马兴元
- 作品数:117 被引量:142H指数:6
- 供职机构:华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金军队医药卫生科研基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学生物学化学工程更多>>
- 大肠杆菌热敏毒素B亚单位的真核表达方法
- 本发明涉及一种大肠杆菌热敏毒素B亚单位(E.coli heat-labile enterotoxin B subunit,LT-B)的真核表达方法,其主要步骤是:首先将LT-B的核酸序列(如SEQ ID NO:1所示)通...
- 魏东芝马兴元郑文云王天文罗晨马昱澍
- 文献传递
- 利用类弹性蛋白可逆相变和内含肽自切割功能高效制备TmSm抗肿瘤蛋白
- 2013年
- 目标蛋白TmSm是研发出的一种能够较强抑制肿瘤细胞生长和促进其凋亡的基因工程抗肿瘤蛋白,其由介导目的蛋白进入细胞的转导肽HIV-TAT突变体(Tm)和Survivin突变体(Sm)融合而成。原先的TmSm制备工艺以包涵体表达、变性和复性为主,其过程不仅复杂、收率低成本高,而且所得蛋白活性较低。通过将TmSm基因与编码类弹性蛋白(elastin-like polypeptides,ELPs)和内含肽(intein)的标签序列(EI)进行融合,利用ELPs的可逆相变特性和intein的自切割功能,经简单的温度及pH调控,获得了纯度为99.00%的TmSm蛋白。将纯化后的蛋白作用于肺癌细胞A549,24 h后MTT结果显示,63.21μg/ml的目的蛋白对A549的抑制率为57.83%;流式细胞仪检测结果表明,当TmSm浓度为40μg/ml时,24 h后细胞凋亡率为41.72%。因此,这种新型的以类弹性蛋白和内含肽介导的表达纯化技术不仅成本低廉,而且对抗肿瘤蛋白药物的质量提高具有重要应用价值。
- 石磊唐莉莉马兴元王天文马飞王平
- 关键词:内含肽肺癌细胞A549
- 抗肿瘤药物TAT(m)-Survivin(T34A)的纯化复性方法
- 本发明提供了一种重组抗肿瘤蛋白新药TAT(m)-Survivin(T34A)的纯化复性方法,所述方法包括以下步骤:包涵体制备与洗涤,包涵体变性,蛋白复性,蛋白纯化,其特征在于,蛋白复性采用阴离子交换层析复性,蛋白纯化采用...
- 魏东芝马兴元张海毅李明华郑文云赵莉刘清海
- 文献传递
- 流感疫苗最新研究进展
- 本文主要就目前最新流感疫苗,主要就流感通用疫苗、病毒纳米粒子疫苗进行阐释,同时也对具有重要应用前景的DNA疫苗和mRNA疫苗研究也作一综述,为人们研究相关的新型疫苗奠定基础。
- 张旭凡王平王天文马兴元
- 关键词:流行性感冒疫苗药理作用疗效评价
- 文献传递
- 山东汉族人群中13个快速突变(RM)Y-STR基因座的多态性被引量:5
- 2019年
- 本研究旨在调查13个快速突变Y染色体STR基因座(RMY-STR)在山东汉族人群中的等位基因频率以及遗传多态性。采集154个山东无关男性个体FTA卡血液样本。采用13个RMY-STRPCR复合扩增体系进行扩增以及AB3130XL遗传分析仪进行Y-STR分型,并对分型结果进行相关统计,检测13个RMY-STR位点遗传多态性分布。本研究在13个基因座上共检测出331个等位基因,基因型多态性(GD)分布在0.7643(DYS576)~0.9946(DYF399S1abc)之间。通过13个RMY-STR基因座在154名山东汉族男性无关个体中共检测出154种单倍型,无共享单倍型现象出现。总的单倍型多样性(HD值)为1,识别能力(DC值)为1。故13个RMY-STR基因座组成的分型系统在山东汉族人群中表现出很强的个体识别能力,具有重要的法医学应用价值。
- 陈玉玲李敏赵珍敏李亚男包云盛翔朱如心王亚丽马兴元
- 关键词:单倍型Y染色体
- 纳米抗体靶向性泛素化降解细胞内源性Survivin的组合物及其应用
- 本发明提供纳米抗体靶向性泛素化降解细胞内源性Survivin的组合物,包括Survivin纳米抗体、Fc结构域、T2A多肽和TRIM21,所述组合物优选为Nb4A‑Fc‑T2A‑TRIM21。本发明采用纳米抗体和TRIM...
