韩小艳 作品数:27 被引量:54 H指数:5 供职机构: 河北北方学院医学检验学院 更多>> 发文基金: 河北省自然科学基金 河北省科技支撑计划项目 张家口市科学技术研究与发展计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 农业科学 生物学 文化科学 更多>>
临床微生物学与检验实验教学的探索与实践 2014年 河北北方学院微生物教研室一直致力于临床微生物学与检验的实验教学改革,在实验教学改革方面迈出了较大的步伐,采取了建立完善实验教学管理体制、优化实验教学内容、改进教学手段等措施。为进一步实验教学改革,提供一定的参考价值。 韩小艳 张玉妥 王晨红 杨新玲 李小俊关键词:临床微生物学与检验 实验教学 冠心病患者MBL基因启动子区-221位点多态性研究 被引量:1 2009年 目的:研究冠心病患者MBL基因启动子区-221(Y/X)位点单核苷酸多态性,探讨冠心病的可能致病机制。方法:提取57例健康对照者和72例冠心病患者外周血基因DNA,采用PCR-RFLP法检测MBL基因启动子区-221位点的多态性,行非变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳对该位点多态性进行分析。结果:72例冠心病患者MBL基因启动子区-221位点X/Y、Y/Y和X/X基因型分别占69.44%、15.28%和15.28%;57例健康对照者在-221位点X/Y、Y/Y和X/X基因型分别占77.19%、1.75%和21.05%。经统计学分析,冠心病组、健康对照组在-221位点X/X和X/Y基因型频率比较差别无统计学意义;Y/Y基因型频率比较差别有显著性统计学意义(P<0.05)。结论:MBL基因启动子区-221位点的多态性可能参与了冠心病的发生、发展过程。 周艳 程健君 刘迎春 唐玉红 贾天军 韩小艳 李小俊关键词:冠状动脉疾病 甘露聚糖结合凝集素 MIP-1α基因佐剂对NTHi P6 DNA疫苗免疫效果的影响 2015年 目的观察小鼠巨噬细胞炎性蛋白1α(macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)基因佐剂对不可分型流感嗜血杆菌(nontypeable Haemophilus influenzae,NTHi)外膜蛋白P6(outer membrane protein P6,P6)DNA疫苗免疫效果的影响。方法将92只BALB/c小鼠随机分为4组,分别用pcDNA3.1、pcDNA3.1/MIP-1α、pcDNA3.1/P6和pcDNA3.1/MIP-1α+pcDNA3.1/P6,肌肉注射免疫,每2周免疫1次,共3次,质粒每次每只接种100μg。末次免疫后14d,每组取10只小鼠,采血,分离血清,采用ELISA法检测特异性IgG抗体;每组取3只小鼠,制备脾淋巴细胞,采用CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖活性,采用ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞分泌IL-4和IFN-γ水平。用8LD50NTHi攻击每组剩余10只小鼠,观察免疫保护作用。结果末次免疫后,pcDNA3.1/MIP-1α+pcDNA3.1/P6组小鼠脾淋巴细胞分泌IFN-γ水平为(1726.45±184.48)ng/L,增殖指数2.06±0.04,与pcDNA3.1/P6组(1443.09±187.70)ng/L和1.90±0.04比较差异均有统计学意义(P<0.05);抗体滴度和IL-4水平两组间差异无统计学意义(P>0.05)。经NTHi攻击后,pcDNA3.1/MIP-1α+pcDNA3.1/P6免疫组小鼠14d生存率达70%,与pcDNA3.1组0%和pcDNA3.1/MIP-1α组0%相比与差异有统计学意义(P<0.05),与pcDNA3.1/P6组60%相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论MIP-1α基因佐剂在一定程度上能增强NTHi P6基因疫苗的免疫保护作用。 韩小艳 王晨红 张玉妥关键词:不可分型流感嗜血杆菌 核酸疫苗 巨噬细胞炎性蛋白1Α 枯草芽孢杆菌A干粉菌剂的制备及其对桃果实病害的防治 被引量:1 2010年 研究枯草芽孢杆菌A干粉菌剂的制备效果,并将其用于桃果实灰霉病的防治和保鲜,研究其生防效果.