刘群
- 作品数：6 被引量：16H指数：2
- 供职机构：首都医科大学附属北京妇产医院更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- In Situ PLA技术原位分析MTA1与NuRD复合体其他组分的相互作用
- 2014年
- 目的原位检测肿瘤转移相关蛋白MTA1与NuRD复合体其他组分-Mi2、HDAC2及MBD3的相互作用并分析MTA1/NuRD复合体在HCT116细胞中的分布情况。方法首先利用co-IP技术体外验证MTA1与NuRD复合体其他组分Mi2、HDAC2及MBD3在HCT116细胞裂解液中的相互作用。然后利用In Situ PLA技术,体内原位检测MTA1与三者的相互作用,并根据镜下阳性荧光信号数目,比较MTA1与Mi2、HDAC2及MBD3之间的作用强弱;根据相互作用位点的亚细胞分布情况,分析间期及M期MTA1/NuRD复合体的核质分布情况。结果首次从体内原位水平证实MTA1与NuRD复合体其他组分-Mi2、HDAC2及MBD3的相互作用;其作用强度HDAC2最高,Mi2次之,MBD3最弱;首次发现MTA1/NuRD复合体存在很明显的胞质分布(约占总量的1/4);另外,我们还首次发现在M期MTA1/NuRD复合体不再位于核区,而是位于染色体外周。结论In Situ PLA技术是一项有效的原位检测蛋白相互作用的新技术;MTA1/NuRD复合体可能参与MTA1胞质中功能的发挥;并且其胞质分布可能参与M期进程调控。
- 刘健王海娟刘群李春晓刘欢黄骁舾孟希亭赵枚林晨黄常志钱海利
- 关键词：MTA1相互作用SITU
- 卵巢癌SOX4介导TGF-β1诱导的上皮间质转化对侵袭转移能力的影响被引量：8
- 2022年
- 目的探讨SOX4(SRY-related HMG-box4)在卵巢癌中的表达、调控及其对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导卵巢癌上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)能力的影响。方法通过对TCGA、GEO等数据库中卵巢癌样本表达谱数据进行分析,探讨SOX4在卵巢癌中的表达情况,及其与EMT相关标志物的相关性。利用shRNA技术敲降卵巢癌SKOV3细胞系中SOX4的表达;利用Western blotting和qRT-PCR技术检测SOX4敲降对上皮标志物ZO1及间质标志物Vimentin和Slug表达的影响;利用Transwell技术检测SOX4敲降对卵巢癌细胞迁移和侵袭能力的影响;使用TGF-β1(10 ng/mL)处理SKOV3细胞72 h,然后通过Western blotting和qRT-PCR技术,检测TGF-β1对SOX4表达的调控情况,以及SOX4敲除对TGF-β1诱导EMT能力的影响。结果SOX4在卵巢癌中的表达显著上调,并与EMT间质标志物呈显著正相关;敲除SOX4可显著下调卵巢癌SKOV3细胞的EMT水平及其侵袭转移能力;TGF-β1可显著上调卵巢癌SKOV3细胞中SOX4的表达水平,而SOX4敲除可显著抑制TGF-β1诱导卵巢癌EMT的能力。结论SOX4在卵巢癌中表达上调,通过激活EMT促进其侵袭转移能力;并且,作为TGF-β1下游靶蛋白,SOX4介导了TGF-β1对卵巢癌EMT的诱导过程。因此,SOX4是一个干预卵巢癌转移的重要靶点。
- 刘群刘群刘健刘健
- 关键词：卵巢癌上皮间质转化
- 人FGF-9慢病毒表达载体的构建、包装及鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的构建人成纤维细胞生长因子-9(FGF-9)慢病毒表达载体,鉴定其表达,并对慢病毒载体进行包装,为在体及体外研究FGF-9的功能及其与肿瘤等疾病的关系提供基础。方法 PCR扩增人FGF-9基因。全长序列交换入线性表达载体,连接产物转化感受态细胞,PCR及基因测序鉴定阳性克隆。重组质粒转染293T细胞,荧光显微镜观察增强型绿色荧光蛋白(eGFP)表达,Western-blot鉴定FGF-9表达。重组病毒质粒在脂质体介导下与结构质粒和包膜质粒共转染293T细胞包装成人FGF-9过表达慢病毒,RT-qPCR测定滴度。结果 PCR及测序证实人FGF-9基因正确克隆至病毒质粒;感染293T细胞后,荧光显微镜观察到eGFP,Western-blot检测到FGF-9融合蛋白表达;三质粒共转染293T细胞获得慢病毒,测其浓度为2×108TU/mL。结论成功构建人FGF-9慢病毒表达载体,可在293T细胞中表达,并包装成慢病毒,为在体及体外研究FGF-9的功能及其与肿瘤等疾病的关系提供基础。
- 眭蕊刘群李锐锐苗劲蔚
- 关键词：慢病毒肿瘤
- 紫杉醇耐药卵巢癌细胞系的建立及耐药机制研究被引量：2
- 2014年
- 目的建立人卵巢癌紫杉醇耐药细胞株,探讨其耐药机制。方法采用梯度浓度递增法诱导建立对紫杉醇(Paclitaxel,TAX)耐药的人卵巢癌细胞耐药株SKOV3/TAX,MTT法检测SKOV3/TAX对SKOV3的耐药指数(resistance index,RI),Western Blot法检测耐药细胞中凋亡及耐药相关蛋白多聚ADP核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)的表达情况,探讨其耐药机制。结果成功建立人卵巢癌耐紫杉醇细胞株SKOV3/TAX,耐药指数高达88.46;与SKOV3相比,紫杉醇耐药细胞株形态较不规则,细胞扁平,且贴壁较牢;Western Blot及免疫荧光实验均证实SKOV3/TAX中PARP水平明显下调,且加用TAX后PARP的剪切带较亲本细胞明显减少甚至缺失。结论紫杉醇耐药卵巢癌细胞中PARP蛋白表达明显下调,该下调很可能参与了卵巢癌对紫杉醇的耐药调控。
- 刘群李锐锐眭蕊苗劲蔚
- 关键词：卵巢癌紫杉醇耐药PARP
- FGF-9、Elk-1在人卵巢肿瘤中的表达被引量：4
- 2014年
- 目的探讨FGF-9及Elk-1在人卵巢肿瘤中的表达。方法 Western-blot方法检测3例正常卵巢组织,2例交界性卵巢肿瘤及7例上皮性卵巢癌(EOC)中FGF-9及Elk-1的表达。结果与正常卵巢组织及交界性卵巢肿瘤相比,EOC组织中可见FGF-9及Elk-1过表达。结论 FGF-9及Elk-1过表达可能在EOC的发展中起重要的作用。
- 眭蕊刘群李锐锐苗劲蔚
- 关键词：上皮性卵巢癌交界性卵巢肿瘤
