黄章虎
- 作品数：10 被引量：4H指数：1
- 供职机构：遵义医学院基础医学院更多>>
- 发文基金：广西省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 徒手克隆工具的自制及改进
- 徒手克隆技术(HMC)解决了由于昂贵设备对核移植技术应用的制约问题。通过徒手切割去核刀的自制,不但进一步节省了成本,而且更能符合使用者的习惯,提高了总的切割效率。实验结果表明,利用自制切割刀半卵法去核,可以达到每小时切割...
- 黄章虎任艳萍谭世俭孙洪亮
- 文献传递
- 水牛精子提取物对猪卵母细胞的孤雌激活效果
- 2010年
- 为验证精子蛋白对卵母细胞的激活效果,为提高核移植胚胎的质量提供可行方法,通过比较不同裂解方法提取的水牛精子蛋白,不同浓度提取液显微注入猪卵母细胞,对水牛精子提取物的孤雌激活效果进行研究。结果表明:采用液氮反复冻融法和超声波破碎法预处理后提取的水牛精子提取物对猪体外成熟卵母细胞都有显著的孤雌激活效果。水牛精子蛋白浓度在0.53～5.52 mg/mL,注射剂量为2～4 pL时均可有效激活猪卵母细胞,综合效果以1.77 mg/mL较佳。
- 谭世俭谢忠君石德顺谢体三黄章虎
- 关键词：卵母细胞显微注射孤雌激活水牛
- 组蛋白乙酰化与体细胞核移植关系的研究进展
- 过去三十年的研究中,相继发现组蛋白乙酰化转移酶和组蛋白去乙酰化转移酶参与许多生物发生过程,比如卵母细胞成熟和分裂,胚胎发育等,并在基因表达调控作用中起着重要作用。文章主要探讨组蛋白乙酰化在卵母细胞成熟分裂以及体细胞核移植...
- 孙洪亮陆凤花李楠黄章虎蒙丽娜刘晓华罗婷祝晓丽石德顺
- 关键词：组蛋白乙酰化组蛋白去乙酰化核移植卵母细胞胚胎
- 文献传递
- 水牛卵母细胞孤雌激活方法的优化
- 2011年
- 为了研究离子霉素(Ion)在不同环境下对水牛孤雌激活效果的影响及水牛卵母细胞在6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)液中以聚集激活或分离激活方式对激活效果的影响。试验对比了水牛卵母细胞在25℃室温环境和38.5℃CO2培养箱环境下的Ion激活效果,还比较了水牛卵母细胞在6-DMAP液中进行聚集激活和分离激活的孤雌激活效果。结果表明:试验组8-细胞胚胎率(54.11%)和囊胚率(31.51%)均高于对照组的8-细胞胚胎率(51.68%)和囊胚率(27.52%),但无统计学差异;在6-DMAP液中分离激活组(1组)的囊胚率明显优于聚集激活组(2组)的囊胚率。
- 黄章虎祝晓丽任艳萍范晓明谭世俭
- 关键词：水牛卵母细胞孤雌激活
- 水牛卵母细胞化学定向去核的初步研究
- 目的探讨通过化学定向去核方法对核成熟前水牛卵母细胞的去核,以简化水牛手工克隆技术程序。材料与方法实验用卵为体外成熟培养后,挑选出已排出第一极体成熟卵母细胞后剩余的核未成熟水牛卵母细胞(下称剩余水牛卵母细胞)。对比了卵母细...
