韩芳
- 作品数：19 被引量：46H指数：3
- 供职机构：集美大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学文化科学轻工技术与工程更多>>
- 大黄鱼Rab11基因的克隆与表达分析被引量：2
- 2016年
- 克隆了大黄鱼小G蛋白家族中的Rab11基因,测序查明其c DNA序列全长1373 bp,其中5’非编码区为129 bp,3’非编码区为587 bp,开放阅读框为657 bp,编码218个氨基酸;其氨基酸序列与罗非鱼、斑马鱼等鱼类Rab11蛋白序列同源性在95%左右,与人类、大熊猫等物种的同源性也达到90%以上。Rab11基因在大黄鱼脾脏、鳃、肾脏、皮肤、肝脏、血液、肠、心脏和胃9个组织中均有表达,在血液、肝脏中表达量最高,在胃中表达量最低;溶藻弧菌刺激后大黄鱼肝脏、肾脏和脾脏组织中Rab11基因的表达量均明显上调,提示Rab11在大黄鱼的抗病免疫反应中有着重要的作用。
- 张宇韩芳刘岚萍王志勇
- 关键词：大黄鱼免疫
- 黄姑鱼NK-lysin基因的克隆及表达分析
- 2022年
- 从黄姑鱼转录组数据库中筛选出NK-lysin基因,命名为YdNkl-2。YdNkl-2基因cDNA全长600 bp,其中开放阅读框为456 bp,编码151个氨基酸。YdNkl-2具有一个信号肽和一个鞘脂激活蛋白B(saposin B)结构域。亚细胞定位结果显示,YdNkl-2分布于细胞质和细胞核。实时荧光定量PCR结果表明,YdNkl-2的mRNA广泛分布于黄姑鱼各组织,其中在鳃和脾脏中的表达量最高。经哈维氏弧菌感染后,头肾、肝脏和脾脏中的YdNkl-2表达量均明显升高,提示YdNkl-2在哈维氏弧菌感染黄姑鱼过程中发挥重要作用。
- 吴宝兰罗帅韩芳王志勇
- 关键词：黄姑鱼亚细胞定位
- 一种大黄鱼原肌球蛋白基因及其重组蛋白与应用
- 一种大黄鱼原肌球蛋白基因及其重组蛋白与应用，涉及一种原肌球蛋白。蛋白基因具有NO.1基因序列，GST重组蛋白具有NO.2氨基酸序列，重组蛋白的制备：用2条特异性引物扩增原肌球蛋白基因的开放阅读框；插入表达载体pGEX-4...
- 韩芳王志勇
- 文献传递
- 一种鉴别日本白姑鱼遗传性别的分子标记及其引物对
- 本发明公开了一种鉴别日本白姑鱼遗传性别的分子标记及其引物对。其分子标记的序列如SEQ ID NO:1所示,存在于日本白姑鱼遗传性别X染色体上，在Y染色体上缺失。引物对的序列如SEQ ID NO:2和3所示。应用该引物对可...
- 李完波刘易科叶坤韩芳
- 黄姑鱼锰超氧化物歧化酶基因的克隆及氨氮和亚硝态氮胁迫对其表达的影响被引量：3
- 2019年
- 锰超氧化物歧化酶(MnSOD)是一种含金属辅基的抗氧化酶,广泛存在于各种需氧生物中,能将氧自由基快速歧化为分子氧(O_2)和过氧化氢(H_2O_2)。本研究首次获得了黄姑鱼MnSOD基因的cDNA序列,其全长958 bp,包括47 bp的5′端非编码区(untranslated region,UTR)、233 bp的3′UTR和678 bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),编码225个氨基酸残基(aa)。氨基酸序列分析显示,MnSOD含有一条信号肽序列(1～27 aa),4个Mn结合位点(His 53、101、190和Asp 186)和一条保守的锰/铁SOD特征序列(186～193 aa)。系统进化树分析显示,黄姑鱼MnSOD在进化上与大黄鱼最近,并与其他鱼类(斜带石斑鱼、暗纹东方鲀、牙鲆、斑马鱼和日本鳗鲡)聚为一支。荧光定量PCR检测显示,MnSOD基因在所检测的11个黄姑鱼组织/器官中均有表达,其中心脏中表达量最高,其次为脑、肝脏、鳃、中肾、肠、胃、头肾、肌肉和鳔,在脾脏中表达量最低。氨氮和亚硝态氮对黄姑鱼的急性毒性实验显示,黄姑鱼对氨氮胁迫更为敏感,其氨氮和亚硝态氮的96 h半致死浓度(LC50)分别为20.23 mg/L (换算成非离子氨0.57 mg/L)和99.08 mg/L,安全浓度分别为2.02 mg/L (换算成非离子氨0.06 mg/L)和9.91 mg/L。此外,黄姑鱼经氨氮和亚硝态氮急性攻毒后,其肝脏、鳃和头肾中MnSOD基因的表达水平均不同程度上调,推测MnSOD的上调是为了及时清除由氨氮和亚硝态氮刺激产生的氧自由基,或可用作水体污染检测的早期生物标志物。