鲜桃果实提前刺伤接种干粉菌剂菌悬液,再接种灰霉病菌统计防效;鲜桃果实表面喷洒菌悬液,统计保鲜效果.制备的干粉菌剂活芽孢含量高,可较长时间保存.桃果实刺伤接种4 d后对桃灰霉病防效可达90%以上,表面喷洒储藏8 d后自然防病效果为55.94%.因此,发酵液适宜制备成干粉菌剂,并可长期保存,应用方便,对桃果实病害的防治有一定的效果. 李小俊 韩小艳 边艳青关键词:枯草芽孢杆菌 生防菌 生物农药 IL-2联合不可分型流感嗜血杆菌P6重组蛋白对小鼠免疫功能的影响 被引量:5 2014年 目的观察IL-2联合不可分型流感嗜血杆菌重组P6蛋白免疫小鼠的免疫效果,探讨IL-2的佐剂效应。方法将50只Balb/c小鼠随机分为5组:P6重组蛋白组、P6重组蛋白+IL-2组、IL-2组、P6重组蛋白+弗氏佐剂组及PBS对照组,分别于第0、14、28天经腹腔进行3次免疫,末次免疫后14 d,取小鼠血、脾标本,ELISA法检测血清中抗体IgG水平,并分析其脾淋巴细胞IL-4、IL-10、IL-2和IFN-γ的产生水平。CCK-8法检测各组脾淋巴细胞增殖活性。结果 P6重组蛋白联合IL-2组通过腹腔免疫刺激小鼠产生的血清IgG水平,高于PBS对照组、P6重组蛋白组及IL-2组(P<0.05)。P6重组蛋白联合IL-2组小鼠特异性脾淋巴细胞刺激指数及其所产生的IFN-γ、IL-2水平均高于PBS对照组、P6重组蛋白组及IL-2组(P<0.05),而IL-4、IL-10水平各组无差异。各项检测中P6重组蛋白联合IL-2组与P6重组蛋白联合弗氏佐剂组无显著性差异(P>0.05)。结论 IL-2联合P6重组蛋白诱导小鼠的免疫应答优于P6重组蛋白单独免疫,IL-2可以作为不可分型流感嗜血杆菌P6重组蛋白的佐剂。 乔海霞 张彦霞 张存辉 戴明艳 常月立 张玉妥 贾晓辉 韩小艳关键词:不可分型流感嗜血杆菌 白细胞介素-2 佐剂 巨噬细胞源性趋化因子对NTHiP6蛋白疫苗免疫效果的影响 2015年 观察巨噬细胞源性趋化因子(MDC)佐剂对NTHiP6蛋白疫苗免疫效果的影响。将原核表达质粒PGEX-6P2/P6转入E.coli XL1-Blue,IPTG诱导P6蛋白的表达并进行纯化。将BALB/c小鼠随机分为A-D四组,分别为PBS对照组、MDC对照组、P6蛋白组、P6蛋白联合MDC组。分别于0、14、28d经黏膜免疫,末次免疫后14d,每组12只小鼠取血和肺泡灌洗液,ELISA检测血清中IgG抗体和肺泡灌洗液中IgA抗体水平。每组取3只小鼠,制备脾淋巴细胞,ELISA检测IL-4、IL-17和IFN-γ水平。用10LD50NTHi攻击每组剩余15只小鼠,观察免疫保护作用。在大肠杆菌中成功表达P6蛋白。第三次免疫后,D组诱导的IgG抗体、IgA抗体、IL-4、IL-17和IFN-γ水平显著高于其他各组(P<0.05)。经NTHi攻击后,D组生存率达80%,与A组、B组相比差异有统计学意义(P<0.05),但C组、D组之间无显著性差异(P>0.05)。MDC作为佐剂可以使NTHiP6疫苗获得较好的免疫效果。 韩小艳 张彦霞 杨新玲 李小俊 王晨红 张玉妥关键词:不可分型流感嗜血杆菌 黏膜免疫 MIP-1α和Flt3l基因佐剂联合应用对HPV16E7 DNA疫苗的免疫增强作用 被引量:2 2008年 目的:探讨巨噬细胞炎性蛋白1α(Macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)和酪氨酸激酶受体3配体(Flt3ligand,Flt3l)基因佐剂联合应用增强人乳头瘤病毒16型(Human papillomavirus16,HPV16)E7DNA疫苗免疫效果的可能性。方法:构建真核表达质粒pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7。C57BL/6小鼠随机分为8组,分别为pcDNA3组、pcDNA3/MIP-1α组、pcDNA3/Flt3l组、pcDNA3/MIP-1α和pcDNA3/Flt3l混合组、pcDNA3/HPV16E7组、pcDNA3/MIP-1α和pcDNA3/HPV16E7混合组、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组以及pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组。每组14只,肌肉注射质粒免疫小鼠,每3周免疫1次,共3次;末次免疫后2周每组随机抽取6只小鼠,取脾脏制备淋巴细胞悬液,用CCK-8试剂盒检测其对TC-1靶细胞的特异性杀伤能力。