俞钦明
- 作品数：23 被引量：55H指数：4
- 供职机构：江西农业大学动物科学技术学院更多>>
- 发文基金：国家现代农业产业技术体系建设项目江苏高校优势学科建设工程资助项目江苏省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 鸭CYP7_α1基因克隆、序列分析及组织表达研究被引量：3
- 2012年
- 旨在克隆鸭胆固醇7α羟化酶1(CYP7α1)基因,并进一步探讨该基因的结构与功能,揭示其组织特异性表达规律。本研究以樱桃谷鸭为材料,运用同源序列克隆结合RACE技术,对鸭CYP7α1基因的cDNA全长进行克隆,并对其进行生物信息学分析及组织表达的研究。结果表明:鸭CYP7α1基因cDNA全长2 351bp,最大开放阅读框(ORF)1 539bp(114～1 652bp),共编码512个氨基酸;鸭CYP7α1氨基酸与鹅的同源性最高(97.5%),其次是鸡(92.8%)、人(67.3%)、猪(66.5%)、兔(65.7%)、大鼠(65.5%)、小鼠(65.5%)和牛(65.1%);经预测鸭CYP7α1蛋白可能含有1个P450超家族结构域;鸭CYP7α1基因在肝脏中呈高丰度表达,在其他9个组织中均未检测到或检测到少量表达,表明该基因的表达具有组织特异性。
- 兰旅涛陈昌义徐琪张扬罗军荣李秀李欣钰俞钦明陈阳陈国宏
- 关键词：克隆
- 鹅FSH基因原核表达
- 2014年
- 促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)作为调节家禽卵泡发育重要的候选基因,但FSH在生物体内的半衰期非常短,本试验将具有延长基因半衰期作用的CTP序列添加到鹅FSH基因各亚基的C末端进行基因融合,以期获得pET32a-FSHα-CTP、pET32a-FSHβ-CTP和pET32a-FSHβ-CTP-α重组蛋白。设计去除目的基因信号肽和含有酶切位点的特异性引物,经融合PCR扩增获得了目的基因FSHα-CTP、FSHβ-CTP和FSHβ-CTP-α,通过构建原核表达载体pET32a-FSHα-CTP、pET32a-FSHβ-CTP和pET32a-FSHβ-CTP-α,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测,蛋白纯化。结果显示,3个融合蛋白FSHα-CTP、FSHβ-CTP和FSHβ-CTP-α的IPTG最佳诱导时间分别为4、5和5h,最佳诱导浓度分别为0.2、0.8和1.5mmol/L,且都是以包涵体形式存在,相对分子质量分别为32 000、35 000和46 000,与预期大小一致。结果表明,本试验成功构建了鹅pET-32a-FSHα-CTP、pET-32a-FSHβ-CTP和pET-32a-FSHβ-CTP-α的原核表达载体,并对它们的重组蛋白进行了纯化,为开展鹅FSH的基因免疫研究和鹅rFSH生物制剂研发奠定基础。
- 甄霆俞钦明王彬朱振徐琪陈国宏
- 关键词：原核表达蛋白纯化
- 浙东白鹅异地小群保种效果监测被引量：3
- 2014年
- 为监测浙东白鹅异地小群保种效果,本研究利用10个微卫星座位对异地保种群体和原产地群体(共计486只)在分子水平上的遗传参数进行检测,同时测定其部分性状指标。利用SPSS13.0对群体遗传学参数和体重、体尺指标进行配对试验t检验。结果表明:在分子水平上,异地保种群体的优势等位基因频率、期望杂合度(He)以及多态信息含量(PIC)、群体内近交系数(Fis)较原产地群体均未发生显著变化(P>0.05);在性状水平上,公鹅的体重和胸深极显著变小(P<0.01),母鹅的体重、胸深、龙骨长、胫长等显著(P<0.05)或极显著变小(P<0.01);其他指标均无显著性变化。说明浙东白鹅异地小群保种群体在分子水平和性状水平上的大部分指标均无显著性变化,异地小群保种能够有效保存浙东白鹅的本品种特性,同时本实验也为进一步优化我国地方鹅品种的现有保种方式和探索新的异地保种策略提供参考依据。
- 张扬俞钦明黄正洋陈阳段修军徐琪陈国宏
- 关键词：微卫星DNA标记浙东白鹅
- 异位表达的鸭白蛋白下调鸡DF-1细胞IFN-β和Mx1 mRNA的表达被引量：1
- 2014年
- 目的研究白蛋白(ALB)基因对β-干扰素(IFN-β)和黏病毒抗性蛋白1(Mx1)mRNA表达的影响。方法本实验将鸭ALB基因亚克隆入pEGFP-C1真核表达载体,并通过脂质体法转染DF-1鸡成纤维细胞。24 h后,用聚肌胞苷酸(PolyI∶C)刺激,荧光定量PCR检测IFN-β和Mx1的mRNA的表达的动态变化情况。结果成功构建了真核表达载体pEGFP-C1-ALB,并有效的转染入DF-1细胞。PolyI∶C刺激12 h后,ALB组中IFN-β和Mx1基因的表达量显著低于EGFP组(P<0.05,P<0.01)。结论过表达鸭ALB基因下调DF-1细胞IFN-β和Mx1 mRNA的表达。
- 童一宇陈阳徐琪朱振俞钦明张扬黄正洋陈国宏
- 关键词：基因表达聚肌胞苷酸白蛋白
- 广丰白翎鹅体重和体尺指标的测定及相关性分析
- 1引言广丰白翎鹅主产于江西省广丰县。属中型肉用鹅种,主食青饲料,耐粗饲,生长速度较快,肉质好,氨基酸总量及人体必需氨基酸含量较高,有"青草换肥鹅"之称。本研究测定了广丰白翎鹅的体重和体尺性状,对体重、体尺指标进行相关性分...
