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大肠杆菌在lacZ基因表达和调控方面与气单胞菌、假单胞菌的异同及膜荧光法检测时“假阳性”的克服: 1999年; 目的：探讨气单胞菌、假单胞菌在ｌａｃＺ基因表达调控方面与大肠菌群的差异，提高“大肠菌群产荧光底物试验”的准确性。方法：以ＭＵＧＡＬ作为β－半乳糖苷酶（β－ＧＡＤ）的产荧光反应底物。配制底物、诱导物、葡糖不同组合的３种培养液，对各试验菌在培养液中荧光强度Ｆ值变化进行测定，比较其ｌａｃＺ基因表达的“诱导效应”与“葡糖效应”的不同表现特点。用微孔膜捕集孤立的试验菌以含上述培养液的衬垫支持，观测比较“单个”试验菌细胞在滤膜表面形成荧光斑点的情况。结果：①大肠杆菌在乳糖诱导下能高效产生β－ＧＡＤ，Ｆ／Ｆ０＝２２．７６，而葡糖的存在可完全抑制ｌａｃＺ基因表达，Ｆ／Ｆ０＝０．９６；滤膜上单个Ｅ．ｃｏｌｉ菌可在１２～１５ｈ内形成强烈并带有扩散性“晕轮”的蓝色荧光斑点。②嗜水气单胞菌“诱导效应”与“葡糖效应”均不明显，仅产生少量β－ＧＡＤ。在滤膜上需经３０ｈ才能产生微弱的不带“晕轮”的荧光斑点。③铜绿假单胞菌能产生与β－ＧＡＤ无关的荧光色素，其光谱特性与ＭＵＧＡＬ水解的４－ＭＵ完全不同，在滤膜上表现为黄绿色无晕轮的荧光斑。结论：采用滤膜荧光法检测大肠菌群，可利用产生荧光斑点的时间差、色泽及有无晕轮的特性克服气单胞菌、假单胞菌?; 林大榕张辉陆伟方新军郁潜吕军; 关键词：GAD 气单胞菌 LACZ基因假阳性荧光法假单胞菌

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陆伟

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