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水稻齿叶矮缩病毒非结构蛋白Pns7在水稻原生质体内的表达动态被引量：4: 2017年; 水稻齿叶矮缩病毒(Rice ragged stunt virus,RRSV)属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)水稻病毒属(Oryzavirus)。该病毒编码的非结构蛋白Pns7在昆虫细胞中可形成伸出细胞膜的纤维丝状结构。本研究利用水稻原生质体培养体系,对Pns7蛋白在水稻原生质体内的复制与表达情况进行了分析。本研究首先构建了Pns7蛋白的原核表达载体,通过IPTG诱导获得大量Pns7蛋白,免疫兔子获得抗血清。Western blot证明抗血清具有特异性,间接ELISA测得其效价为1∶2 500。利用实时荧光定量PCR技术,对病毒侵染水稻原生质体后的Pns7 RNA含量进行检测,结果表明:Pns7 RNA在8 h时开始积累,24h左右达到最大值,32 h后表达量维持在一个平台期;同时,以制备的抗血清为探针,通过Western blot检测到Pns7蛋白在病毒侵染原生质体后16 h开始表达,32 h左右达到最大值,60 h后开始下降,但仍保持在较高水平。; 张洁陈晓敏宛柏杰吴锦鸿林文武吴祖建; 关键词：水稻齿叶矮缩病毒水稻原生质体 RNA

福州地区豨莶黄脉病病原的分子鉴定: 2015年; 为明确引起福建省福州地区豨莶上黄脉症状的病原,利用PCR技术,从3个样品上均扩增到双生病毒约500 bp的特异片段,选择病毒分离物Fz02进行全序列测定.结果表明:Fz02 DNA-A全长2771 nts,具有典型的双生病毒的基因组结构特征,与豨莶黄脉病毒广州分离物(Sb YVV-Gz01)同源性最高,达93.4%.利用设计的卫星分子的特异性引物,在病毒分离物Fz02中扩增到betasatellite分子(Fz02β).Fz02β全长1359 nts,与Sb YVV广东分离物(GD13)伴随的betasatellite同源性最高,为85.3%.系统关系树表明,Fz02与Sb YVV各分离物聚类为一个大分支.此外,Sb YVV序列变异较大.; 张洁林文武朱重庆吴锦鸿陈晓敏章松柏吴祖建; 关键词：双生病毒豨莶

福建省花生青枯病菌致病型及生物型的测定被引量：27: 2000年; 从采自福建 10个县 (市 )花生青枯病株标样中 ,分离出花生青枯病原菌菌株 72个 .对其中有代表性的15个菌株进行致病型测定 ,2 9个菌株进行生理生化测定 .供试菌株在鉴别寄主上的致病反应表明 ,福建省的花生青枯病菌属于致病型和 ,其中以致病型为主 .对乳糖、麦芽糖、纤维二糖、甘露醇、山梨醇和甜醇的利用能力以及对硝酸盐的还原作用表明 ,除晋江菌株的硝酸盐还原作用不产生气泡 ,定为生物型 - 4 ,同安菌株由于不利用三糖而利用三醇定为生物型外。; 陈晓敏胡方平吴燕榕; 关键词：花生青枯病生物型致病型

水稻齿叶矮缩病毒Pns10蛋白在水稻原生质体内的表达被引量：1: 2017年; 【目的】水稻齿叶矮缩病毒(Rice ragged stunt virus,RRSV)Pns10蛋白在介体昆虫细胞内可形成类似病毒原质(viroplasm)的内含体,是RRSV侵染介体所必需。然而Pns10蛋白在水稻寄主中是否具有类似功能及其表达情况如何未见报道。【方法】利用大肠杆菌系统表达Pns10蛋白,免疫家兔制备多克隆抗体;通过水稻原生质体病毒侵染体系,利用免疫荧光技术分析Pns10蛋白在水稻原生质体内的分布情况,利用实时定量PCR技术和Western blot技术分别检测Pns10 RNA和Pns10蛋白在水稻原生质体内的积累情况。【结果】将Pns10基因克隆到Gateway系统原核表达载体p DEST17中,IPTG诱导表达成功后,制备融合蛋白抗血清。Western blot检测显示,该抗血清可检测感病水稻叶片中的Pns10蛋白。病毒侵染水稻原生质体后,Pns10蛋白可形成类似病毒原质的内含体;Pns10 RNA在病毒接种8 h后开始积累,24 h后达到最大值,随后开始下降;Pns10蛋白在24 h后开始表达,之后维持较高水平,60 h后略有下降。【结论】成功获得了Pns10抗血清;Pns10在水稻原生质体内成功表达,可形成类似病毒原质的内含体,并且Pns10 RNA的表达先于其蛋白的表达。; 张洁陈晓敏吴锦鸿朱重庆丁新伦吴祖建; 关键词：水稻齿叶矮缩病毒水稻原生质体