- 王小龙宋青王志勇韩芳
- 关键词：黄姑鱼锰超氧化物歧化酶氨氮亚硝态氮
- 日本囊对虾Ran基因的克隆表达与蛋白质GTP结合活性分析被引量：2
- 2010年
- 在日本囊对虾抑制性差减杂交(suppression subtractive hybrid ization,SSH)研究过程中,首次发现一段经同源比较为Ran基因的部分序列,在抗病日本囊对虾中上调表达.为了进一步探索日本囊对虾Ran基因的功能,通过RACE-PCR的方法克隆得到了日本囊对虾Ran基因全长共1 441个碱基,其中开放阅读框为645个碱基,共编码215个氨基酸,这是首次在海洋无脊椎动物体内克隆到该基因.还将该基因克隆到原核表达载体PGEX-4T-2中并转化大肠杆菌BL21,37℃下诱导6 h,超声裂解表达菌株,结果表明GST-Ran融合蛋白在大肠杆菌中为可溶性表达,蛋白大小约为50 ku,经纯化得到了纯度大于90%的GST-Ran融合蛋白.随后的GTP结合试验验证了Ran蛋白具有GTP结合活性.
- 韩芳王志勇
- 关键词：日本囊对虾蛋白表达
- 日本囊对虾原肌球蛋白的原核表达、抗体制备以及组织表达分析被引量：2
- 2012年
- 食物过敏是人类常见的一种过敏性疾病,主要由食物中的蛋白质引起。原肌球蛋白(tropomyosin,TPM)是食用虾蟹等甲壳动物引起过敏反应的主要致敏物质。研究从日本囊对虾肌肉组织中克隆了TPM基因,进行了原核表达和蛋白质纯化,并进一步制备了相应的抗体。Western-blotting分析表明原肌球蛋白在日本囊对虾组织中普遍表达,并且肌肉组织中表达量最高而鳃和皮肤组织中表达量最低。研究结果为对虾过敏性疾病的诊断和治疗以及脱敏食品开发等奠定了理论基础。
- 韩芳王志勇王晓清
- 关键词：日本囊对虾原肌球蛋白抗体制备
- 织锦巴非蛤不同组织及性别总类胡萝卜素含量比较分析
- 本文分析了织锦巴非蛤(Paphia textzle)斧足、外套膜、闭壳肌、鳃、性腺5个组织以及不同性别的总类胡萝卜素含量(TCC),结果显示:织锦巴非蛤5个组织的总类胡萝卜素含量除鳃与性腺之间没有显著性差异之外(P>0....
- 邓素贞李庆昌韩芳张晓林蔡明夷张静刘贤德
- 关键词：性别
- 文献传递
- 大黄鱼Ran、Rab、Rac分子特征和功能研究
- 大黄鱼是我国养殖量最大的海水经济鱼类之一,但是随着其养殖业的快速发展,因病毒和细菌等引发的病害日趋严重,造成重大经济损失。因此,加强对大黄鱼免疫学理论的基础研究,了解其抗病免疫机制,对大黄鱼疾病控制和养殖业健康发展十分重...
- 韩芳
- 关键词：大黄鱼RANRABRAC分子免疫
- 文献传递
- 对虾白斑综合征病毒wsv477基因的克隆表达与时相分析被引量：1
- 2010年
- 将对虾白斑综合征病毒(white spot syndrome virus,WSSV)的功能基因wsv477克隆到原核表达载体PGEX-4T-2中,并转化大肠杆菌BL21,37℃条件下诱导了WSV477蛋白的表达,并以纯化的融合蛋白作为抗原,免疫小鼠获得了多克隆抗体.该基因开放阅读框共624个核苷酸,编码208个氨基酸,GST融合蛋白相对分子质量为49000,抗体滴度为1:10000.RT-PCR和Western blot分析表明,该基因在病毒感染4h后开始转录,6h后开始表达,是WSSV感染的早期基因.
- 韩芳王志勇巫旗生王晓清
- 关键词：对虾白斑综合征病毒时相分析
