刘力华
- 作品数：76 被引量：165H指数：6
- 供职机构：吉林大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学经济管理政治法律更多>>
- 人白细胞介素18(hIL-18)的纯化及生物学活性的鉴定被引量：5
- 2004年
- 目的 :在大肠杆菌中高效表达重组人IL 18(rhIL 18)蛋白 ,制备具有高纯度、高活性的rhIL 18。方法 :用IPTG诱导重组蛋白表达载体pKK2 2 3 3 hIL 18进行蛋白表达 ;菌体经超声破碎分离包含体 ,并对包含体进行洗涤、变性和复性处理 ,用DEAE SepharoseCL 6B阴离子交换柱纯化复性的rhIL 18;以人外周血单核淋巴细胞 ,通过T细胞增殖实验、1 2 5I UdR标记的细胞毒实验、ELISA方法检测细胞因子的产生量等方法 ,测定rhIL 18的生物学活性。结果 :在大肠杆菌中成功地诱导、表达了rhIL 18,SDS PAGE凝胶电泳分离显示在分子量大约 18 3kD处有一诱导蛋白带 ,Westernblot证明表达产物与抗IL 18单克隆抗体有特异性免疫反应 ;表达产物经纯化后纯度达 94 % ;表达的rhIL 18蛋白具有促进T细胞增殖、增强NK细胞细胞毒作用及诱导外周血单核淋巴细胞合成IFN γ的能力 ,基本上具有天然IL 18相同的生物学活性。结论 :为rhIL 18的获得及为进一步研究其生物学功能提供了一定的条件 ,并为将rhIL 18用于肿瘤的免疫生物治疗奠定了基础。
- 杨广民方艳秋谭岩刘力华
- 关键词：凝胶过滤T细胞NK细胞细胞因子
- 新疆紫草素抗肝癌的研究被引量：13
- 2007年
- 王雪宝王英丽张阳刘力华
- P-糖蛋白的免疫斑点定量分析
- 2006年
- 目的:建立改良的斑点酶联免疫吸附分析,用于膜表达抗原P-gp的血清学鉴定。方法:常规筛选m dr-1稳定表达的K 562细胞系;免疫组化和阿霉素抗性鉴定。细胞固相化于圆形硝纤膜纸片,BSA和H2O2封闭。纸片置入EL ISA测量井;按照ABC-EL ISA程序测定m dr-1基因疫苗免疫小鼠血清抗P-gp的滴度。结果:免疫组化显示稳定表达m dr-1的K 562细胞系膜P-gp阳性率近100%,阿霉素IC50较之对照细胞提高100%。斑点酶联免疫吸附分析中,全部对照血清OD450<0.1(1∶2 000);而m dr-1基因疫苗免疫的血清(1∶2 000)OD450均>0.496;平行样的变异系数微小。结论:改良的免疫斑点方法可作为测量细胞表达抗原之快速、敏感的测量方法,用于特异性抗体的大样本筛选。
- 闫光志所剑刘力华
- 关键词：免疫印迹法
- ALB<Sub>SIN</Sub>/IL－18<Sub>MAT</Sub>杂交细胞因子
- ALB<Sub>SIN</Sub>是人血清白蛋白的信号肽，IL－18<Sub>MAT</Sub>为人IL－18的成熟肽。本发明采用基因重建方法，获得ALB<Sub>SIN</Sub>与IL－18<Sub>MAT</Sub...
- 谭岩刘力华方艳秋段秀梅许淑芬姜艳芳宋艳刘玲丽时阳
- 文献传递
- 重组人β_2糖蛋白1第一结构域对抗磷脂抗体综合征患者血清诱导人脐静脉内皮细胞产生ICAM-1、MCP-1的影响被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨重组人β2糖蛋白1第一结构域(hrβ2GPⅠDⅠ)对抗磷脂抗体综合征(APS)患者血清诱导人脐静脉内皮细胞产生细胞间黏附分子1(ICAM1)、单核细胞趋化蛋白1(MCP1)的影响。方法:应用hrβ2GPⅠDⅠ二聚体处理前后的APS患者血清分别与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共孵育,细胞ELISA和RTPCR方法分析处理前后HUVEC表达ICAM1、MCP1的变化。结果:hrβ2GPⅠDⅠ二聚体处理后的APS患者血清较处理前相比,与其孵育的HUVEC表达ICAM1、MCP1在蛋白和mRNA水平均明显降低。结论:hβ2GPⅠDⅠ可中和APS患者血清中的大部分致病性抗β2GPⅠ抗体(anti-β2GPⅠ)。
- 付嘉谭岩方艳秋徐立李明辉刘桂英姜艳芳段秀梅刘力华许淑芬
- 关键词：抗磷脂抗体综合征人脐静脉内皮细胞ICAM-1MCP-1
- HER-2/neu在乳腺癌血清中的表达及意义被引量：6
- 2007年
- 目的分析乳腺癌HER-2/neu表达水平并探讨其临床意义。方法用ELISA方法分析127例乳腺癌患者,30例良性疾病及40名健康体检者血清可溶性HER-2/neu水平并用免疫组化(IHC)方法分析乳腺癌组织切片中癌细胞的HER-2/neu染色。结果乳腺癌患者血清中可溶性HER-2/neu水平与正常对照和良性乳腺疾病相比,有显著性差异(P<0.05)。随TNM分期进展,乳腺癌患者可溶性HER-2/neu阳性率逐步升高。结论乳腺癌患者血清中可溶性HER-2/neu水平呈过度表达,而且与免疫组化结果呈正相关。