其余小鼠在腹股沟处皮下注射5×104个TC-1细胞,观察肿瘤生长情况。结果:成功构建了真核表达质粒pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7;pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组的CTL杀伤能力明显高于其它各组(P<0.01);肿瘤细胞攻击后16天,pcDNA3组小鼠全部长出肿瘤,而pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组的成瘤率仅为12.5%,明显低于其他组,统计学分析示8组之间成瘤率差异有显著性(P=0.007)。60天后各组成瘤率之间的差异无统计学意义(P=0.229)。结论:联合应用MIP-1α和Flt3l基因佐剂增强了HPV16E7DNA疫苗的免疫效果,一定程度上延缓了肿瘤的发生。 蓝佳明 高志云 耿媛 揣侠 赵娜 韩小艳 张永红 谢立新 金玉怀 王永祥关键词:巨噬细胞炎性蛋白1Α 基因佐剂 DNA疫苗 不可分型流感嗜血杆菌P6 DNA疫苗与蛋白疫苗序贯免疫效应研究 2015年 观察不可分型流感嗜血杆菌P6DNA疫苗初免蛋白疫苗加强免疫方式的免疫效果。大量扩增pcDNA3-P6。将65只BALB/c小鼠随机分PBS对照组、pcDNA3.1对照组、pcDNA3.1-P6组、P6蛋白组、pcDNA3.1-P6/P6蛋白组,分别于0、14、28d免疫。质粒每次每只接种100μg,蛋白每次每只接种10μg。末次免疫后14d,每组取10只小鼠取血,ELISA检测血清中特异性IgG抗体滴度。每组取3只小鼠处死,制备脾淋巴细胞,ELISA检测IL-4和IFN-γ水平,CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖指数。用15LD50NTHi攻击每组剩余10只小鼠,观察免疫保护作用。结果:pcDNA3.1-P6/P6蛋白组小鼠的脾淋巴增殖指数和IFN-γ水平明显高于质粒组和蛋白组(P<0.05)。pcDNA3.1-P6/P6蛋白组小鼠IgG抗体滴度、IL-4水平和动物生存率明显高于质粒组(P<0.05)但和蛋白组相比无明显差异(P>0.05)。因此pcDNA3.1-P6初免P6蛋白加强免疫的方式可以提高疫苗的免疫效果。 韩小艳 王晨红 张玉妥 乔海霞关键词:不可分型流感嗜血杆菌 质粒 基因疫苗干预对感染小鼠心肌组织病理及超微结构的影响 2010年 目的探讨基因疫苗干预对柯萨奇病毒B组3型(coxsackie virus group B type 3,CVB3)感染后,小鼠心肌组织病理及细胞超微结构的变化及意义。方法将BALB/C小鼠随机分为3组,每组11只,用空质粒pcDNA3、基因疫苗pcDNA3/VP1和融合基因疫苗pcDNA3/MDC-L19-VP1分别免疫,共3次,每次间隔4周。末次免疫后第3周,每组随机取3只小鼠,腹腔注射含3倍半数致死量(3 half lethal dose,3LD50)的CVB3病毒液,感染后第7天将小鼠处死,用于检测血中病毒滴度,并取心脏组织进行病理观察和细胞超微结构观察。每组剩余8只小鼠,腹腔注射致死量病毒液,观察并记录动物存活情况。结果预防性接种重组基因疫苗后,CVB3感染的小鼠生存率pcDNA3/MDC-L19-VP1组为37.5%,pcDNA3/VP1组12.5%,pcDNA3组11 d内全部死亡,3组生存率比较差异有统计学意义(P<0.01);3组小鼠血中的病毒滴度依次降低,且差异有统计学意义(P<0.01);光镜观察显示pcDNA3/MDC-L19-VP1组小鼠心肌组织细胞未出现严重的水肿和炎细胞浸润,电镜显示心肌细胞未出现核周水肿,肌原纤维未见断裂溶解,线粒体、肌浆网等细胞器未见明显异常,仅有少量炎性细胞浸润。结论融合基因重组疫苗可以有效的预防CVB3感染对心肌的损伤。 羡鲜 韩小艳 孟丽 赵春芳 王永祥关键词:柯萨奇病毒感染 小鼠 增强柯萨奇病毒B3 VP1核酸疫苗免疫效果的研究 王永祥 金玉怀 揣侠 房文亮 王晓凌 方艳辉 赵娜 韩小艳 高志云 蓝佳明 吴淑慧 刘贵霞 于丹军 张永红 谢立新 该课题应用分子生物学、病毒学、免疫学、医学信息学等各学科的最新发展,深入研究了增强CVB3 VP1 核酸疫苗免疫效果的方法,构建了真核表达质粒pcDNA3/VP1,肌肉注射免疫小鼠后可诱导产生中和抗体,为了提高免疫效果进...关键词:关键词:核酸疫苗 免疫效果