冯春琼 作品数:36 被引量:239 H指数:9 供职机构: 南方医科大学基础医学院基因工程研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 广州市重大科技攻关项目 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 文化科学 更多>>
双语教学效果评估 被引量:5 2007年 通过课前问卷调查,考试后成绩分析及课程结束后的经验交流,对在生物化学和分子生物学学科中开展双语教学试点工作进行评估,为以后全面开展双语教学提供经验和指导。 冯春琼 马文丽关键词:双语教学 基于生物信息学的激素非依赖型前列腺癌的治疗药物筛选 被引量:3 2010年 目的筛选雄激素非依赖型前列腺癌(AIPC)新的潜在治疗药物。方法通过FACTA工具从PubMed找出前列腺癌的相关基因进行分类,利用Connectivity Map、DrugBank、ToppGene等生物信息学在线工具筛选出AIPC潜在治疗药物并进行初步验证。结果生物信息学筛选出一些对AIPC潜在的治疗药物,其中包括thioridazine(甲硫达嗪)、novobiocin(新生霉素),并通过实验证实了新生霉素对前列腺癌PC-3细胞的抑制作用并通过生物信息学探讨其可能机制。结论通过生物信息学对雄激素非依赖型前列腺癌差异表达基因的挖掘及药物筛选,是一种合理的药物筛选方法。 李铁求 冯春琼 邹亚光 周期赵 梁爽 毛向明关键词:生物信息学 前列腺肿瘤 新生霉素 弱精子症患者精子线粒体MTCYB、MTATP6基因的检测 被引量:14 2008年 目的:探讨精子线粒体MTCYB、MTATP6基因突变与弱精子症的关系。方法:提取80例成年男性弱精子症和20例活力正常者的精子mtDNA,设计PCR引物并扩增MTCYB、MTATP6基因,PCR产物纯化后进行序列测定和BLAST序列比对。结果:在80例弱精子症样本中有60例同时扩增出MTCYB、MTATP6片段,16例仅扩增出MTATP6片段,4例仅扩增出MTCYB片段。在20例精子活力正常的样本中均同时扩增出MTCYB、MTATP6片段。弱精子症样本中MTCYB和MTATP6基因的缺失率分别为20%和5%。扩增片断的序列分析发现,在弱精子症样本中,MTATP6基因出现G8887A的点突变,突变率为20%,而MTCYB基因未见有规律的突变。精子活力正常的样本中MTCYB、MTATP6基因未检测到明显的点突变。结论:精子线粒体MTCYB和MTATP6的基因缺失以及MTATP6基因的G8887A突变可能影响成年男性的精子活力。 冯春琼 宋艳斌 邹亚光 毛向明关键词:弱精子症 突变 精子质量与形态学分析及其关系 被引量:26 2009年 目的:探讨精子质量与形态学的临床应用价值及其关系。方法:248份精液标本按WHO标准进行精液常规分析,应用计算机辅助精液分析(CASA)分析精子密度、活力、活率以及动态参数;采用WHO推荐的Diff-Quik快速染色方法对精子形态进行染色;采用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果:248份精子质量分析中,精子活力不足占74.6%,精子活力正常占25.4%,少精症占5.6%,少弱精症占4.8%,正常精液占24.6%;248份精子形态学分析中,形态正常精液占73.4%,畸形精子症占26.6%。精子活力和活率与形态正常精子百分率呈显著性正相关(r=0.52,r=0.53,P<0.01);各运动参数和精子密度也与形态正常精子百分率呈显著性正相关(P<0.01)。精子活力正常组形态正常精子百分率明显高于精子活力低下组(P<0.01)。结论:精子活力不足和畸形精子症是导致男性不育的主要原因,精子形态与精子活力、活率、密度和运动参数有密切关系,精子质量和形态学分析在临床男性不育的诊断中具有重要作用。 周其赵 陈思梅 冯春琼 邹亚光 孙德华 李铁求 李飞 毛向明关键词:精子形态 精子活力 精子密度 芯片杂交中荧光标记样品定量与非定量的比较研究 2002年 比较在芯片杂交中 ,荧光标记样品定量与非定量对杂交结果的影响。其方法是 ,提取经As2 O3 作用K5 6 2细胞前后的总RNA ,逆转录成cDNA第一链 ,并分别用Cy3/Cy5标记。标记后的样品再次定量或不定量 ,但均取相同体积上样与K5 6 2芯片杂交 ,用扫描仪扫描并分析。其结果 ,标记后样品定量与不定量杂交的结果都与理论推测一致 ,但以样品定量进行杂交的效果更好 ,标记样品杂交前再次定量的 ,分析发现 2个基因表达下调 ;杂交前不定量仅取相同体积进行杂交的 ,发现 6个基因片段表达下调 ,其中只有 2个基因与细胞凋亡通路密切相关。认为在芯片的杂交检测中 ,对荧光标记样品杂交前再次定量可大大提高杂交结果的可靠性。 冯春琼 马文丽 李凌 宋艳斌 石嵘 吴清华 郭秋野 郑文岭关键词:荧光标记 AS2O3 K562细胞 杂交 总RNA 基因片段 消减杂交技术结合限制性显示技术制备K562细胞特异基因探针 2005年 建立一种简便、快速、特异的制备基因芯片探针的方法.