- 俞钦明李欣钰邱晓辉何娇娇刘六香兰旅涛
- 关键词：体重体尺性状
- 文献传递
- 斑嘴鸭线粒体全基因组序列测定及分析被引量：3
- 2015年
- 根据斑嘴鸭(Anas poecilorhyncha)同属近缘物种绿头鸭(Anas platyrhynchos)线粒体基因组(mt DNA)序列设计引物,采用直接测序技术对斑嘴鸭mt DNA全序列进行综合分析。结果显示,斑嘴鸭mt DNA序列全长16 606 bp,包含22个tRNA、2个rRNA基因、13种蛋白质编码基因和1个D-loop区。碱基组成T为22.2%,C为32.8%,A为29.2%,G为15.8%,无明显的AT偏好性,22种tRNA都为典型的三叶草结构。参照棕头鸦(Larus brunnicephalus)、黑尾地鸦(Podoces hendersoni)的12S rRNA,对斑嘴鸭12S rRNA的二级结构进行预测,结果其含有4个结构域,37个茎环。对D-loop控制区序列分析发现含有goose hairpin,E-box,F-box,D-box,Bird similarity-box及CSB1-box。并以原鸡作为外群,采用N-J算法和ML算法,基于mt DNA全序列及D-loop区分别构建系统进化树,发现3个家鸭品种与绿头鸭亲源关系较近。
- 穆春宇黄正洋陈阳孙志明俞钦明苏雁辉富丽徐琪赵文明陈国宏
- 关键词：线粒体全基因组斑嘴鸭系统进化树
- 广丰白翎鹅体重与体尺性状指标主成分分析被引量：21
- 2012年
- 本研究测定了5.5月龄广丰白翎鹅体重与体尺性状指标,并进行了体重与体尺性状的主成分分析。结果表明,母鹅的体重与体斜长、龙骨长、胫围、跖长存在极显著相关(P<0.01),与其他各体尺指标均无显著相关性;公鹅的体重与体斜长、龙骨长、胫围、半潜水长、跖长、骨盆宽、胸宽存在极显著相关(P<0.01),与颈长显著相关(P<0.05)。从主成分的特征根和贡献率来看,第Ⅰ主成分主要反映体型外貌特征,第Ⅱ主成分主要反映体躯特征,第Ⅲ主成分主要反映颈部特征,第Ⅳ、第Ⅴ主成分主要反映胸部特征。广丰白翎鹅的体重和大部分体尺性状有显著相关关系,因此主成分分析指标对广丰白翎鹅的选种选育具有重要的意义。
- 李欣钰邱晓辉陈昌义俞钦明刘六香兰旅涛
- 关键词：体重体尺指标主成分分析
- 鸭CYP7α1基因原核表达载体的构建及蛋白诱导表达
- 2013年
- 本研究旨在构建鸭重组表达载体pET32a-CYP7α1,获取其融合蛋白,为开展鸭CYP7α1蛋白在脂类代谢中作用的深入研究提供基础。试验以樱桃谷鸭为材料,通过克隆获得CYP7α1基因的ORF序列,并连接至原核表达载体pET32a中,构建了重组表达载体pET32a-CYP7α1,转入表达宿主Rossetta-gam(iDE3)进行诱导表达。结果表明CYP7α1基因ORF区共编码512个氨基酸,SDS-PAGE电泳分析表明,重组蛋白大小约为59 ku,其主要以包涵体的形式存在,其最佳诱导条件为温度37℃,时间4 h,IPTG浓度0.6 mmol/L。
- 俞钦明甄霆陈昌义李欣钰陈阳张扬徐琪兰旅涛陈国宏
- 关键词：原核表达
- 急性噪声应激对肉鸭血液指标和肉品质的影响被引量：4
- 2013年
- 本试验旨在研究不同强度的噪声应激对北京鸭血液指标和肉品质的影响。将42日龄北京鸭60只,随机分为3组,每组2个重复,每个重复10只鸭。组1:对照组;组2:80 db噪声应激20 min;组3:100 db噪声应激20 min。应激后进行血液指标和肉品质检测,结果表明:组2、组3的T3、T4水平都极显著低于对照组(P<0.01);组2的ALT、CK、AST、和GSH-Px水平有所上升,但与对照组差异不显著(P>0.05);组3的ALT和AST水平极显著高于组1、组2(P<0.01),CK水平极显著高于组1(P<0.01);GSH-Px水平显著高于组1、组2(P<0.05);组3的INS水平均极显著高于(P<0.01)组1;3组之间胸肌水分含量和脂肪含量差异不显著(P>0.05),组3胸肌蛋白含量与组1差异极显著(P<0.01),组2和组3pH都极显著低于对照组(P<0.05),组2、组3的胸肌MDA和蛋白质羰基含量升高且差异极显著(P<0.01)。因此,急性噪声应激会在一定程度上影响肉鸭血液指标和肌肉品质,增加应激水平。
- 朱振张扬陈阳童一宇俞钦明段修军徐琪陈国宏
- 关键词：血液指标肉品质肉鸭
- 鸭ALB基因过表达载体的构建及对相关基因表达的影响
- 童一宇陈阳徐琪朱振俞钦明张扬黄正洋陈国宏
- 关键词：过表达ALBRT-QPCR
