高峰
- 作品数：10 被引量：9H指数：2
- 供职机构：湖南农业大学更多>>
- 发文基金：江苏省农业科技自主创新基金公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学经济管理更多>>
- 检测嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒及其抗体的间接ELISA试剂盒
- 本发明提供检测嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒及其抗体的间接ELISA试剂盒，属于生物技术领域。所述检测嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒抗体的间接ELISA试剂盒，该试剂盒包括：已包被有抗嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒DS10株单克隆抗...
- 陆吉虎高峰唐应华杨维维侯继波
- 文献传递
- 产蛋下降综合征病毒纤突蛋白Knob-S区原核表达及其活性分析被引量：6
- 2012年
- 通过PCR扩增得到产蛋下降综合征病毒(EDSV)纤突蛋白Knob-S区基因,将其克隆至原核表达载体pET-32(a)的多克隆位点构建了原核表达载体pET-32(a)-Knob-S,将其转化至感受态细胞BL21中,经IPTG诱导,SDS-PAGE分析,结果获得了42ku的融合蛋白,用纯化的融合蛋白免疫鸡制备抗血清,通过血凝试验、Western blot和血凝抑制试验分析,表明该融合蛋白不能凝集鸡红细胞,无血凝活性;但可与EDSV阳性血清发生特异反应,并诱导机体产生特异性抗体,具有很好的抗原性。
- 陈滔唐应华陆吉虎高峰于漾何家惠黎满香侯继波
- 关键词：原核表达
- 湖南A粮油食品公司员工满意度评价及提升路径研究
- 在当今社会,企业之间的竞争主要是企业核心竞争力之间的竞争,而人才竞争力是企业核心竞争力的最核心部门,吸引优秀人才和和留住优秀人才已成为企业人力资源管理中的重要组成部分。要切实做好这项工作,必须从根本上提高员工的工作满意度...
- 高峰
- 关键词：员工满意度灰色关联法
- 文献传递
- 抗嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒DS10株的单克隆抗体
- 本发明提供抗嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒DS10株的单克隆抗体，属于生物技术领域。本发明提供一种分泌抗嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒DS10株单克隆抗体的杂交瘤细胞株2G4，该杂交瘤细胞株的保藏号为CGMCCNo.6172。本...
- 陆吉虎高峰唐应华杨维维侯继波
- 文献传递
- 检测嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒及其抗体的间接ELISA试剂盒
- 本发明提供检测嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒及其抗体的间接ELISA试剂盒，属于生物技术领域。所述检测嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒抗体的间接ELISA试剂盒，该试剂盒包括：已包被有抗嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒DS10株单克隆抗...
- 陆吉虎高峰唐应华杨维维侯继波
- 含禽流感病毒M2e氨基端抗原表位的重组传染性法氏囊病毒VP2蛋白的免疫原性鉴定被引量：2
- 2012年
- 【目的】构建传染性法氏囊病毒VP2蛋白展示禽流感M2e抗原表位的重组蛋白,研发预防H5或H9亚型禽流感和传染性法氏囊的基因工程疫苗。【方法】根据现有禽流感疫苗株M2e的氨基端12个氨基酸多肽序列(nM2e)序列,结合GenBank中H5和H9亚型禽流感病毒nM2e的比对结果,确定nM2e序列。用融合PCR分别将1拷贝H5或H9的nM2e序列插入IBD B87株VP2基因的PBC区,获得VP2BCnM2e重组基因。将重组基因克隆至杆状病毒表达系统,转染Sf9细胞进行表达。经间接免疫荧光和Western blotting检测Sf9细胞表达重组基因后,扩繁重组病毒,制备疫苗,间隔4周对非免鸡作2次重复免疫,用间接ELISA和鸡胚成纤维细胞中的病毒血清中和试验检测血清中VP2和nM2e的抗体效价。【结果】成功构建含H5或H9 nM2e的VP2BCnM2e重组基因,该重组基因在Sf9细胞中得到表达。经免疫鸡,两重组蛋白均能激发针对VP2和nM2e的抗体,VP2BCnM2eH5组抗体效价高于VP2BCnM2eH9组。【结论】两重组蛋白均具有免疫原性,VP2BCnM2eH5免疫原性更佳。
- 唐应华宫玉珍王永伟陆吉虎吴培培高峰陈滔何家惠侯继波
- 关键词：禽流感病毒传染性法氏囊病毒VP2
- 减蛋下降综合征病毒重组Knob-S基因在杆状病毒系统中的表达及其免疫原性鉴定被引量：2
- 2015年
- 为以杆状病毒系统在Sf9细胞中表达含减蛋下降综合征病毒(EDSV)重组Knob-S蛋白质来制备亚单位疫苗,采用PCR方法从鸭胚繁殖的EDSV尿囊液中扩增Knob-S基因,并克隆到p Fast Bac1中,经转化DH10Bac获得重组r Bac-Knob-S。将r Bac-Knob-S转染Sf9细胞获得重组杆状病毒,利用重组杆状病毒感染Sf9细胞表达重组蛋白质。重组Knob-S蛋白质经Western blotting和间接免疫荧光试验鉴定均为阳性。将重组Knob-S蛋白质制备成疫苗,按1羽0.3 ml(含50μg的重组病毒)免疫6周龄非免海兰褐雏鸡,在免疫后第2周可检测到血凝抑制抗体效价达8.5 lg2,在第3周达到高峰(9.5 lg2),表明重组Knob-S蛋白质具有较好的免疫原性。
- 郑金陈滔陆吉虎高峰候继波黎满香唐应华
- 关键词：真核表达杆状病毒表达系统
- 抗嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒DS10株的单克隆抗体
- 本发明提供抗嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒DS10株的单克隆抗体，属于生物技术领域。本发明提供一种分泌抗嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒DS10株单克隆抗体的杂交瘤细胞株2G4，该杂交瘤细胞株的保藏号为CGMCCNo.6172。本...
- 陆吉虎高峰唐应华杨维维侯继波
- Sox9基因表达及其在猪未成熟支持细胞中的作用研究
- Sox9基因是哺乳动物睾丸决定基因SRY的主要靶基因,位于雄性Y染色体上。在哺乳动物中,Sox9已被证明在雄性性别决定、睾丸发育和支持细胞分化等过程中发挥关键作用。支持细胞作为输精管内独特的体细胞,具有多种功能,包括为发...
- 高峰
- 关键词：SOX9增殖凋亡
- 文献传递
- 传染性支气管炎病毒抗体间接ELISA检测方法的建立
- 2012年
- 为了快速检测针对传染性支气管炎病毒(IBV)抗体,本研究建立相应的间接ELISA(iELISA)检测方法。以本实验室分离的临床毒株DS10为检测抗原,经过差速离心纯化获得DS10病毒作为包被抗原,利用方阵试验,优化一系列条件,最终确定了最佳的ELISA反应条件。抗原最佳包被浓度为0.11mg/mL,血清最适稀释度为1:100,封闭液为含1%BSA的PBST,封闭时间为60min,一抗作用时间90min,HRP标记的兔抗鸡IgG稀释倍数为1:3500,作用时间为60min,显色时间为10min。用iELISA方法和血凝抑制试验(HI)同时检测145份血清样品的结果表明,建立的iELISA方法与常规的HI检测的符合率为92.41%,iELISA和HI的阳性检出率分别为92.41%和90.34%,iELISA的敏感性略优于HI。
- 高峰唐应华宫玉珍陈涛陆吉虎吴培培傅童生侯继波
- 关键词：传染性支气管炎间接ELISA抗体检测
