骆爱芳
- 作品数：11 被引量：18H指数：3
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- 猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株编码复制酶聚蛋白ORF1的克隆及结构特征分析被引量：1
- 2007年
- 应用RT-PCR方法扩增了猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株编码复制酶聚蛋白的ORF1序列,将其进行克隆、序列测定和分析。确认SC-Y株ORF1全长20 053 nt(GenBank收录号DQ390461)。该序列包含2个ORF,其中ORF1a由12 053个核苷酸构成,可编码由4 018个氨基酸组成的多肽,ORF1b由8 036个核苷酸构成,可编码由2 678个氨基酸组成的多肽。对SC-Y与TGEV参考毒株及不同冠状病毒对应区进行序列比较,结果显示,SC-Y株与PUR46-MAD株的同源性最高,ORF1a的核苷酸同源性为99.5%,推导氨基酸同源性为99.2%,ORF1b的核苷酸及推导氨基酸同源性均为99.8%;不同冠状病毒之间ORF1b比ORF1a具有更高的保守性。
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- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒
- 猪传染性胃肠炎病毒全基因组克隆与序列分析
- 猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎病毒引起的一种急性、高度接触性传染病,以呕吐、水样腹泻、脱水和对2周龄以内仔猪高度致死率为特征,病毒基因组为单股正链RNA,具有感染性。全长约28.5kb,包括8个功能基因,可编码4个结构...
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- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒全基因组基因克隆
- 文献传递
- 猪传染性胃肠炎病毒四川株M蛋白基因克隆分析及真核表达载体构建被引量：2
- 2007年
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- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒真核表达载体克隆分析表达载体构建TGEV
- 猪白细胞介素15基因的克隆、表达及其生物活性初步测定
- 白细胞介素15(IL-15)是与白细胞介素2(IL-2)有相似生物学活性，但无序列同源性的新细胞因子，其体内分布远较IL-2广泛，在免疫调节和免疫应答尤其是在抗肿瘤免疫应答中有重要作用。1997年发现的猪白细胞介素15(...
- 骆爱芳
- 关键词：基因克隆原核表达生物活性测定免疫调节
- 文献传递
- 荣昌猪白细胞介素15成熟肽基因的克隆、表达及其表达产物活性检测被引量：5
- 2007年
- 运用RT-PCR技术从由刀豆蛋白(ConA)诱导培养的荣昌猪外周血淋巴细胞(PBMC)扩增出猪白细胞介素15(pIL-15)完整开放阅读框(ORF),共489 bp,编码162 aa。与已公布的2个猪IL-15基因核苷酸同源性均为99.4%。分子进化分析表明其与人及哺乳动物IL-15基因的进化关系较近,而与鸡的IL-15基因进化距离较远。运用PCR技术从含荣昌猪IL-15开放阅读框序列质粒中扩增其成熟蛋白编码基因,共345 bp。将其定向克隆于原核表达载体pET-32a(+)后在E.coliBL21中诱导表达,SDS-PAGE结果显示表达的融合蛋白约为34 ku,重组蛋白以包涵体形式表达,表达产物约占菌体总蛋白的38.7%;Western blot分析表明,在相对分子质量34 ku处有一条特异性带;对诱导重组菌进行转录检测得到约356 bp的特异性片段。MTT法试验证实,表达产物初步纯化、透析复性后,可明显增强淋巴细胞的增殖。荣昌猪IL-15成熟肽成功在体外表达,获得的高效表达的产物具有一定的生物学活性。
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- 关键词：原核表达生物学活性
- 猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株N基因的克隆及原核表达
- 通过PCR方法扩增猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株核衣壳蛋白(N)基因，然后将重组到pMD18-T载体中的约1174bp的基因片段亚克隆到PET-32a(+)表达载体上，通过酶切及PCR鉴定阳性的重组质粒命名为PET-N，核...
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- 关键词：猪传染性胃肠炎原核表达融合蛋白
- 文献传递
- 猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株N基因的克隆及原核表达被引量：7
- 2006年
- 通过PCR方法扩增猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株核衣壳蛋白(N)基因,然后将重组到pMD18-T载体中的约1174 bp的基因片段亚克隆到PET-32a(+)表达载体上,通过酶切及PCR鉴定阳性的重组质粒命名为PET-N,核苷酸及推导的氨基酸序列分析表明,该基因与其他猪传染性胃肠炎病毒相应基因具有很高的同源性,将阳性重组质粒转化BL21(DE3),经IPTG诱导可表达分子量约66 kD的融合蛋白,N基因的表达可为传染性胃肠炎病毒的诊断提供良好的物质材料。
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- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒N基因原核表达
- 猪白细胞介素-15基因的克隆及生物信息学分析被引量：3
- 2007年
- 参照GenBank登录的猪白细胞介素-15(IL-15)基因序列自行设计1对特异性引物,运用RT-PCR技术从由刀豆蛋白A(ConA)诱导培养的荣昌猪外周血淋巴细胞扩增出猪IL-15基因的完整CDS序列,全长489 bp。同源比对结果表明,荣昌猪IL-15基因与已公布的2个猪种IL-15基因核苷酸同源性均为99.4%,与哺乳动物的同源性较高,与鸡的同源性较低。密码子偏爱性分析显示,荣昌猪IL-15基因在密码子使用上存在一定的偏爱性;分子进化分析结果表明其与人及哺乳动物IL-15基因的进化关系较近,而与禽类鸡的IL-15基因进化距离较远;结构域预测分析显示其与人的IL-15存在很大的相似性,可能在功能上有相似性。
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- 关键词：荣昌猪克隆生物信息学分析
- 猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株编码复制酶聚蛋白ORF1的克隆及结构特征分析
- 应用 RT-PCR 方法扩增了猪传染性胃肠炎病毒 SC-Y 株编码复制酶聚蛋白的 ORF1序列,将其进行克隆、序列测定和分析。确认 SC-Y 株 ORF1全长20053bp (GenBank 收录号 DQ390461)。...
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- 文献传递
- 猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株编码复制酶聚蛋白ORF1的克隆及结构特征分析
- 应用RT-PCR方法扩增了猪传染性胃肠炎病毒SC-Y株编码复制酶聚蛋白的ORF1序列，将其进行克隆、序列测定和分析。确认SC-Y株ORF1全长20053bp(GenBardk收录号DQ390461)。该序列包含2个ORF...
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- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒密码子
- 文献传递
