赵南明
- 作品数：197 被引量：1,171H指数：17
- 供职机构：清华大学医学院生物医学工程系更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生农业科学理学更多>>
- 超声波介导法转化玉米愈伤组织及可育转基因植株的获得被引量：56
- 1997年
- 应用超声波介导法,首次成功地将Bt毒蛋白基因导入了重要的禾谷类作物玉米,并获得了可育的转基因植株及后代.Southern分子杂交结果证明,外源基因已整合进R_0植株和R_1代的染色体组中.超声波声强和处理时间是决定超声波介导法转化效率的2个最重要的参数,以 0.5W/cm^2的声强、30min处理的转化效果最佳,最高相对转化频率达到13.3%.适当参数的超声波处理能使细胞表面形成大量的小孔,又减少了外源DNA分子的断裂,从而使外源DNA分子进入细胞.
- 张宏王国英谢友菊许宁赵南明李太源田颖川乔利亚莽克强戴景瑞
- 关键词：玉米超声波转基因植株
- 反相高效液相色谱法制备HMC毒素纯品被引量：8
- 1999年
- 本文采用反相高效液相色谱纯化制备了从玉米小斑病病菌Ｃ小种（ＨｅｌｍｉｎｔｈｏｓｐｒｉｕｍｍａｙｄｉｓＲａｃｅＣ）分离出来的毒素ＴｏｘｉｎＩ，经ＮＭＲ的结构分析证实此制备物纯度较高，达到结构分析要求。用氯仿提取含有ＨＭＣ的毒素培养滤液，经过多次ＴＬＣ展层层析（ＣＨＣｌ_３：ＭｅＯＨ＝９：１），刮取具有侵染活性的部分（Ｒ_ｆ＝０．４）溶解在小体积甲醇中备用。色谱柱为Ｗａｔｅｒｓ（制备型２５０ｍｍ×１０ｍｍ）填料为ＹＷＧ－Ｃ１８反相柱，粒度１０ｕｍ，流动相选用甲醇：水５５：４５，流速为０．８ｍｌ／ｍｉｎ，检测波长２７２ｎｍ，进样量每次１００ｕｌ，当主要峰出现时，收集合并冻干保存（保留时间９.５ｍｉｎ）。
- 崔洋陈永丽魏建昆赵南明
- 关键词：高效液相色谱法
- 准弹性光散射研究脂质体表面电特性被引量：1
- 1992年
- 电泳率对于研究细胞的表面特性有着很重要的意义.传统的测量方法是显微细胞电泳,这里所用的准弹性光散射电泳(QELS)可以在很短的时间内对大量带电颗粒的运动进行监测,得出有统计意义的结果.我们用脂质体作为模型.制备了含有不同比例磷脂酰胆碱(PC)、硬脂酸氨(SA)和磷脂酰甘油(PG)的脂质体,测定了它们的电泳率,并计算了它们的表面电荷密度. 一、材料和方法 1.脂质体制备应用逆相蒸发法.最终脂浓度为3.3 mmol/L,脂质体制备介质为20 mmol/L PBS,pH为7.38.
- 沈子威王亚林赵南明
- 关键词：脂质体
- 豚鼠耳蜗离体外毛细胞的膜电位和离子电流被引量：1
- 1993年
- 利用膜片钳技术对分离的豚鼠耳蜗外毛细胞(OHC)进行了研究,结果表明:(1)新分离的正常OHC呈柱状,胞膜先滑,胞核位于底部,静纤毛由顶端表皮板伸出,4小时内形态无明显变化.(2)全细胞电压钳记录结合通道阻断剂实验表明,OHC膜电流主要由电压依赖性钾离子流组成.(3)利用全细胞记录方式得到的OHC静息电位值为-26±9mV((?)±SD,n=10).
- 宋本波刘鋋王淑春汤云贵谢佐平赵南明
- 关键词：耳蜗外毛细胞膜电位离子电流
- 免疫脂质体对白血病细胞杀伤的扫描电镜观察被引量：3
- 1995年
- 采用脂质体技术包裹中华眼镜蛇膜毒素（ＣＴ）并与抗人Ｔ细胞单克隆抗体结合制备成ｐＨ敏感型免疫脂质体．它在ｐＨ８．０～７．０间十分稳定，但在接近细胞浆微酸性环境（ｐＨ＜６．０）时很容易破裂而释出包裹之内容物．用这一免疫脂质体处理人白血病Ｔ淋巴细胞系ＣＥＭ细胞并用扫描电镜观察脂质体对靶细胞的作用，显示这一免疫脂质体可特异性杀灭靶细胞而对抗原阴性细胞影响不大．
- 褚嘉佑吴旻沈子威赵南明
- 关键词：白血病癌细胞免疫脂质体扫描电镜
- 仿生多层纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合支架对兔骨缺损的修复被引量：12
- 2007年
- 目的:观察仿生多层纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合支架及其结合自体骨髓后对兔腓骨缺损的修复作用。方法:实验于2005-09/2006-05在清华大学生物系生物膜与膜生物工程国家重点实验室完成。选择成年新西兰大白兔10只,按随机数字表法分为3组,阴性对照组2只,材料植入组4只,材料+骨髓植入组4只。以纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合支架为基础材料,制备仿生多层纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合支架。在兔腓骨造成5mm的缺损,分别旷置缝合(阴性对照组),植入仿生多层纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合支架(材料植入组),以及植入复合自体骨髓的仿生多层纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合支架(材料+骨髓植入组)。