刘戟
- 作品数：63 被引量：308H指数：9
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- 人21.5kDa MBP基因对肝癌HepG-2细胞增殖与凋亡作用研究
- 2009年
- 目的探讨人21.5kDa髓鞘碱性蛋白(MBP)对肝癌HepG-2细胞增殖与凋亡的影响。方法用含21.5kDa MBP基因的pSVCEP-MBP-CAT质粒转染肝癌细胞(HepG-2),设空质粒转染为对照组,用RT-PCR、Western blot杂交检测转染效果,后以H2O2处理上述细胞,通过MTT测定细胞增殖曲线,DNA琼脂糖电泳、免疫细胞化学分析、彗星电泳、TUNEL原位杂交等多种方法检测凋亡及相关蛋白的表达情况。结果人21.5kDa MBP基因在肝癌HepG-2细胞转染成功,MTT测定细胞增殖曲线显示阳性转染组细胞有增殖和抗凋亡的作用,DNA琼脂糖电泳显示对照组有大量的DAN ladder形成,Caspase-3免疫组化证实对照组细胞Caspase-3表达显著升高,彗星电泳和TUNEL原位杂交显示对照组DNA损伤及凋亡严重而转染组较轻。结论人21.5kDa MBP对肝癌HepG-2细胞有促进增殖和抗凋亡的作用。
- 潘虹任思冲何宣霖尉艳霞王若菡杨荫刘戟
- 关键词：髓鞘碱性蛋白凋亡HEPG-2转染彗星电泳
- Sirt1基因shRNA干扰载体构建及其对细胞增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2011年
- 本实验目的在于构建Sirt1 shRNA干扰载体,探讨Sirt1对HepG2、A549和293T细胞增殖和凋亡的影响。设计并合成Sirt1的shRNA序列,重组到pGenesil-1.0质粒载体中筛选出pGenesil-1.0-Sirt1阳性克隆并测序。将构建好载体转染HepG2、A549和293T细胞,用RT-PCR、Western blot检测各细胞中Sirt1表达水平,MTT测细胞增殖活性,加入阿霉素处理三组细胞后,用MTT检测细胞凋亡情况。结果表明成功构建Sirt1 shRNA干扰载体,各细胞株中Sirt1表达水平明显下降,Sirt1 shRNA克隆细胞株增殖能力降低,阿霉素处理后,各细胞株抗凋亡能力明显减弱,Sirt1在维持细胞增殖及抗细胞DNA损伤凋亡方面发挥重要作用,为进一步研究提供理论依据。
- 杜文婷任思冲所起凤杨鸣鸣何丹刘戟
- 关键词：细胞增殖细胞凋亡
- 过表达miR-18a靶向ATM对结肠癌细胞增殖和迁移的影响
- 2016年
- 目的研究miR-18a通过靶基因共济失调-毛细血管扩张突变基因(ataxia telangiectasia mutated gene,ATM)调控结肠癌细胞的生物学特性。方法通过软件预测miR-18a其中一个靶基因。设计合成miR-18a的模拟剂(mimics)和抑制剂(inhibitor),通过转染不同组分上调或下调内源性miR-18a在结肠癌细胞株HCT116中的表达。采用实时荧光定量(qRT)-PCR、Western blot、MTT法、克隆形成实验、Transwell等方法,检测过表达miR-18a调控ATM基因的表达对体外结肠癌细胞增殖及迁移能力的影响。结果软件预测发现miR-18a的其中一个靶基因是ATM。通过瞬时转染,过表达内源性miR-18a,可降低HCT116细胞内靶基因ATM蛋白的表达水平。转染miR-18amimics后能够下调HCT116细胞的增殖活力,同时显著降低HCT116细胞的克隆形成能力、横向迁移能力及纵向侵袭能力,以上各项改变均与miR-18a过表达有关。结论证实了miR-18a通过负向调控ATM的表达,抑制结肠癌细胞HCT116的增殖和迁移能力。
- 刘明佳陈利弘胡开锋杨晓龙董婧颖刘戟
- 关键词：ATM迁移结肠癌细胞HCT116
- 抗人脑髓鞘碱性蛋白单克隆抗体的制备及初步鉴定
- 2003年
- 陈建业刘戟王若菡陈俊杰
- 关键词：单克隆抗体杂交瘤细胞株
- 食管鳞癌中miRNA224调控RKIP基因表达及miRNA224基因启动子区甲基化的研究
- 2016年
- 目的研究食管鳞癌组织中Raf激酶抑制蛋白(RKIP)、miRNA224表达情况,miRNA224对RKIP的靶向作用,以及miRNA224基因上游启动子区甲基化水平。方法在食管鳞癌组织及癌旁对照组织临床标本中,用免疫组化法检测RKIP蛋白的表达;用荧光定量PCR法检测miRNA224的表达,荧光素酶报告基因检测miRNA224对RKIP的靶向作用;亚硫酸氰盐测序PCR(BSP)法检测食管鳞癌及癌旁对照组织miRNA224基因上游启动子区甲基化水平。结果在食管鳞癌组织中,RKIP低表达,miRNA224高表达;在癌旁对照组织中,RKIP高表达,miRNA224低表达。荧光素酶报告基因验证miRNA224可靶向抑制RKIP3′UTR表达。BSP法显示食管鳞癌组织miRNA224上游启动子区呈低甲基化状态,癌旁对照组织呈高甲基化状态。结论食管鳞癌组织RKIP表达下降、miRNA224基因启动子甲基化状态降低,miRNA224表达上升,RKIP是miRNA224下游作用的靶点,可能同食管鳞癌发生密切相关。
