。我们在2008和2009两年低温季节时观察到它都是优势种。温度升高后,这种藻的优...
- 贾晓会王丽丽施定基马为民史绵红吕中贤李仁辉杜桂森曹春晖
- 文献传递
- 莱茵衣藻“细菌型”pepc2基因叶绿体表达及其对油脂蛋白质含量的影响
- 2017年
- 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(Phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC,EC 4.1.1.31)在植物碳代谢中有重要作用,高等植物中PEPC可以调控蛋白质和脂肪酸含量,但是对绿藻PEPC的研究还较少。莱茵衣藻是绿藻中的模式生物,其基因工程中外源基因的转化以叶绿体转化效率最高,为了提高外源蛋白表达和获得高产油莱茵衣藻,利用叶绿体转化法能进一步提高表达效率。因此,本研究首先克隆了莱茵衣藻"细菌型"PEPCCSⅠ(conserved sequenceⅠ)的639 bp,构建了p ASap I-reve-Crpepc2和p ASap I-forw-Crpepc2正反向叶绿体表达载体,并用基因枪法转化莱茵衣藻cc-400获得了空质粒型,正向型和反向型转基因藻株。其次,应用RTq PCR方法检测Crpepc2的相对表达量,结果表明反向型Crpepc2的表达量减少了89.97%,而正向型增加了201.16%。最后,检测了总蛋白和脂质含量的变化,正向型突变株的总蛋白增加了37.03%;而反向型突变株的脂质含量增加了70.32%,且不饱和脂肪酸含量明显增加。以上结果证明莱茵衣藻"细菌型"PEPC的叶绿体表达不仅可以进一步提高蛋白质与脂肪酸含量,也可为今后外源蛋白的表达和高产油工程藻的应用做贡献。
- 冯思豫施定基贾晓会朱嘉诚米华玲贾睿何培民
- 关键词：莱茵衣藻蛋白质
- 一种阻断白斑综合症病毒感染对虾的口服剂及其制备方法和应用
- 本发明涉及生物技术和渔业养殖领域，公开了一种用转基因蓝藻制备的、可阻断白斑综合症病毒（WSSV）感染对虾的口服剂，可作为疫苗或免疫促进物用于在仔虾期防治对虾白斑综合症病毒。这种口服剂成分包括含有白斑综合症病毒VP28基因...
- 施定基贾晓会张春莉王偼何培民贾睿侯李君张楠彭国宏邓元告蔡春尔
- 文献传递
- 光质对工程聚球藻7002生长及psbA启动子的调控被引量：1
- 2016年
- 工程聚球藻的psbA基因及其所用载体的启动子Ppsb A均受光质调控,利用该机制可通过光质调控提高聚球藻的光合效率及其外源基因表达率。以转vp28基因聚球藻7002为实验材料,通过优化光强、温度及pH,解除光限制因素并提高光能利用率。通过改变白光、红光及蓝光的比例,调控光质组成及单色光的光强,检测细胞生长、外源基因的表达及psb A基因的转录。研究结果表明:高比例蓝光下,vp28基因的表达率达到2.4%,是纯白光下的3倍,重组蛋白VP28的积累量提高至2倍。高比例红光抑制了psb AII、psb AIII基因及外源基因的表达,但促使生物量在3 d内突破1.5 g/L。本研究为蓝藻的生物制药和工程蓝藻代谢产物的产业化提供了理论基础。
- 孙溢华张春莉施定基贾晓会贾睿何培民
- 关键词：光生物反应器聚球藻7002VP28PSBA
- 用反向载体法构建高油脂及高必需脂肪酸的丝状体工程蓝藻
- 用反向载体法构建高油脂及高必需脂肪酸的丝状体工程蓝藻。本发明构建的工程鱼腥藻，用基因操作调控蓝藻中pepc基因的表达包括目的基因的钓出和载体的构建，蓝藻的转化和转化子筛选，工程蓝藻的培养和检测，总脂及脂肪酸含量测定。结果...
- 贾晓会施定基候李君米华玲胡文利陈宇清王晓燕田琪琳黄希文何培民
- 蓝藻生物钟分子生物学的研究
- 生物钟是地球上各种生物在昼夜24小时周期中生命活动发生节律变化的现象,这主要与地球自转时受太阳的光照变化有关。这种现象在人体中研究得最全面、最深入,如人的睡眠、饮食的习惯、工作、学习的效率等都与生物钟有关。真核的动物、植...
- 施定基贾晓会王晓燕徐林冉凌飞王军成殷文博
- 文献传递
