刘翔
- 作品数：16 被引量：236H指数：8
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家转基因植物研究与产业化专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- Cre／lox介导剔除转双价抗虫sck＋cryIAc基因籼稻恢复系明恢86材料的选择标记基因被引量：2
- 2004年
- Cre／lox系统通过其Cre重组酶对lox序列进行切割和重新连接，介导lox序列发生特异性重组。利用重组报告基冈系统Pactin-lox-hpt-lox-gusA，对Cre／lox系统在水稻(Oryza saliva L．)中介导转基因的剔除进行了研究。Pactin-lox-hpt-lox-gusA系统中选择标记hpt基因侧翼含两个同向lox位点，并位于水稻actinl启动子和gusA基因之间。当hpt在Cre酶作用下被剔除时，actinl启动子可以和gusA基因融合在一起从而驱动GUS表达。通过农杆菌介导获得了分别转cre基因、Pactin—lox—hpt—lox—gusA结构和双价抗虫基因lox—hpt—lox—sck-cryIAc结构的水稻。利用有性杂交方法将cre基因导人列转化lox结构的植株中。在4个转Pactin—lox—hpt—lox-gusA T0植株×转cre T0植株所配组合的30个杂交F1植株中，12个植株表达GUS活性，9个表现潮霉素敏感，表明hpt基因被剔除。研究进一步通过Cre／lox介导剔除转双价抗虫sck+cryIAc基冈籼稻恢复系明恢86材料基冈组中的选择标记hpt基因。在9个转lox-hpt-lox-sck-cryIAc T2代纯合植株×转cre T2代纯合植株所配组合的77个杂交F1植株中，56个植株表现潮霉素敏感。分子分析证实在这些对潮霉素敏感的植株中hpt基因已经被剔除。
- 陈松彪刘翔彭海英巩万奎王锐王锋朱祯
- 关键词：CRE/LOX基因剔除抗虫无选择标记
- 一种转录后基因沉默机制的研究
- 转录后基因沉默是生物体中普遍存在的一种对RNA进行转录后降解的机制。近年来对转录后基因沉默现象的发现和研究为探索细胞微观调控和开辟动植物疾病治疗新途径产生了重大影响。
本研究通过对野生cry1Ac基因，以及密码...
- 刘翔
- 关键词：基因沉默稀有密码子BT毒蛋白基因绿色荧光蛋白转基因烟草基因转录
- 文献传递
- 玉米MAR序列的分离及其在转基因烟草中的功能研究被引量：1
- 2002年
- 从玉米基因组中分离了一段核基质结合区(MAR)序列,它位于乙醇脱氢酶1基因的5’端启动子区域.为研究此段MAR序列在转基因植物中的功能,将MAR构建在报告基因β-葡糖醛酸酶(GUS)基因(uidA)和植物选择标记新霉素磷酸转移酶Ⅱ基因(nptⅡ)的两侧形成植物表达载体,在载体中两段MAR之间的距离为6.2 kb.GUS活性检测表明,MAR序列对报告基因的表达水平没有影响.这一现象与MAR只构建在报告基因两侧形成小环时提高外源基因表达的结果不同,为进一步研究MAR作用机制提供了基础.
- 李旭刚陈松彪徐军望刘翔朱祯
- 关键词：玉米MAR序列转基因烟草基因表达
- 转抗虫融合基因(cry1Ac3-cpti)玉米(Zea mays L.)植株的获得及其抗虫性分析被引量：17
- 2002年
- 将苏云金杆菌家族中的Cry1Ac3基因与豇豆胰蛋白酶抑制剂基因(cpti)融合成融合基因,构建cry1Ac3-cpti融合基因植物表达载体,表达Bt-CpTI抗虫融合蛋白.用基因枪转化技术将cry1Ac3-cpti融合基因分别导入玉米优良自交系E28及340的胚性愈伤组织中,轰击后的愈伤组织经筛选剂3次筛选,获得可育的再生植株.经PCR及Southern blot分子检测,证实所获得的再生植株为转基因植株.抗虫性分析结果表明,部分转基因玉米植株对玉米螟虫有较强的抗性.