以K 562细胞和正常人淋巴细胞作为消减对象,利用自行建立的消减方法进行消减杂交,结合限制性显示技术,分组扩增差异cD N A,回收K 562细胞特异基因片段,制作基因芯片探针.结果显示,分离到400个K 562特异的基因,片段大小均一,适于制作cD N A芯片.消减杂交技术结合限制性显示技术制备基因芯片探针,具有快速、简便、特异的特点,降低了芯片制作成本,可加速芯片的推广应用. 宋艳斌 马文丽 冯春琼 石嵘 毛向明 张宝 郑文岭关键词:K562细胞 消减杂交 限制性显示技术 基因探针 松胞素B对白血病K562细胞基因表达谱的影响 2003年 背景与目的:近年来兴起的DNA芯片技术能在一次杂交中同时监测数以千计的基因表达,能大大加速肿瘤药物作用机制的研究和药物治疗靶点的发现。本研究的目的是利用基因表达谱芯片研究松胞素B(cytochalasinB,CB,旧称细胞松弛素B)对白血病K562细胞基因表达谱的影响。方法:利用限制性显示RCR(restrictiondisplayPCR,RD-PCR)技术扩增K562细胞cDNA片段,取其中277个cDNA片段按设计的矩阵打印在玻片上,制成基因芯片;用CB处理K562细胞24h,分别提取对照组和处理组细胞总RNA,将两组等量的细胞总RNA纯化为mRNA,反转录为cDNA,利用RD-PCR技术进行扩增标记;与芯片杂交后扫描分析处理前后表达差异的基因。结果:在所收集的探针中,对照组和处理组细胞间存在差异表达的基因。共筛选到CB处理后表达下调的基因18条。结论:CB诱导后的K562细胞部份基因表达呈下调趋势,其中大部分基因与细胞增殖、信号转导、转录调节相关。 危敏 马文丽 宋艳斌 冯春琼 石嵘 郭秋野 郑文岭关键词:基因芯片 K562 基因 应用基因芯片研究As_2O_3诱导K562细胞前后差异表达基因 2006年 目的研究三氧化二砷(As2O3)处理K562细胞前后,基因表达的变化。方法提取As2O3作用K562细胞前后的总RNA,逆转录成cDNA并用Cy3标记对照组,Cy5标记处理组,与自制的包含162个cDNA片段的K562芯片杂交。结果K562细胞经As2O3作用后,162个基因片段的表达都有所降低,其中25个基因片段的表达降低较为显著(Cy5/Cy3<0.5)。这些表达下调的基因片段包括转导因子、代谢酶、信号通路蛋白、激酶等,有6个差异表达基因与细胞的凋亡通路密切相关。As2O3可能通过抑制胰岛素样生长因子的功能,诱导细胞凋亡。结论应用自制的基因芯片筛选到了As2O3诱导K562细胞前后差异表达的基因,主要与细胞凋亡密切相关。 郭秋野 马文丽 冯春琼 吴清华 彭翼飞 郑文岭关键词:基因芯片 三氧化二砷 凋亡 差异表达基因 基于文献挖掘的雄激素非依赖型前列腺癌特异表达基因的生物信息学分析 被引量:5 2009年 目的:比较雄激素依赖型与非依赖型前列腺癌的基因表达差异,加深对雄激素非依赖型前列腺癌形成的分子机制的认识,为前列腺癌防治找到新的有效手段。方法:通过FACTA工具从PubMed找出前列腺癌的相关基因进行分类,利用GATHER、PANTHER、STRING和ToppGene等在线工具对雄激素非依赖型前列腺癌特异表达基因进行生物信息学分析。结果:筛选雄激素非依赖型前列腺癌特异基因128个,这些特异表达基因在细胞信号转导、凋亡、肿瘤生成、细胞粘附、细胞增殖和分化等生物学过程起着重要作用。结论:通过生物信息学对雄激素非依赖型前列腺癌特异表达基因的挖掘发现,MMP9、EGFR、MMP2、ADM、MIF、IGFBP3、IL2、MET、BAD、RHOA、SPP1、EP300、SMAD3、RAF1、PTK2、TGFB2等基因在雄激素依赖型转变成非依赖型前列腺癌中可能起着重要作用。 李铁求 冯春琼 邹亚光 石嵘 梁爽 毛向明关键词:生物信息学 前列腺癌 雄激素非依赖 特异基因 弱精子症患者精子中CRISP2基因及蛋白的初步研究 被引量:9 2011年 目的:探讨弱精子症患者精子中富含半胱氨酸的分泌蛋白2(CRISP2)mRNA及蛋白的表达水平,探讨其与精子活力的关系及相关的分子机制。方法:收集成年男性弱精子症患者精液78例,活力正常精液70例作为对照组,50% Percoll离心分离纯化后,提取精子总RNA及总蛋白,采用RT-PCR,SYBR Green实时定量PCR和Western印迹技术检测CRISP2 mRNA及蛋白相对表达量。结果:CRISP2基因在弱精子症患者精子中的表达量明显低于其在正常对照组精子中的表达量,下降达4.3倍;Western印迹发现CRISP2蛋白在弱精子症组较正常对照组下降达1.71倍,两组之间的表达量有明显的统计学差异(P<0.05)。结论:CRISP2基因及蛋白在弱精子症患者精子中的表达下调可能与精子活力下降有密切联系,提示CRISP2基因及蛋白可能成为弱精子症发病机制研究的一个分子靶标。 景晓玮 邢荣威 周其赵 余庆锋 郭文彬 陈思梅 褚庆军 冯春琼 毛向明关键词:精子 实时定量PCR 免疫印迹 弱精子症