闫红霞
- 作品数：15 被引量：15H指数：2
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- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部“211”工程国际科技合作与交流专项项目更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生哲学宗教文化科学更多>>
- 杜氏盐藻硝酸盐还原酶缺陷型突变株的功能互补分析
- 杜氏盐藻是一种单细胞真核绿藻，无细胞壁，可在氯化钠浓度为0.05 mol/L-5mol/L的盐水中生存，是迄今为止所发现的最耐盐的生物之一。近年来，除了围绕盐藻的耐盐机制和光合作用机制进行了大量研究之外，转基因盐藻的研究...
- 闫红霞
- 关键词：杜氏盐藻硝酸盐还原酶
- 文献传递
- 杜氏盐藻DCA1启动子内GT重复序列在盐诱导调控中的作用被引量：2
- 2009年
- 为了研究杜氏盐藻双拷贝碳酸酐酶(DCA1)启动子中高度重复的GT序列在盐诱导表达时的调控作用,设计不同的引物,通过PCR法获得6条不同长度的DCA1启动子片段,分别与gus报告基因融合后构建6个表达载体;电击法转化杜氏盐藻细胞。组织化学染色和荧光定量法检测GUS在不同盐浓度下的瞬时表达。结果显示,DCA1启动子内高度重复的GT序列无论与其上游、下游或上下游片段同时结合均能驱动gus基因的表达,并且其表达受氯化钠浓度调控,其中和上下游均结合时活性最强;无GT重复序列的融合片段及GT重复的下游片段也能驱动gus基因的表达,但其表达不受氯化钠浓度调控;而GT重复的上游片段不能驱动gus基因的表达。结果提示:盐藻DCA1启动子中高度重复的GT序列在盐诱导调控中起重要作用,可能为一种新型的盐诱导元件。
- 罗清菊李杰闫红霞卢雪景吕玉民薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻碳酸酐酶GUS基因
- 杜氏盐藻硝酸盐还原酶基因5′上游序列的克隆与功能分析被引量：3
- 2006年
- 目的:克隆杜氏盐藻硝酸盐还原酶(NR)基因5′上游序列,并对其功能进行分析。方法:利用BamHI、EcoRI、HindIII、PstI、SalI、Xbal6种限制性内切酶分别酶切盐藻基因组DNA,并与接头连接,构建成盐藻基因组步行文库。采用LA-PCR方法,从上述盐藻步行基因组文库中扩增NR基因5′上游序列,测序并进行分析。为检测其表达特性,构建了该片段与GUS嵌合基因的表达载体pNR-GUS,通过电击法将所构建的重组表达载体转化盐藻,组织化学染色法观察GUS的表达。结果:从盐藻基因组步行文库中扩增出约1200bp特异片段,序列分析表明5′上游序列含有启动子的特征性序列。GUS瞬时表达染色结果显示,该DNA片段具有硝酸盐诱导和铵抑制的启动子活性。结论:所克隆的盐藻的5′上游序列可能是一种具有“开关”活性的可控性启动子。
- 李杰贾岩龙闫红霞潘卫东薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻
- 髓鞘少突胶质细胞糖蛋白MOG抗原肽的制备及免疫原性观察
- 2011年
- 目的制备髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）抗原肽,并观察其免疫原性。方法采用改进的Fmoc固相合成法制备MOG35~55抗原肽;以合成的MOG35~55抗原肽加完全弗氏佐剂（CFA）免疫C57BL/6小鼠,观察小鼠发病情况,并对小鼠脊髓和脑组织进行病理学检查。结果成功制备了MOG35~55抗原肽,精肽产率13.58%,纯度95%;MOG35~55抗原肽免疫后15 d起,小鼠开始陆续出现自身免疫性脑脊髓炎（EAE）临床症状,至第21天8只小鼠均发病,光镜下观察EAE小鼠脊髓和脑组织可见典型的炎性细胞浸润。结论采用改进的Fmoc固相合成法可制备具有良好免疫原性的MOG35~55抗原肽,用以制备C57BL/6小鼠EAE模型,发病率高,模型稳定。
- 李黎周晴晴王艳静闫红霞石雨刘喜龙康巧珍
- 关键词：髓鞘少突胶质细胞糖蛋白自身免疫性脑脊髓炎
- 蛋白4.1R基因敲除小鼠的引种及繁殖被引量：1
- 2011年