- 李慧芬刘翔曲强邓朝阳路子显陈宛新徐鸿林朱祯
- 关键词：转基因玉米基因枪BT毒蛋白基因抗虫育种
- 转苏云金杆菌毒蛋白基因玉米植株的获得及其抗虫性分析(英文)被引量：9
- 2002年
- 玉米 (ZeamaysL .)转化成功与否与基因型密切相关。在转化过程中 ,除少数模式品种能够形成再生频率较高且易转化的Ⅱ型愈伤组织外 ,大多数栽培品种往往只能够形成再生频率较低且不易转化的Ⅰ型愈伤组织。因此探索Ⅰ型愈伤组织的诱导及其转化条件 ,提高转化效率 ,对直接改良玉米优良自交系具有重要意义。应用基因枪转化技术将苏云金杆菌 (Bacillusthuringiensis)cry1Ac3基因导入玉米优良自交系E2 8及 34 0的Ⅰ型胚性愈伤组织中 ,经过膦丝菌素 (PPT)或潮霉素 (HygB)筛选 ,获得了再生植株。经PCR检测、Southernblot分析及Bt毒蛋白ELISA检测证实 ,外源基因已整合到玉米基因组中 ,并已获得表达。抗虫性分析结果表明 ,部分转基因玉米植株对玉米螟虫有较强的抗性。还比较了PPT和HygB两种筛选剂的筛选效果 ,表明PPT筛选的抗性愈伤组织的再生频率要高于HygB筛选的再生频率。
- 李慧芬李旭刚刘翔常团结肖桂芳朱祯
- 关键词：玉米植株再生抗虫基因
- 植物碱性亮氨酸拉链(bZIP)蛋白的研究进展(二)——DNA结合特性、基因表达、功能及应用被引量：8
- 2002年
- 植物碱性亮氨酸拉链 (bZIP)蛋白在高等植物基因表达与调控中起重要作用。本文介绍了植物bZIP蛋白与DNA结合特性 ,探讨了它们的基因表达和功能 。
- 路子显常团结刘翔朱祯
- 关键词：BZIPDNA结合基因表达植物
- 菊芋类金属硫蛋白基因htMT2的克隆及其表达特征分析(英文)被引量：3
- 2002年
- 从菊芋 (HelianthustuberosusL .)块茎cDNA文库中得到了一个新的植物类金属硫蛋白基因htMT2的cDNA序列 ,全长 5 0 9bp ,包括 2 4 0bp的开放阅读框、6 2bp的 5′端非翻译区、2 0 7bp的 3′端非翻译区。通过PCR获得了 2个htMT2编码区的部分基因组片段htMTG_1及htMTG_2 ,长度分别为 986bp和 982bp。分析表明两个基因组片段均包含 3个外显子及 2个内含子 ,编码一个由 79个氨基酸残基组成的多肽 ,与从htMT2推测的多肽完全一致 ,该多肽具有植物类金属硫蛋白的典型结构特征 ,N端及C端结构域富含Cys ,分别具有 8个和 7个Cys残基 ,上述两个结构域被一个无Cys的中间区分开。Southern杂交结果表明 ,htMT2在菊芋基因组中以小基因家族的形式存在。Northern杂交结果表明htMT2在叶片、叶柄、茎及块茎中均有表达 ,在茎中有较高水平的表达 ,但在根中未检测到杂交信号。经Cu2 + 处理后 ,htMT2在茎中的表达量显著降低。与其他 2型金属硫蛋白的序列同源性比较及htMT2对金属离子处理的反应均表明 ,htMT2是一种新的植物类金属硫蛋白基因。
- 常团结陈蕾路子显陈宛新刘翔朱祯
- 关键词：菊芋克隆CDNA序列基因表达内含子
- 转修饰cry1 Ac基因籼稻明恢81经花药培养获得抗虫DH系被引量：16
- 2002年
- 对基因枪法获得的明恢 81转修饰的cry1Ac基因当代植株进行花药培养 ,共接种花药 2 6 0 0枚 ,获得 83份花培植株 ,其中双倍体植株 43份 ,单倍体植株 40份。PCR结果表明含有cry1Ac基因的植株 5 5份 ,花培植株群体中转基因与非转基因植株的比值为 2∶1(5 5 2 8)。进一步结合Southernblot和ELISA分析 ,于花培植株当代筛选到转基因纯合株系 36份。外源蛋白表达量上 ,花药来源于同一克隆的DH系的不同植株之间基本一致 ,最高的Cry1Ac含量达 0 2 5 %。田间抗虫性试验表明 ,经花药培养纯合获得的部分转基因纯合系植株对二化螟 (Chilosuppressalis)表现出高抗 ,而且主要农艺性状保持不变。以上结果表明水稻花药培养可以加速转基因的纯合与育种利用。
- 曾千春吴茜冯德江周开达刘翔朱祯
- 关键词：籼稻花药培养转基因水稻生物检测二化螟
- cp基因的修饰引起转基因的沉默及其介导的PVX抗性被引量：8
- 2003年
- 将马铃薯X病毒(potato virus X,PVX)外壳蛋白(coat protein,CP)基因(cp)编码序列中植物偏爱密码子替换成稀有同义密码子,并将此修饰的外壳蛋白基因(cpm)及未修饰外壳蛋白基因(cp)分别置于CaMV 35S启动子后,构建植物表达载体,并用农杆菌介导转化烟草。Northern杂交及Run on实验结果表明,转cpm基因烟草比转cp基因烟草发生转录后基因沉默(PTGS)的频率明显增高(从6.25％增至35％),并且对人工接种的PVX病毒抗性显著提高。以上结果表明,基因中密码子的替换可以明显提高转基因植株的病毒抗性。
- 冯德江刘翔孟昆廖立力魏晓丽徐鸿林朱祯
- 关键词：CP基因马铃薯X病毒外壳蛋白病毒抗性植物病毒
- 植物碱性亮氨酸拉链(bZIP)蛋白的研究进展(一)——结构、分类、分布和同源性分析被引量：40
- 2001年
- 植物碱性亮氨酸拉链 (bZIP)蛋白在高等植物中广泛存在 ,对基因表达与调控起重要作用。本文简要介绍了植物bZIP蛋白的结构之后 ,概述了植物bZIP蛋白的分类和分布。最后 ,以模式植物、主要农作物及蔬菜等为例 ,对它们的同源性进行了详细的描述和分析。
- 路子显常团结刘翔朱祯
- 关键词：同源性分析植物
