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凌文

作品数：6 被引量：2H指数：1
供职机构：南京师范大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域：生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 4篇专利
  • 1篇期刊文章
  • 1篇学位论文

领域

  • 2篇生物学

主题

  • 4篇基因
  • 2篇融合标签
  • 2篇同源
  • 2篇目的蛋白
  • 2篇抗性
  • 2篇克隆
  • 2篇杆菌
  • 2篇BET
  • 2篇大肠杆菌
  • 1篇单胞菌
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白表达
  • 1篇性基因
  • 1篇糖苷
  • 1篇同源重组
  • 1篇铜绿
  • 1篇铜绿假单胞
  • 1篇铜绿假单胞菌
  • 1篇突变
  • 1篇突变位点

机构

  • 6篇南京师范大学

作者

  • 6篇凌文
  • 5篇尚广东
  • 3篇骆希
  • 2篇张青
  • 2篇石牡丹
  • 2篇杨瑶
  • 1篇李玲

传媒

  • 1篇南京师大学报...

年份

  • 2篇2015
  • 3篇2014
  • 1篇2013
共 6 条 记 录，以下是 1-6
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排序方式：
重组酶基因bet作为一种大肠杆菌异源蛋白表达融合标签的应用
本发明涉及一种将来源于lambda噬菌体的重组酶基因bet作为融合标签的方法。本方法是将来源于lambda噬菌体的重组酶基因bet作为融合标签。将六个组氨酸、bet基因、TEV酶切位点和一段填充片段等元件的核苷酸序列克隆...
尚广东凌文张青骆希杨瑶
文献传递
新型融合表达标签的克隆和假单胞菌重组工程载体的构建
绝大多数外源基因在大肠杆菌表达系统中是不可溶或者以无生物活性的包涵体形式存在,当前通过融合表达的策略是提高外源蛋白可溶性的有效方法之一。蛋白标签是指利用DNA体外重组技术,与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或者蛋白,以便于...
凌文
关键词：同源重组基因敲除
文献传递
重组工程介导的谷氨酸棒杆菌ATCC 13032的基因敲除方法
本发明涉及一种重组工程介导的谷氨酸棒杆菌ATCC？13032基因敲除方法。具体实施步骤是通过聚合酶链式反应扩增获得两侧为针对待敲除基因的500bp同源序列、中间为卡那霉素抗性基因的DNA片段。将此DNA片段电转化至由异丙...
尚广东骆希凌文
文献传递
基于基因组的TEV蛋白酶的高表达被引量：1
2014年
TEV蛋白酶由于其高酶切活性、酶切位点的专一性和酶切条件的宽容性而在蛋白分离和蛋白质组学研究等领域有着广泛的应用.目前获得TEV蛋白酶的方法是将克隆在质粒上的TEV基因在大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中实现过表达.但本方法有一定缺点,如需使用抗生素,这就可能在后续的纯化中引入杂质,菌株群体中不均一性而降低产量等.本研究通过重组工程方法将受T7强启动子驱动的,与麦芽糖结合蛋白MBP融合的TEV蛋白酶基因整合至BL21(DE3)的基因组上进行过表达.MBP-TEV在细胞内自剪切获得分离的TEV.NiNTA亲和层析得到纯化的TEV,产量可达4.2 mg/L.所分离的TEV表达出良好的酶切活性.本菌株有着以之大规模获得TEV的潜力,所建立的通过重组工程将外源基因整合至BL21(DE3)基因组的进行表达的方法也可成为通用的平台技术.
李玲凌文石牡丹尚广东
关键词：基于基因组TEV蛋白表达
重组工程介导的定点突变方法
本发明涉及一种基于重组工程的定点突变的方法。本方法是先通过重叠－延伸聚合酶链式反应获得一个含有与克隆在质粒上的待突变靶位点上游50bp序列一致的左端50bp同源臂、突变位点、靶基因突变位点的下游片段、与质粒所含的抗性基因...
尚广东樊丹凌文石牡丹
文献传递
重组酶基因bet作为一种大肠杆菌异源蛋白表达融合标签的应用
本发明涉及一种将来源于lambda噬菌体的重组酶基因bet作为融合标签的方法。本方法是将来源于lambda噬菌体的重组酶基因bet作为融合标签。将六个组氨酸、bet基因、TEV酶切位点和一段填充片段等元件的核苷酸序列克隆...
尚广东凌文张青骆希杨瑶
文献传递
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