- 黄章虎任艳萍谭世俭
- 文献传递
- 乳腺组织染色质免疫共沉淀方法的改进
- 2014年
- 作为研究基因表达调控的重要方法,近年来染色质免疫共沉淀(ChIP)得到了越来越广泛的应用,但有关将乳腺组织作为ChIP材料的研究及其方法尚未见报道。采用传统的组织ChIP试剂盒处理乳腺组织时,存在样品回收率低、乳脂/乳蛋白影响杂交效率和超声积热等问题,针对以上问题对乳腺组织ChIP方法进行改进。新方法省略组织均一化步骤、用酶切-超声法代替超声法进行染色质片段化、在细胞裂解和酶切步骤间增加洗涤步骤。结果显示,与脾脏组织相比,乳腺组织不适合进行组织均一化处理。酶切-超声法比超声法更适于对乳腺组织进行染色质片段化。采用改进后的ChIP方法获得的DNA样品中,靶序列得到显著的富集,所得的DNA样品能够满足测序(ChIP-Seq)要求。结果说明,改进后的方法适用于乳腺组织染色质免疫共沉淀,并为研究乳腺组织基因表达调控奠定了基础。
- 任艳萍罗婵黄章虎黄时海石德顺李湘萍
- 关键词：表观遗传学CHIP乳腺NUCLEASE
- 徒手克隆工具自制及改进被引量：1
- 2011年
- 徒手克隆技术(handmade somatic cell cloning,HMC)解决了由于昂贵设备对核移植技术应用的制约问题。通过徒手克隆刀的自制,不但进一步节省了成本,且更能符合使用者的习惯,提高总的切割效率。试验结果表明,利用自制克隆刀进行半卵法去核,可以达到每小时切割496枚卵母细胞的切割速度和88.14%的存活率;自制聚集针具有制作简单,可以打磨、效果好等特点,可以进一步简化和降低徒手克隆技术的成本,提高克隆效率。
- 黄章虎任艳萍谭世俭
- 水牛乳腺特异性表达PRL基因载体构建与表达检测
- 催乳素(Prolactin,PRL)可以刺激乳腺导管系统的发育,启动并维持泌乳,与产奶量密切相关。本文构建了水牛乳腺特异表达PRL基因的载体,并在细胞水平进行了表达检测。参考已公布的奶牛和部分水牛PRL序列,设计特异性扩...
- 任艳萍黄章虎刘庆友石德顺
- 关键词：水牛乳腺特异性表达催乳素
- 文献传递
- 水牛精子提取物对猪卵母细胞的孤雌激活效果
- 本研究采用液氮反复冻融或超声波破碎法获取水牛精子提取物，然后部分精子提取物采用超滤技术对精子蛋白进行了浓缩处理;采用紫外光度吸收法测定精子提取物中的蛋白质浓度。按实验设计通过显微注射将2-4pL含不同蛋门浓度的水牛精子提...
- 谢忠君谭世俭石德顺谢体三刘继龙王慧英黄章虎
- 关键词：孤雌激活超滤技术水牛猪卵母细胞
- 文献传递
- 水牛小腔卵泡分离方法的初步研究被引量：3
- 2011年
- 本研究比较了不同的分离方法和酶作用的不同时间,以及不同的卵巢表面状态等因素对水牛小腔卵泡分离效果的影响,以期建立有效的水牛小腔卵泡分离体系。结果发现,采用机械与酶结合的方法分离水牛小腔卵泡时,平均每个卵巢获得5.64个小腔卵泡,显著高于机械法分离平均每个卵巢获得的3.12个小腔卵泡数(P<0.05);当胶原蛋白酶作用12或15min,每个卵巢平均获得的小腔卵泡数均显著高于5和10min处理组(P<0.05),两组之间没有显著差异(P>0.05),但当消化时间延长到20min时,卵泡膜被酶消化而破裂,没法分离到小腔卵泡;从表面小于2mm卵泡且无黄体的卵巢分离获得的小腔卵泡平均数显著高于表面无可见卵泡且有黄体的卵巢组的平均数(7.50和2.25,P<0.05)。以上结果表明,选用表面无小于2mm卵泡且无黄体的卵巢,采用机械与酶结合的方法,酶作用时间为12～15min分离水牛的小腔卵泡,可获得的小腔卵泡数量最多。
- 李翠玲李楠黄章虎蒋建荣陆凤花石德顺
- 关键词：水牛小腔卵泡