- 张阳付涛王英丽刘力华
- 关键词：乳腺肿瘤HER-2/NEUIHCELISA方法
- DHEA抑制大鼠转移性Morris肝癌的实验研究被引量：6
- 2004年
- 目的 :探讨去氢表雄酮 (DHEA)的体内抗癌作用及其机制。方法 :Buffalo大鼠 2 1只随机分为空白对照组 (n=5 ) ;肿瘤对照组 (把 Morris肝细胞瘤移植到大鼠的两肋皮下 ,建立 Morris肝细胞瘤移植的 Buffalo大鼠的体内模型 ) ,喂养基础饲料 (n=6 )、DHEA肿瘤组 (建立 Morris肝细胞瘤移植模型后 ,在喂养的基础饲料中添加 DHEA) (n=6 )和去氢表雄酮硫酸酯 (DHEA- s)肿瘤组 (建立 Morris肝细胞瘤移植模型后 ,在喂养的基础饲料中添加 DHEA - s) (n=4 )。分别喂养 4周后 ,应用流式细胞术检测大鼠的免疫功能 ,应用磁场型高分解能质量分析仪 (GC/ MS)方法测定大鼠体内类固醇的含量 ,采用免疫组化方法染色检测磷酸化的磷酸酶和张力蛋白同源物基因 (PTEN )蛋白表达 ,同时测定其对大鼠的毒副作用。结果 :DHEA肿瘤组的瘤重量 [(8.31± 0 .6 1) g]较肿瘤对照组 [(14 .5 7± 0 .5 6 ) g]显著减小 ,抑制率达到 4 3%。免疫组织化学染色显示 DHEA肿瘤组的磷酸化PTEN蛋白表达量增加 ,同时提高了 CD3、CD4阳性细胞百分率及 CD4 + / CD8+比值 ,与肿瘤对照组相比差异有显著性 (P<0 .0 5 )。 DHEA肿瘤组的胆固醇、甘油三脂及高密度脂蛋白的含量与空白对照组相比差异无显著性 ,未见其有毒副作用。结论 :DHEA对肿瘤具有明显的抑制作?
- 姜艳芳谭岩赵平伟刘力华方艳秋段秀梅松崎静司
- 关键词：去氢表雄酮肝肿瘤肿瘤抑制
- 流式细胞术检测细胞毒方法的建立被引量：17
- 2004年
- 目的 :建立一种用流式细胞仪测定细胞介导细胞毒活性的方法。方法 :用羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记靶细胞 ,再用碘化丙碇 (PI)标记DNA筛选细胞膜已破坏的靶细胞。效靶比为 10 0∶1～ 6 2 5∶1,共孵育时间为 1～ 6小时 ,流式细胞仪收集 10 0 0个靶细胞并测定被杀细胞的百分率。结果 :CFSE是合适的标记靶细胞的荧光染料 ,18小时后也能很好地区分效靶细胞 ;靶细胞的自然死亡率低于 5 % ;杀伤百分率随着效靶比和共孵育时间的增加而增加。最佳效靶比为5 0∶1～ 2 5∶1,共孵育时间为 2～ 4小时。结论 :CFSE PI双荧光染料标记的流式细胞分析检测细胞毒具有多个优点 :避免放射性试剂的应用 ,敏感性增强 ,单细胞水平的分析。
- 王晓祺谭岩段秀梅刘玲丽方艳秋姜艳芳许淑芬刘力华
- 关键词：靶细胞细胞毒CFSE流式细胞术百分率自然死亡
- 多药耐药基因的研究现况及应用
- 2003年
- 肿瘤细胞对多种细胞毒药物的拮抗性是影响肿瘤化疗的主要障碍.它是以肿瘤细胞对亲脂性细胞毒药物,包括各种植物碱类抗肿瘤药物的交叉拮抗为特征,可分为天然性和获得性耐药,区别在于后者是在化疗过程中诱导的对一种抗肿瘤药物产生耐药后,同时对其他不相关非同类药物亦产生耐药性,即多耐药性(multidrug resistance,MDR).MDR的产生机制复杂,常见原因是P-糖蛋白(Pgp)的超表达.
- 安立彬谭岩刘力华
- 关键词：多药耐药基因肿瘤细胞化疗拮抗性
- MAGE-1基因疫苗的构建及其免疫学活性的研究被引量：1
- 2005年
- 目的制备MAGE-1基因疫苗,观察该疫苗诱导小鼠脾脏的抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞CTL活性及产生特异性抗体的影响。方法应用基因重组技术,构建基因疫苗pcMAGE-1;转染HEK293细胞;RT-PCR及Western blot检测MAGE-1mRNA及蛋白的表达;pcMAGE-1免疫3次BALB/c小鼠,末次免疫后7日收集血清及脾细胞。流式细胞术检测血清中抗MA-GE-1多抗的产生,MTT法检测小鼠CTL杀伤活性。结果构建的pcMAGE-1转染HEK293细胞,RT-PCR表明在mRNA水平有MAGE-1的表达;Western blot显示表达产物46kD,与预期一致。基因疫苗免疫组小鼠血清MAGE-1抗体的产生增加,与SMMC-7721结合率显著高于对照组(P<0.05)。杀伤实验结果显示,免疫组小鼠脾细胞对SMMC-7721的杀伤率明显高于两个对照组(P<0.05)。结论成功地构建了MAGE-1基因疫苗,该疫苗能够有效地诱导特异性免疫应答。
- 太京华谭宪秋谭岩时阳刘力华方艳秋段秀梅姜艳芳
- 关键词：基因疫苗MAGE-1细胞亚群特异性抗体CTL