- 牛中喜杨晓龙刘明佳胡开锋陈利弘刘戟
- 关键词：RKIP食管鳞癌甲基化
- 青蒿素和槲皮素抑制新冠病毒刺突蛋白介导的细胞因子风暴
- 2023年
- 目的研究青蒿素和槲皮素的单独或联合治疗是否能改善新冠病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)的棘突蛋白(spike protein,S蛋白)介导的细胞因子风暴。方法进行细胞活力测定,而后检测青蒿素或槲皮素单独或联合处理对SARS-CoV-2的S蛋白介导的细胞因子风暴的改善作用。结果在SARS-CoV-2 S蛋白刺激下,青蒿素或槲皮素的单独或联合治疗可以通过抑制NFKB的过度激活来显著减轻细胞因子风暴。结论单独和联合使用青蒿素和槲皮素均能有效地抑制SARS-CoV-2 S蛋白介导的细胞因子风暴。
- 吴伟吴俊汐纪旭旭刘戟刘彬耿福昌
- 关键词：青蒿素槲皮素刺突蛋白
- 枸橼酸莫沙必利分散片溶出度的考察被引量：4
- 2004年
- 目的 考察枸橼酸莫沙必利分散片的溶出度。方法 采用小杯法 ,以 0 .1mol·L-1的盐酸为溶剂 ,测定分散片同一批号不同组次的溶出度 ,并与两种普通片比较。结果 分散片的溶出度均一性好 ,累积溶出百分率在 10min可达 90 %。结论 枸橼酸莫沙必利分散片的溶出速度比普通片快。
- 刘戟袁晓佳何勤
- 关键词：枸橼酸莫沙必利分散片溶出度消化道波长
- 载TK基因纳米粒在小鼠体内靶向性的研究被引量：4
- 2003年
- 采用液体闪烁计数方法研究 DNA- PL GA- NP在动物脏器中的分布 ,研究结果表明 ,小鼠尾静脉注射 32P- DNA- PL GA- NP后 30 min,肝脏的放射活性即达到总放射量的 70 %以上 ,是 32 P- DNA给药后肝脏分布量的 1.4倍 ,皮下给药 2 h后肝脏的放射活性也达到总放射量的 70 %以上 ,是 32 P- DNA给药后肝脏分布量的 1.
- 何勤刘戟张志荣张敏涂莉
- 关键词：纳米粒质粒DNA肝靶向性给药系统
- 前阳离子脂质体的构建及有关性质研究被引量：2
- 2007年
- 目的制备前阳离子脂质体并考察其相关性质。方法化学合成含二硫键的胆固醇衍生物(2-[[4-[(羟甲基)二硫]-1-亚氨丁基]氨基]乙基]氨基甲酸胆固醇酯,CHETA);薄膜分散-膜挤压法制备空白前阳离子脂质体;以鱼精蛋白缩合质粒DNA再与空白前阳离子脂质体作用,形成载基因前阳离子脂质体;粒度电位测定仪测定前阳离子脂质体的粒径和Zeta电位,电镜观察形态;考察在二硫键还原酶二硫苏糖醇的作用下前阳离子脂质体Zeta电位变化情况;以LacZ为报告基因转染HepG2细胞,X-gal原位染色定性观察,并定量测定β-半乳糖苷酶活性和总蛋白含量计算转染效率。结果前阳离子脂质体形态近似于球体,平均粒径为145.8 nm(PDI=0.086),Zeta电位为-33.83 mV,载基因前阳离子脂质体转染肝癌细胞HepG2转染效率为12.18 mU.mg-1protein,是裸质粒的10.5倍。结论二硫键修饰的前阳离子脂质体是具有发展潜力的非病毒载体。
- 钟志容邓勇刘戟张志荣宋庆国何勤
- 关键词：基因治疗二硫键转染效率
- 转铁蛋白修饰的载基因前阳离子脂质体制备及其表达研究被引量：6
- 2007年
- 本文制备、优化转铁蛋白修饰的前阳离子脂质体,并研究其相关性质。通过薄膜分散膜挤压法制备空白前阳离子脂质体;以鱼精蛋白缩合质粒DNA与空白前阳离子脂质体作用形成载基因前阳离子脂质体(PLPD);转铁蛋白(transferrin,Tf)再与PLPD作用形成转铁蛋白修饰的载基因前阳离子脂质体(Tf-PLPD);中心组合设计优化制备工艺;以lacZ为报告基因转染人肝癌细胞株HepG2;测定形态、粒径、电位和转染效率。结果显示,PLPD形态近似于球体,平均粒径为(228.9±8.0)nm,多分散指数为0.122±0.020(n=3);zeta电位为(-25.08±2.50)mV(n=3),转染效率(12.18±3.80)mU.mg-1(protein)。Tf-PLPD平均粒径为(240±12)nm,多分散指数为0.150±0.030(n=3);zeta电位为(-24.10±2.50)mV(n=3);转染效率(24.26±2.60)mU.mg-1(protein)是裸质粒的20倍;实验结果也表明血清的存在不影响PLPD和Tf-PLPD的转染效率;PLPD和Tf-PLPD小于阳离子脂质体LPD对人肝癌细胞HepG2,SMMC7721和张氏正常肝细胞3种细胞株的毒性。由此可见,转铁蛋白修饰的前阳离子脂质体作为基因转运的非病毒载体具有良好的应用前景。
- 钟志容刘戟邓勇张志荣宋庆国何勤
- 关键词：转铁蛋白转染效率