分别在术后8周和12周,X射线检测缺损部位的钙化情况。麻醉处死动物前10d和3d注射四环素(25mg/kg),不脱钙骨切片进行四环素荧光检测和VonKossa染色,检测实验动物骨缺损部位新生骨钙化情况。脱钙骨切片用苏木精-伊红染色,检测缺损部位的骨修复情况。结果:纳入兔10只,均进入结果分析。①术后8周时,X射线检测显示阴性对照组缺损部位无明显钙化,材料植入组和材料+骨髓植入组均有钙化。术后12周时,阴性对照组缺损部位大部分仍无明显钙化,材料植入组和材料+骨髓植入组钙化明显,材料+骨髓植入组钙化更完全。②不脱钙骨切片VonKossa染色结果表明,阴性对照组骨缺损处充满纤维组织,并有少量肌肉组织压迫侵入,无明显的钙化区。材料植入组兔的骨缺损的中心区域,出现染成黑色的钙化区,中间夹杂着中性红复染的组织细胞。材料+骨髓植入组兔的骨缺损部位的中心呈现多个“钙化岛”,成骨更加完全。③不脱钙骨切片四环素荧光检测结果表明,阴性对照组两个断端之间未见钙化荧光出现,材料植入组材料的中心有零星的小片钙化区域,材料+骨髓植入组缺损部位的中心有许多的“
- 孔丽君敖强王爱军龚锴王曦公衍道赵南明张秀芳
- 关键词：生物医学工程骨再生骨髓仿生
- 硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物的制备被引量：4
- 2001年
- 为利用硒原子的反常散射获取抗烟毒素蛋白晶体Ｘ射线衍射的相位信息，以质粒 ＰＱＥ－３０为表达载体，Ｅ．ｃｏｌｉ Ｍ１５为宿主菌，在含有硒代甲硫氨酸的Ｍ９培养基中用ＩＰＴＧ诱导表达硒代甲硫氨酸抗烟毒素蛋白衍生物．通过 Ｎｉ－ＮＴＡ金属亲合层析和 Ｍｏｎｏ Ｑ阴离子交换层析纯化目标蛋白．产物经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检验纯度达９５％以上，经 ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ和 ＥＳＩ－Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ质谱检测证实抗烟毒素蛋白硒代甲硫氨酸标记成功．采用与抗烟毒素蛋白晶体生长类似的条件，获得了衍生物可供衍射的晶体．
- 何红珍邵煜陈宇航刘斌斌曹振波江凡刘一苇唐洪刘进元赵南明饶子和
- 关键词：纯化质谱
- 4′6二脒基-2-苯基吲哚与DNA结合特性研究被引量：1
- 1991年
- 本文以小牛胸腺DNA和λDNA为材料,首次用激光拉曼光谱研究了4’6二脒基—2—苯基吲哚(DAPI)与DNA的结合机制.认为DAPI是以非镶嵌的方式在DNA小沟中同DNA的AT碱基对此氢键结合.在低PH下,这种结合受到抑制,盐浓度的高低与DAPI-DNA复合体的荧光强度成负相关.
- 沈子威唐军赵南明沈孝宙
- 关键词：DAPI脱氧核糖核酸
- 全文增补中
- UV激光微束作用于细胞膜的机理研究被引量：1
- 1992年
- 本文分别选用DOPC脂质体、非洲爪蟾和洋葱表皮等为材料,初步研究激光微束作用于细胞膜的作用机理,样品经由Nd/YAG激光器产生的355nm的UV激光微束作用,在膜上产生可恢复性小孔,选脂质体上的这种孔作Raman微区扫描,部位分别选在孔中心、孔边缘和孔外区域,得到三种谱图.根据膜的特性,在分子水平上对此作用机理建立了一个分子模型,很好地解释了实验结果和观察到的一些现象.
- 沈子威包红霞赵南明
- 关键词：细胞膜激光微束
- MC 3T3-E1细胞在纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合支架上的增殖和分化被引量：15
- 2007年
- 用原位合成纳米羟基磷灰石的方法制备多孔纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合支架;在支架上接种MC3T3-E1细胞,瑞氏染色检测细胞形态,MTT法检测其增殖情况;在诱导培养基中培养30d后,碱性磷酸酶染色比较其分化水平;定量检测细胞的碱性磷酸酶活性;RT-PCR检测成骨相关基因的表达情况。实验结果表明:MC3T3-E1细胞在纳米级羟基磷灰石/壳聚糖复合支架上粘附铺展良好,其增殖率显著高于培养于纯壳聚糖支架上的细胞。碱性磷酸酶染色表明复合支架上的细胞有较高水平的碱性磷酸酶表达。进一步定量检测细胞的碱性磷酸酶活性,结果说明在复合支架上细胞比纯壳聚糖支架上培养的细胞碱性磷酸酶活性提高了约8倍。此外,骨分化相关特征基因骨桥蛋白OPN在复合支架上培养的细胞中的表达水平也明显高于纯壳聚糖上培养的细胞。分化成熟标志基因骨钙素OC在复合支架上培养的细胞中有表达,但是纯壳聚糖支架上培养的细胞中却未检测到。支架中纳米羟基磷灰石的加入不仅提高了前成骨细胞在复合支架上的增殖,而且还促进了它的分化。纳米羟基磷灰石/壳聚糖复合支架表现出良好的生物相容性和生物活性,是极具前景的骨组织工程支架材料。
- 孔丽君敖强奚静张玲公衍道赵南明张秀芳
- 关键词：分化纳米羟基磷灰石壳聚糖生物相容性