- 马兴元刘畅郑文云胡发彪郭伟刘秋丽付云辉
- 口蹄疫与经典猪瘟二联RT-PCR诊断方法的建立及其应用被引量:3
- 2004年
- 根据口蹄疫病毒 (FMDV)与猪瘟病毒 (CSFV)基因组序列高度保守区 ,设计合成 2对引物 ,以 CSFV和 FMDV培养物提取 RNA并反转录 ,进行 RT- PCR特异性片段扩增 ,扩增片段大小分别为 2 0 0 bp、14 1bp。结果表明 ,扩增产物与设计的2对引物之间的序列大小一致。通过特异性与敏感性试验 ,CSFV与 FMDV培养物均可扩增至 10 - 5倍稀释 ,最终建立的二联RT- PCR方法对上述 2种病毒的敏感性亦可达 10 - 4倍稀释 ,约 10 pg的总 RNA,证明本法对上述 2种病毒具有快速、特异和高度敏感的特点。
- 刘海鹏刘维全江禹夏平安王本旭王吉贵马兴元王萍赵玉军
- 关键词:口蹄疫猪瘟RT-PCRRNA病毒反转录
- 偶联重组Pro-A和/或G多糖亲和介质及其应用
- 本发明公开偶联重组Pro-A和/或G多糖亲和介质及其应用,重组Pro-A具有3个B结构域串联,避免不同结构域与抗体Fc段亲和性的差异,重组Pro-G去除了白蛋白和细胞表面结合域,以减少非特异性结合,且重组Pro-G仅含有...
- 郑文云陈萧萧何秀娟马兴元
- 文献传递
- 人脑乙酰胆碱酯酶(hAChE)基因在毕赤酵母中的分泌表达与鉴定
- 2005年
- 研究了hAChE基因在毕赤酵母中的表达。设计并合成引物Pb1和P2,以18周龄引产胎儿大脑组织mRNA为模板,经AMV逆转录和高保真PCR,扩增出序列正确的hAChE成熟肽完整基因约1.8kb,经鉴定获得正确构建的分泌型酵母表达栽体pHIL-S1(hAChE),BglⅡ线性化后回收的酵母表达单位经电穿孔法转化入毕赤酵母GS115中,经MD/MM营养表型筛选、提取酵母基因组进行PCR鉴定和含3-酰基吲哚培养基进行表达产物的显色反应,初步筛选出分泌表达有hAChE活性的P.patstoris菌22株。依据hAChE酶活性与3-酰基吲哚显色深浅成正比,在平皿和微量反应板上快捷地筛选出高效表达菌pHIL-S1(AChE)(Ⅰ)-7株,SDS-PAGE分析和Western印迹试验表明,产物分子量约为65kDa,经甲醇诱导摇瓶培养,发酵上清原液rhAChE相对酶活性高达4.0mU/ml,表达量占分泌蛋白总量的23.6%。
- 马兴元谭建华魏东芝朱平孙曼霁
- 关键词:毕赤酵母SDS-PAGE分析PASTORISACHE活性酵母基因组HACH
- 抗PD-L1纳米抗体及其应用
- 本发明提供一种抗PD‑L1纳米抗体及其应用,所述抗体的序列包括FR区、CDR区以及HV区;所述FR区包括氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的FR1区、SEQ ID NO.2所示的FR2区、SEQ ID NO.3所示的...
- 郑文云刘秋丽马兴元