高静雷
- 作品数:7 被引量:18H指数:3
- 供职机构:四川农业大学更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 一种利用SCAR技术鉴别金龙胆草及其混淆品的SCAR引物及其方法
- 本发明公开了一种利用SCAR技术鉴别金龙胆草及其混淆品的SCAR引物及其方法,提取混淆品植物的基因组DNA,将样品的基因组DNA进行SCAR-PCR扩增,其SCAR-PCR扩增体系为:25μL体系中含有Mg<Sup>2+...
- 陈惠刘姗孙蓉唐自钟高静雷李成磊韩学易吴琦黄晓燕
- 文献传递
- 定向进化技术提高枯草芽孢杆菌角蛋白酶活性研究
- 角蛋白酶(keratinase)可以由很多种微生物分泌产生,是一类对角蛋白具有一定特异降解能力的酶类。由于角蛋白降解后含有很多的氨基酸及微量元素,生长因子,通过利用角蛋白酶降解作用,可以把废弃的羽毛中的角蛋白制作成动物饲...
- 高静雷
- 关键词:枯草芽孢杆菌角蛋白酶易错PCR酶活力
- 文献传递
- 金龙胆草SRAP银染反应体系的建立与优化被引量:2
- 2014年
- 建立适宜金龙胆草DNA的SRAP-PCR扩增体系,为金龙胆草分子标记打下基础。针对常规银染方法从是否固定、银染液组成、银染时间、显影液组成等方面优化了金龙胆草SRAP扩增产物的检测方法,同时探索了金龙胆草SRAP-PCR反应程序,并对金龙胆草SRAP-PCR反应体系的各影响因子进行优化。结果建立了一个银染步骤快速、高效的银染检查方法,筛选的退火温度为51.3℃,最佳SRAP-PCR反应体系(15μL)为:DNA 40 ng,引物浓度0.7μmol/L,dNTPs 0.25 mmol/L,Mg2+1.9 mmol/L,Taq聚合酶0.6 U,10×buffer 2μL,双蒸水补足。该程序和体系能很好地满足金龙胆草基因组SRAP扩增的要求,SRAP标记应用于金龙胆草遗传研究是可行的。
- 刘姗高玉莲孙蓉唐自钟高静雷陈惠
- 关键词:金龙胆草SRAP
- 一种利用SCAR技术鉴别金龙胆草及其混淆品的SCAR引物及其方法
- 本发明公开了一种利用SCAR技术鉴别金龙胆草及其混淆品的SCAR引物及其方法,提取混淆品植物的基因组DNA,将样品的基因组DNA进行SCAR-PCR扩增,其SCAR-PCR扩增体系为:25μL体系中含有Mg<Sup>2+...
- 陈惠刘姗孙荣唐自钟高静雷李成磊韩学易吴琦黄晓燕
- 金龙胆草3-磷酸甘油醛脱氢酶基因的克隆及序列分析被引量:7
- 2013年
- 目的对金龙胆草Conyza blinii 3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)基因进行克隆及序列分析,并检测其是否可作为金龙胆草的内参基因。方法采用RACE技术克隆金龙胆草GAPDH基因的cDNA全长序列,利用DNAMAN、BLAST、MEGA等工具对序列进行生物信息学分析,并以其为内参进行半定量RT-PCR。结果克隆获得了1个全长1 418 bp的GAPDH基因,完整开放阅读框1 020 bp,编码340个氨基酸,命名为GLGAPDH。序列比对结果显示,金龙胆草的GAPDH基因与紫背天葵的同源序列相似性达到96%,与薇甘菊的同源序列相似性为93%。通过系统进化树分析发现其与紫背天葵的亲缘关系最近。半定量RT-PCR分析GLGAPDH作为内参基因在不同组织中表达稳定,扩增效果良好,重现性强。结论首次克隆了金龙胆草GAPDH基因的全长cDNA序列,并通过半定量实验验证了其可作为内参基因用于基因表达量分析,为金龙胆草次生代谢物合成过程中关键酶表达分析及调控机制的研究奠定了基础。
- 孙蓉高静雷刘姗唐自钟李成磊陈惠
- 关键词:金龙胆草克隆内参基因
- 野生金龙胆草遗传多样性的RAPD分析及总黄酮成分在局群间的分布特征被引量:4
- 2013年
- 探索来自18个采集地的金龙胆草RAPD遗传性分析及总黄酮成分在局群间的分布特征。采用筛选的10个随机引物,用NTSYSpc2.1软件计算材料间的Jaccard遗传相似系数(GS),并建立各种间的亲缘关系树形图,并利用紫外分光光度法测试各样品中总黄酮的含量。10个引物共扩出71个DNA片段,多态性DNA片段68个,占总扩增数的97.14%。18个金龙胆草种源可明显聚为2大类。总黄酮含量以攀枝花市范围的样品含量最高。不同种源金龙胆草间具有丰富的遗传多样性,总黄酮含量分布却与遗传聚类的分类有差异,提示今后在金龙胆草选育和道地药材研究上应该从多方面进行考虑。
- 刘姗孙蓉唐自钟高静雷胡洪利陈惠
- 关键词:金龙胆草RAPD聚类分析总黄酮