刘海燕 作品数:51 被引量:253 H指数:11 供职机构: 广东医学院附属医院 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 湛江市科技攻关计划项目 广东省科技计划工业攻关项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 更多>>
斑马鱼心肌肌钙蛋白TNNT2a基因反义RNA探针的制备与鉴定 被引量:1 2015年 斑马鱼是一种新型的模式脊椎动物,其生长周期短,饲养成本低,幼体透明,近年来被广泛应用于心血管疾病的实验研究中。本实验旨在制作地高辛标记的斑马鱼心肌肌钙蛋白(danio rerio troponinTtype2a,TNNT2a)基因的反义RNA探针,通过斑马鱼整体原位杂交技术(Whole-mount in situhybridization,WISH)鉴定探针的灵敏度和特异性,为斑马鱼心血管疾病模型生化标志物的实验研究提供方法。 刘文林 湛威 张燕 刘海燕 杨矗立 刘强关键词:心肌肌钙蛋白 斑马鱼 A基因 原发性肾小球肾炎患者外周血IL-18 mRNA表达的研究 被引量:12 2001年 目的探讨白细胞介素 18( IL- 18)在原发性肾小球肾炎 ( PGN)中的作用。方法采用反转录多聚酶链反应 ( RT-PCR)及酶联免疫吸附法 ( EL ISA)测定 11例正常人及 4 6例不同病程 PGN患者外周血单核细胞 ( PBMC) IL- 18m RNA表达量及血浆中 IL- 18分泌水平。结果肾功能代偿期原发性肾小球肾炎患者 PBMC IL- 18m RNA表达量及血浆中 IL- 18的水平与正常对照组无统计学差异 ,而伴有肾功能损害的 PGN患者则显著增高 ,且与肾功能损害相平行 ;直线相关分析显示 :血浆内IL- 18水平与 Scr呈正相关、与 Ccr呈负相关、与 2 4 h尿蛋白排泄量不相关。结论外周血 IL- 18不参与 PGN早期的发病过程 ,但当疾病进一步发展至伴有肾功能不全时 ,IL- 刘华锋 陈孝文 许勇芝 江黎明 吴平 刘海燕关键词:原发性肾小球肾炎 IL-18 外周血单核细胞 MRNA 晚期糖基化终末产物与慢性肾衰竭的研究进展 被引量:1 2006年 晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products AGEs)在衰老过程中积聚是正常现象,但在肾衰竭和糖尿病患者中,AGEs参与并加速了慢性肾衰竭(CRF)及糖尿病的进展。本文就近年来对AGEs在CRF中作用的相关研究作一综述。 梁子介 刘海燕 陈孝文原发性肾小球肾炎患者血浆白细胞介素-13水平及临床意义 被引量:3 2003年 目的 探讨不同病理类型的原发性肾小球肾炎 (PGN)患者血浆白细胞介素 13(IL 13)水平 ,进一步了解PGN的发病机制 ,为临床治疗探索一种新的方法。方法 应用酶联免疫吸附测定 (ELISA)检测 5 5例PGN患者和 15例正常人血浆IL 13水平 ,对比不同病理类型的PGN患者血浆IL 13水平 ,并与肌酐清除率 (Ccr)作直线相关分析。结果 不同病理类型的PGN患者血浆IL 13水平较正常对照组增高 ,增殖性肾小球肾炎患者血浆IL 13水平高于非增殖性肾小球肾炎 ,PGN患者血浆IL 13水平与Ccr呈负相关关系 (r =- 0 .82 4 5 ,P <0 .0 0 1)。结论 PGN患者血浆IL 13水平增高 ,以增殖性肾小球肾炎为重 。 刘海燕 唐德燊 梁东 刘华锋 江黎明 许勇芝 陈孝文关键词:肾小球肾炎 白细胞介素-13 肌苷 三七总苷对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞外基质分泌及降解的影响 被引量:13 2006年 目的探讨三七总苷(PN S)对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞外基质(ECM)分泌及降解的影响,为临床上应用PN S延缓慢性肾衰竭(CRF)的进展提供理论依据。