水稻齿叶矮缩病毒P8蛋白的抗体制备及其在水稻原生质体内的表达动态被引量：2: 2016年; 水稻齿叶矮缩病毒(rice ragged stunt virus,RRSV)属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)水稻病毒属(Oryzavirus)成员。该病毒引起的水稻齿叶矮缩病在我国南方发病严重,成为我国水稻生产上的重要病害。通过建立水稻原生质体培养体系,对RRSV主要外壳蛋白P8在水稻原生质体内的复制与表达情况进行研究。通过原核表达对P8蛋白进行抗体制备,抗血清经Western印迹检测具有特异性,间接ELISA测得其效价为2 500倍左右。以制备的抗血清为探针,通过Western印迹检测到P8蛋白在病毒侵染原生质体后24h开始表达,48h左右达到最大值,60h后开始下降,但仍保持在较高水平;同时,利用荧光定量PCR技术,对病毒侵染水稻原生质体后的P8RNA含量进行检测,结果表明,P8RNA在8h时开始积累,32h左右达到最大值,48h后表达量开始下降到一个平台期。; 陈晓敏宛柏杰吴锦鸿林文武吴祖建张洁; 关键词：植物保护水稻齿叶矮缩病毒水稻原生质体抗体制备荧光定量PCR WESTERN印迹

一种物联网环境下的智能输液医疗装置: 本实用新型提供一种物联网环境下的智能输液医疗装置，其包括终端系统及协调器系统；所述终端系统包括终端主控芯片及与其连接终端通信模块、电源模块、液体进度检测器、智能机械控流开关；所述协调器系统包括协调器主控芯片及与其相连接的...; 韩冲吴佳健罗志聪阮凯斌李婷娟王明华郑丽星陈晓敏范诗雅; 文献传递

福建花生青枯病菌菌系分化、种质资源抗性鉴定及品种抗性筛选技术: 该研究对福建的77个花生品种和种质资源进行了抗性鉴定.采用叶腋针刺接种与浸种接种的方法,接种攻液浓度均匀为6×10<'8>cfu/ml.结果显示:这些品种中没有高抗品种,除泉花10号、泉花646、粤油92、39-2-67...; 陈晓敏; 关键词：生物型致病型抗性鉴定; 文献传递

水稻矮缩病毒非结构蛋白Pns6和外壳蛋白P8多克隆抗体的制备及其应用被引量：1: 2016年; 利用RT-PCR的方法从感染水稻矮缩病毒(Rice dwarf virus,RDV)的水稻中克隆该病毒的运动蛋白基因S6和外壳蛋白基因S8,通过Gateway系统进行原核表达,获得表达载体p DEST17-Pns6和p DEST17-P8,将表达载体转化E.coli Rosetta,经IPTG诱导表达后获得分子质量约为59和46 ku含HIS标签的融合蛋白.以诱导表达的目的蛋白为抗原,免疫注射新西兰大白兔制备多克隆抗体.结果表明,Western blot检测制备的Pns6和P8抗体可特异性检测RDV,间接ELISA测定Pns6和P8抗体的效价均约为6 400倍,并建立了可靠、灵敏、特异的Dot-blot ELISA方法检测RDV.以上研究表明,RDV运动蛋白和外壳蛋白抗体均可应用于该病毒在田间的大规模调查和检测.; 宛柏杰林文武吴锦鸿陈晓敏吴祖建张洁; 关键词：水稻矮缩病毒多克隆抗体 DOT-BLOT ELISA

RRSV在水稻原生质体内的复制与表达: 水稻齿叶矮缩病毒（ Rice ragged stunt virus,RRSV）属于呼肠孤病毒科（Reoviridae）水稻病毒属（Oryzavirus）的成员。RRSV基因组包含10条 dsRNA，编码11种蛋白质，其中...; 陈晓敏; 关键词：水稻齿叶矮缩病毒原生质抗体制备基因复制

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陈晓敏