陈海英
- 作品数：4 被引量：0H指数：0
- 供职机构：广西医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- HP450基因的克隆及质粒载体的构建和鉴定
- 2006年
- 目的HP450基因的克隆载体构建。方法用RT-PCR技术克隆HP450基因,T-A连接到PMD18-T载体,经菌液PCR,酶切鉴定.构建成PMD18-HP450重组质粒载体。结果测序显示完全正确,实现了HP450基因的克隆和质粒载体的构建。结论可以对重组成功的HP450基因进行体外表达和动物的体内应用.
- 陈海英
- 关键词：克隆质粒载体
- 大鼠抗组胺药敏感性细胞色素P450基因的克隆及其反转录病毒载体的构建和鉴定
- 2007年
- 目的:构建反转录病毒表达载体pLXSN-HP450。方法:实验于2004-12/2006-05在广西医科大学生化药理实验室完成。提取正常的Wistar大鼠肝组织的总RNA,反转录-聚合酶链反应技术扩增出抗组胺药敏感性细胞色素P450(HP450)基因。并克隆到pMD18-T载体,经蓝白斑筛选后进行聚合酶链反应,酶切,测序鉴定。BamHI,EcoRI双酶切构建好的重组质粒和反转录病毒载体pLXSN在16℃下经T4连接酶连接过夜,并转化到感受态细胞DH5α,以菌液为模板做聚合酶链反应,结合酶切筛选及鉴定阳性重组反转录病毒载体pLXSN-HP450。结果:反转录-聚合酶链反应扩增出HP450基因。重组质粒pMD18-HP450经双酶切后得到1461bp的酶切产物。测序的结果用ClustalW在线与Genebank对比,此目的基因与基因库中的H1基因100%同源。阳性重组载体pLXSN用其菌液聚合酶链反应扩增出目的条带。对重组体pLXSN-HP450进行双酶切得到1461bp和5900bp两条特异性条带。结论:克隆了HP450基因,并成功构建了重组反转录病毒载体pLXSN-HP450,为进一步研究肝癌的基因治疗奠定了基础。
- 陈海英王乃平韦锦斌杨天燕
- 关键词：质粒载体反转录病毒载体
- HP450基因的克隆及其重组载体pMD18-HP450的构建与鉴定
- 2007年
- 目的构建HP450基因的克隆载体。方法用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术克隆HP450基因,T-A连接到pMD18-T载体。以菌液为模板做PCR、酶切和测序鉴定pMD18-HP450重组质粒载体。结果菌液PCR扩增出目的条带、重组体的酶切产物合理,测序显示目的基因与基因库中的H1基因100%同源。结论实现了HP450基因的克隆及其重组质粒载体pMD18-HP450的构建。
- 陈海英王乃平韦锦斌
- 关键词：克隆质粒载体肝肿瘤基因疗法
- HP450基因的克隆及其重组逆转录病毒载体pLXSN-HP450的构建和鉴定
- [目的]运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从正常大鼠肝组织扩增出HP450基因，并构建pMD18-HP450重组克隆载体和pLXSN-HP450表达载体，为下一步对HP450基因进行肝癌基因治疗的体内外实验打下基础...
- 陈海英
- 关键词：细胞色素P450基因逆转录病毒载体
- 文献传递