方法无菌条件下收集40份尿毒症病人血清和20例正常人血清,用相差显微镜、扫描电镜结合细胞角蛋白18(CK-18)免疫组化鉴定人肾小管上皮细胞株HK-2。应用消化法检测HK-2细胞培养上清液中羟脯氨酸水平,EL ISA方法检测HK-2细胞培养上清液中纤连蛋白(FN)、金属蛋白酶-1(MM P-1)、金属蛋白酶组织抑制因子-1(T IM P-1)蛋白分泌量,RT-PCR方法检测MM P-1和T IM P-1 mRNA表达。结果10%尿毒血清组与正常对照组相比,HK-2细胞培养上清液中胶原蛋白和FN分泌量显著增高,MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值降低,而PN S 400、600、800 m g/L可使尿毒血清增加的HK-2培养上清液胶原蛋白分泌量回降;200、400、600、800 m g/L可使FN分泌量回降;100、200、400、600、800m g/L可使尿毒血清降低的MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值回升。结论在体外实验中,PN S可降低尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞胶原蛋白及FN的分泌,升高MM P-1/T IM P-1基因表达和蛋白分泌的比值,促进ECM降解,从而有效延缓人肾小管-间质纤维化的进展。 刘海燕 陈孝文 刘华锋 梁东 唐德燊关键词:三七总苷 肾小管上皮细胞 细胞外基质 肾小管-间质纤维化 IgA肾病发病机理研究进展 被引量:1 2004年 邵圣文 刘海燕 陈孝文关键词:IGA肾病 发病机理 免疫球蛋白 细胞因子 游离脂肪酸对肾小管上皮细胞TIMP-1、PAI-1表达及细胞外基质分泌的影响 被引量:2 2007年 目的探讨游离脂肪酸(Free fatty acids,FFAs)对人肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTECs)细胞外基质降解酶抑制剂〔tissue inhibitor of metalloproteinase 3/1(TIMP-1)、plasminogen activator inhibitor 3/1(PAI-1)〕表达及细胞外基质〔纤维连接蛋(fibronectin,FN)、胶原〕分泌的影响。方法用去脂牛血清白蛋白(defatty bovine serum albumin,d-BSA)为油酸(Oil acids,OA)载体,用不同浓度OA刺激培养RTECs,以不加d-BSA及只加普通培养液的细胞作对照组,应用反转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测RTECs TIMP-1 mRNA、PAI-1 mRNA的表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA法)、羟脯氨酸消化法分别检测培养上清FN、胶原的蛋白水平。结果d-BSA组与空白对照组RTECs的细胞外基质降解酶抑制剂(TIMP-1 mRNA、PAI-1 mRNA)表达及细胞外基质蛋白(FN、胶原)分泌比较差异无显著性(P>0.05),而不同浓度OA组与空白对照组比较差异有显著性(P<0.05);且随着OA浓度增加,对RTECs TIMP-1 mRNA、PAI-1 mRNA表达以及对FN、胶原蛋白分泌的促进作用有增强趋势。结论FFAs通过促进细胞外基质(FN、胶原)的生成及抑制其降解,使其沉积在肾间质,进而在肾小管间质纤维化发生发展中起着重要的作用。 黄志文 梁东 刘华锋 唐德燊 刘海燕关键词:肾小管上皮细胞 纤维连接蛋白 慢性肾衰竭患者白细胞介素13水平及血液透析对其影响 被引量:7 2003年 目的 :探讨慢性肾衰竭 (CRF)不同损害期患者血浆白细胞介素 13(IL - 13)水平和临床意义以及血液透析 (HD)对其影响。