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刘慧芳: 作品数：58 被引量：116H指数：7; 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>; 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>

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重排噬菌体E基因、含有该基因的打孔质粒载体及其应用: 本发明公开了一种经基因重排后获得的PhiX174噬菌体mE基因以及含有该基因的打孔质粒载体及其构建方法，本发明还进一步涉及该孔质粒载体在制备菌蜕中的用途，属于基因工程领域。本发明利用基因重排技术，对PhiX174噬菌体E...; 刘思国常月红刘慧芳王春来彭伟司薇; 文献传递

牛抗菌肽Bac7-Bac5融合基因在大肠杆菌中的过表达,纯化及抑菌活性被引量：14: 2007年; 牛抗菌肽Bac7和Bac5是一种线性阳离子小分子多肽,在机体天然免疫和获得性免疫中都发挥着重要作用。根据Gen bank中公布的牛抗菌肽bac7和bac5成熟肽基因序列,人工合成了融合基因Bac7-Bac5片段,克隆于原核表达载体pET32(a+)中构建了重组表达载体pET-B7-B5,将其转化于E.coli BL21(DE3)中实现了重组蛋白B7-B5(rB7-B5)的过表达,表达的rB7-B5以包涵体形式存在,rB7-B5表达量约占细菌总蛋白的36.6%,分子量大小为33kDa,与预测大小相符。以8mol/L尿素变性包含体后用Ni亲和层析柱纯化目的蛋白,经多步透析法复性的rB7-B5对猪胸膜肺炎放线杆菌和耐药性大肠杆菌具有很好的抑菌活性,为新型抗菌制剂的研制和开发奠定了基础。; 赵昆刘思国王春来宫强迟磊刘建东王勇云孟克常月红刘慧芳周媛媛孙延鸣; 关键词：融合基因抑菌活性

减毒沙门氏菌及其应用: 本发明公开了减毒沙门氏菌及其应用。本发明应用基因敲除技术，删除掉沙门氏菌(Salmonella pullorum)的体内定植基因和主要毒力基因，获得了双基因缺失的减毒沙门氏菌SM091-DED株，其微生物保藏号是：CGM...; 刘思国刘慧芳王秀梅于申业王牟平司薇杨志; 文献传递

胎儿弯杆菌表面蛋白(SapA)基因的分段表达及其免疫原性分析: 应用PCR方法扩增出胎儿弯杆菌表面蛋白基因(SapA)的2个基因片段SapA-N(1398 bp)和SapA-C(1422bp),采用DNA重组技术,将2个基因片段分别连于表达载体pET32a(+),并在大肠杆菌中诱导表...; 赵海玲刘思国刘慧芳王春来司微杜艳芬杨金国林靖凯; 关键词：原核表达纯化 ELISA; 文献传递

牛分枝杆菌三价组合及融合DNA疫苗免疫效果的研究被引量：3: 2008年; 分泌性蛋白Ag85B、MPB64和ESAT-6为Mycobacterium bovis的主要保护性抗原,在诱导机体免疫反应和抵抗感染中发挥重要作用。本研究以pcDNA3.1(+)为载体,构建了由上述3种抗原基因构成的不同疫苗:3基因融合(pcDNA-MPB64-Ag85B-ESAT-6,pCMAE)DNA疫苗和三价(pcDNA-Ag85B+pcDNA-MPB64+pcDNA-ESAT-6)DNA疫苗,评价各种DNA疫苗诱导的体液免疫、细胞免疫及以BCG攻毒后的免疫保护水平。试验结果表明,多基因融合DNA疫苗免疫后的小鼠血清抗体水平、淋巴细胞增殖(SI值)、gamma interferon(IFN-γ)和interleukin-2(IL-2)水平明显高于其他各组(P<0.05),攻毒保护效果也优于多价DNA疫苗,达到了BCG疫苗的免疫保护水平,表明本研究制备的融合DNA疫苗具有良好的应用前景。; 宫强刘思国王春来王勇刘建东刘慧芳施远祥阿曼古丽李发斌孔宪刚; 关键词：牛分枝杆菌多价DNA疫苗

猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型抑制消减杂交文库的构建和分析被引量：4: 2007年; 为了研究猪传染性胸膜肺炎放线杆菌（APP）不同血清型之间的差异表达基因,采用抑制消减杂交（SSH）法,以APP血清7型DNA作为测试方（Tester）、APP血清1型DNA作为驱动方（Driver）,进行2轮杂交和2轮选择PCR扩增,将PCR扩增产物连接pMD18-T载体,筛选阳性克隆后进行测序和序列比对.结果显示,15个阳性克隆中的13个为已知序列,其同源性为88%～100%,2个为未知序列,其结构和功能还需进一步研究.首次构建了APP7的抑制消减杂交文库,为APP感染和致病机制的研究奠定了基础.; 王勇刘思国王春来宫强刘建东刘慧芳周媛媛常月红云孟克李广兴; 关键词：胸膜肺炎放线杆菌抑制消减杂交 DNA文库

重排噬菌体溶菌基因及其打孔载体和在制备疫苗中的应用: 本发明公开了重排噬菌体溶菌基因及其打孔载体和在制备疫苗中的应用。本发明重排噬菌体溶菌基因的核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示。将本发明重排噬菌体溶菌基因可操作的与原核表达载体相连即得到高效打孔载体；将该打孔载体转化到...; 刘思国常月红彭伟刘慧芳王春来司微; 文献传递

利用体内诱导抗原技术检测胸膜肺炎放线杆菌体内表达基因: 本研究利用体内诱导抗原技术(IVIAT)对胸膜肺炎放线杆菌(APP)体内表达的基因进行了研究。.将收集到的5份感染了APP1的猪血清混合,分别吸附体外培养的APP1和大肠杆菌DE3的全菌及全菌; 刘慧芳刘思国王春来司微王聃杜艳芬赫明雷常月红; 文献传递

牛分枝杆菌Spoligotyping和VNTR-MIRU的基因分型研究: 为了探讨间隔区寡核苷酸分型(Spacer oligotyping,Spoligotyping)和数目可变串联重复序列-结核分枝杆菌散在分布重复单元(variable number tandem repeats-mycob...; 杜艳芬林靖凯刘思国王春来刘慧芳司微王聃赵海玲; 关键词：牛分枝杆菌 SPOLIGOTYPING VNTR 基因分型; 文献传递