- 目的:引种、繁殖4.1R基因敲除小鼠,用于蛋白4.1R功能的研究。方法:按照国家进出境动物检验检疫的具体要求,对引种自美国的3对4.1R基因敲除小鼠进行隔离、检疫。引进的种鼠按照SPF动物饲养标准操作规程在IVC屏障系统中进行1雄1雌长期同居方式繁殖,C57BL/6J对照组小鼠采用同样方式饲养繁殖。定期观察记录种鼠的繁殖率、仔鼠出生率及成活率。比较基因敲除小鼠与野生型小鼠体质量变化。提取仔鼠尾组织基因组DNA,用PCR法进行基因型鉴定。结果:经隔离检疫,3对4.1R敲除小鼠符合我国SPF小鼠的微生物控制级别。23只繁殖仔鼠基因型PCR鉴定结果为基因敲除纯合子,雌鼠产仔率100%,平均胎产仔5.8只,仔鼠成活率74%。基因敲除小鼠平均体质量与野生型小鼠比较差异无统计学意义(F组间=4.035,P=0.056;F时间=543.723,P<0.001;F交互=4.358,P=0.004)。结论:在国内成功引种和繁殖C57BL/6J-4.1R-/-小鼠。
- 周晴晴闫红霞孙蕾刘喜龙李黎汲翔高艳锋汲振余祁元明康巧珍
- 关键词：基因敲除小鼠
- SOEing法构建EGFP真核表达载体及其在杜氏盐藻中的表达被引量：1
- 2007年
- 通过重叠区扩增基因拼接法(Gene splicing by overlap extension,SOEing)构建含有杜氏盐藻(Dunaliella salina)硝酸盐还原酶(NR)基因5′-上游序列(Pnr)and 3′-端序列(Tnr)的EGFP真核表达载体,并将其转化杜氏盐藻。利用改进的SOEing法,将杜氏盐藻NR基因Pnr与报告基因EGFP cDNA融合,并与pEGM-7zf克隆载体连接,顺序将盐藻NR基因Tnr序列与融合片段相连,构建含Pnr-EGFP-Tnr表达盒的盐藻真核表达载体p7NET。电击法转化杜氏盐藻,在盐藻转化株中观察到了EGFP的瞬时表达。此研究为转基因杜氏盐藻研究和成功建立杜氏盐藻生物反应器奠定了实验基础。
- 李杰闫红霞曲东京刘红涛鲁照明薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻真核表达载体
- 杜氏盐藻硝酸盐还原酶缺陷型突变株的功能
- 本文对杜氏盐藻硝酸盐还原酶缺陷型突变株的功能进行了研究。结果表明：真核表达载体p7NBT的构建利用改进的SOEing法扩增出了特异的约1700bp的融合片段;提取转化盐藻总RNA,RT-PCR扩增得到约550bp的目的片...
- 闫红霞
- 关键词：杜氏盐藻
- 文献传递
- 硕士研究生心理辅导的重要性被引量：1
- 2011年
- 硕士研究生教育是高等教育的较高层次,硕士研究生的素质关系到国家的前途和命运。硕士研究生的心理变化严重影响着教育质量,也影响着他们的就业能力,因此很有必要对硕士研究生实施心理辅导。加强硕士研究生心理健康教育已成为新时期硕士研究生教育中不容忽视的重要课题。
- 赵林萍闫红霞
- 关键词：硕士研究生心理辅导
- 杜氏盐藻硝酸盐还原酶基因5′上游序列驱动bar基因的表达
- 2008年
- 目的:探讨杜氏盐藻硝酸盐还原酶(NR)基因5′上游序列(Pnr)是否可以驱动外源基因在杜氏盐藻中的表达。方法:利用改进的重叠区扩增基因拼接法(SOEing),将杜氏盐藻NR基因5′上游序列(Pnr)与除草剂抗性基因bar融合。同时将NR基因3′端序列(Tnr)与克隆载体pEGM-7zf连接,构成中间载体pEGM-7zf-Tnr。最后将融合片段Pnr-Tnr与中间载体连接,构建含Pnr-bar-Tnr表达盒的盐藻真核表达载体p7NBT。电击法转化杜氏盐藻,通过草丁膦培养筛选转化藻株后对其进行分析。结果:转化藻株总RNA的RT-PCR结果扩增出与bar基因序列完全一致的目的片段。结论:杜氏盐藻NR基因Pnr能够驱动外源基因bar的转录。
- 闫红霞李杰王莉莉冯英才曲东京薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻硝酸还原酶BAR基因
- 杜氏盐藻电击转化方法的系统优化被引量：2
- 2009年
- 本研究系统分析了盐藻生长状态、电击条件、电击缓冲液成分和质粒浓度等条件对电击转化效率的影响。实验结果表明:正常接种后培养7d对数生长中期的盐藻细胞,在25μF、0.8kV的电击条件下加入终浓度为10μg/mL的质粒可使盐藻电击转化效率达到1.85‰;电击缓冲液中加入0.4mol/L的甘油可使转化效率显著提高至2.03‰(P<0.05)。在上述优化电击体系下,运用3种不同质粒分别转化盐藻细胞后获得的转化效率无显著差异。通过对电击转化中相关因素的优化,本研究建立了一种适用于杜氏盐藻的高效稳定的电击转化体系,为杜氏盐藻的转基因研究提供有效方法。
- 吕朋举闫红霞李杰刘红涛卢雪景薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻电击转基因研究