方法 :应用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测CRF患者血浆IL - 13水平 ,对比不同肾功能损害期患者血浆IL - 13水平 ,并与肌酐清除率 (Ccr)做直线相关分析 ,观察HD对尿毒症患者血浆IL - 13水平的影响。结果 :CRF患者血浆IL - 13水平较正常对照组增高 ,且随着肾功能损害程度的加重而增高 ,至尿毒症期达到最高 ,与Ccr呈负相关 ;初次HD使尿毒症患者血浆IL - 13水平降低 ,维持HD 2个月后 ,血浆IL - 13水平降低更为明显。结论 :IL - 13可能参与CRF患者免疫炎症调节进程 。 刘海燕 陈孝文 江黎明 唐德燊 梁东 刘华锋 许勇芝关键词:慢性肾衰竭 白细胞介素13 血液透析 三七总甙对尿毒血清诱导的HK-2细胞增殖及总胶原分泌的影响 被引量:37 2004年 目的 :探讨三七总甙 (PNS)对尿毒血清诱导的人肾小管上皮细胞株 (HK - 2 )增殖及总胶原分泌的影响。方法 :采用MTT比色法检测PNS对尿毒血清诱导的HK - 2细胞增殖的影响 ;采用流式细胞术检测PNS对尿毒血清作用下的HK - 2细胞周期、细胞增殖指数 (PI)的影响 ;采用消化法检测细胞培养上清中羟脯氨酸的含量 ,换算成总胶原分泌量。结果 :MTT法示 :10 %尿毒血清组A490 值高于正常对照组 ,PNS 2 0 0~ 80 0mg/L可抑制细胞增殖 ,有明显的剂量依赖性。流式细胞术示 :10 %尿毒血清组G1期细胞低于正常对照组 ,PI高于正常对照组 ,PNS 4 0 0~80 0mg/L使G1期细胞显著增高 ,PI显著降低 ;10 %尿毒血清组羟脯氨酸的含量及总胶原分泌量均高于正常对照组 ,PNS 4 0 0~ 80 0mg/L可降低细胞培养上清中羟脯氨酸的含量及总胶原分泌量 ,且随着PNS浓度的升高而降低。 结论 :PNS可通过抑制尿毒血清诱导的肾小管上皮细胞增殖及总胶原的分泌 ,从而延缓肾小管 -间质纤维化进程 ,改善肾功能。 刘海燕 陈孝文 刘华锋 何惠娟 李晓东 冯明亮关键词:三七总甙 HK-2 细胞增殖 胶原分泌 狼疮性肾炎患者外周血IL-18水平及其基因表达 被引量:10 2002年 为了探讨白细胞介素 18(IL 18)在狼疮性肾炎 (LN )发生、发展中的作用。我们采用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR )及酶联免疫吸附 (ELISA )法测定 16例正常人及 18例LN患者外周血单个核细胞 (PBMC )IL 18mRNA表达量及其血浆水平。结果提示LN患者PBMCIL 18mRNA表达量及血浆IL 18水平均较正常对照组显著增高 [IL 18mRNA表达量为 :1 2 6 2± 0 189vs0 84 4± 0 15 5 ,P <0 0 0 1;IL 18血浆水平为 :(82 2 0 9± 5 32 77)pg/mlvs (2 39 5 7± 75 0 6 )pg/ml,P <0 0 0 1]。且WHOIV型LN增高较非IV型LN更为显著 [IL 18mRNA表达量为 :1 32 9± 0 2 1vs 1 138± 0 15 2 3,P <0 0 5 ;IL 18血浆水平为 :(1135 5 4± 5 15 34)pg/mlvs (5 0 8 6 5± 341 36 )pg/ml,P <0 0 1]。另外 ,血浆IL 18水平与肾组织活动指数 ,肾小管间质损害程度呈等级相关 (r分别为 :0 6 10和 0 4 99,P均 <0 0 5 ) ,也与血清肌酐 (Scr) ,血清内生肌酐清除率 (Ccr)及 2 4h尿蛋白排泄量 (2 4hUPQ )呈直线相关 (r分别为 :0 898、 0 6 2 8和 0 5 37,P均 <0 0 5 )。本研究认为循环IL 18表达和分泌增高可能参与LN的免疫发病过程 。 刘华锋 陈孝文 许勇芝 刘海燕 江黎明 吴平 黄萍萍关键词:外周血 IL-18 基因表达