刘银花
- 作品数：10 被引量：79H指数：4
- 供职机构：遵义医学院珠海校区更多>>
- 发文基金：博士科研启动基金贵州省卫生厅优秀医学青年科技人才基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 人白介素12亚基p40和p35基因串联在毕赤酵母中的表达及表达产物活性分析
- 2008年
- 利用毕赤酵母系统表达有活性的人单链白细胞介素12(hscIL-12),PCR法从质粒pBI121-IL-12中扩增hscIL-12基因,经酶切、连接构建重组表达载体pPIC9K-hscIL-12,SacI线性化后,PEG1000法转化毕赤酵母GS115,经G418筛选和菌落PCR鉴定,经甲醇诱导,hscIL-12在酵母中获得分泌表达,表达产物经Western blot检测,显示该蛋白相对分子质量为70kDa,可与鼠抗人IL-12单克隆抗体特异性结合;定量分析结果表明,重组酵母培养上清中hscIL-12约占总蛋白的26%,表达量约为60mg/L;生物学活性实验表明,重组蛋白能促进人外周血淋巴细胞增殖。为利用rhscIL-12进行基因治疗奠定了基础。
- 周鹤峰邵敏孙伟刘银花李官成葛正龙
- 关键词：人白细胞介素12毕赤酵母活性分析
- 杜仲叶绿原酸提取物与绿原酸、维生素C体外抗氧化比较被引量：23
- 2012年
- 目的:比较杜仲叶绿原酸提取物(ECE)与绿原酸和维生素C(VC)的体外抗氧化活性。方法:以VC、绿原酸为对照,测定ECE对二苯代苦味酰肼自由基(DPPH.)、超氧阴离子自由基(O2-.)、羟基自由基(.OH)、烷基自由基的清除率及抑制大鼠红细胞氧化溶血的作用。结果:ECE对DPPH.、O2-.、.OH和烷基自由基的清除能力较好,其清除上述自由基的IC50值分别为14.0、38.3、61.1、648.7μg/mL,均小于绿原酸和VC的相应值,但ECE对红细胞氧化溶血的抑制效果不如绿原酸和VC。结论:ECE可作为多功能的天然抗氧化剂,值得进一步开发利用。
- 李文娜肖苑陈阳刘银花
- 关键词：杜仲叶绿原酸维生素C抗氧化活性
- 一氧化氮在弓形虫致生精细胞损伤中的作用被引量：2
- 2009年
- 目的:研究弓形虫感染后对雄性小鼠一氧化氮(nitric oxide,NO)水平的改变对睾丸生精细胞的影响。方法:选用9～10周龄雄性BALB/C小鼠60只,随机分为正常对照组、弓形虫速殖子感染组(0.5×103、1×103、2×103、4×103)。采用腹腔注射法,建立弓形虫急性感染模型,免疫组化SP法测定睾丸Bax、Bcl-2表达的变化,硝酸还原法测定睾丸NO含量。结果:感染小鼠睾丸组织的NO水平明显增高,睾丸细胞Bcl-2表达无明显改变,而生精细胞尤其是精母细胞的Bax表达明显增加。结论:弓形虫感染导致NO升高,并可能通过Bcl蛋白途径促使生精细胞,尤其是精母细胞的损伤。
- 杨瑞刘银花夏嫱
- 关键词：弓形虫一氧化氮凋亡生精细胞
- PTEN、TRA2B在人低分化胃腺癌中的表达及其意义被引量：4
- 2018年
- 目的探讨抑癌基因(PTEN)与促癌基因(TRA2B)在人低分化胃癌中的表达及其与低分化胃癌发生发展、临床病理特征之间的关系。方法 9例低分化胃癌组织及其癌旁正常胃组织,HE染色显示组织结构,免疫组化法及免疫荧光法检测各组织中PTEN、TRA2B的表达。结果低分化胃癌组织中PTEN蛋白的阳性表达率为77.8%,而在正常胃组织中几乎全部表达,两者差异有统计学意义(P<0.05)。TRA2B蛋白在低分化胃癌中表达的阳性率为66.7%,而正常胃组织中表达阳性率为22.2%,两者差异有统计学意义(P<0.05)。PTEN及TRA2B与TNM分期无关,与淋巴结转移有相关性(P<0.05)。结论联合检测人低分化胃癌组织中PTEN与TRA2B的表达对胃癌诊断、预后判断具有一定的临床应用价值。
- 靳俊峰刘银花欧小波阮媛王海青陈燕玲吴秀香易华
- 关键词：PTEN免疫组织化学免疫荧光
- 杜仲叶绿原酸提取物对脂代谢关键酶活性的影响被引量：22
- 2012年
- 目的研究杜仲叶绿原酸提取物对脂代谢关键酶的影响,探讨其降血脂作用机理。方法测定杜仲叶绿原酸提取物对离体胆固醇微胶粒形成,猪肝HMG-CoA还原酶活性以及胰脂肪酶活性的影响。结果杜仲叶绿原酸提取物抑制离体胆固醇微胶粒形成作用(IC50=64.8μg.mL-)1强于绿原酸(IC50=82.2μg.mL-)1;抑制HMG-CoA还原酶效价强于辛伐他汀;抑制胰脂肪酶活性(IC50=2.6μg.mL-)1强于绿原酸(IC50=4.0μg.mL-1)但略低于奥利司他(IC50=1.7μg.mL-)1。结论杜仲叶绿原酸提取物降血脂机理可能与抑制脂质的吸收转化、抑制肠道胆固醇的吸收和减少肝脏胆固醇的合成有关。
- 李文娜韩宇东刘银花陈阳肖苑
- 关键词：杜仲叶绿原酸HMG-COA还原酶胰脂肪酶
- 人白介素2受体γ链胞外区在巴斯德毕赤酵母中的表达
- 2010年
- 目的:在毕赤酵母GS115中表达重组人白细胞介素2受体γ链(rhsIL-2Rγ)胞外区。方法:用RT-PCR法从正常人淋巴细胞中获得IL-2Rγ胞外区基因;构建重组质粒pPIC9K-hsIL-2Rγ,用聚乙二醇法转入感受态GS115菌株,MD平板筛选His+转化子,用BMMY培养基诱导表达rhsIL-2Rγ;对重组蛋白进行免疫酶染色、SDS-PAGE及Western印迹鉴定。结果:克隆到目的片段,构建了重组质粒pPIC9K-hsIL-2Rγ;免疫酶染色、Western印迹等结果显示,重组质粒已成功转化GS115,并获得诱导表达的rhsIL-2Rγ。结论:在毕赤酵母GS115中表达了rhsIL-2Rγ,其蛋白条带有上移现象,分子较大,可能其糖基化过度或存在二聚体。
- 孙伟王富英周鹤峰刘银花胡亮李官成
- 关键词：胞外区巴斯德毕赤酵母分泌表达
- 沉香随机扩增多态性DNA反应体系的建立被引量：2
- 2009年
- 目的对影响沉香随机扩增多态性DNA（RAPD）反应的各因素进行优化，建立适用于沉香RAPD的最佳反应体系。方法采用改良的CTAB法提取基因组DNA，变化单一因素的方法对模板DNA浓度、Taq酶用量、dNTPs、引物浓度、Mg^2＋浓度、退火温度对RAPD影响进行分析。结果建立了适合沉香RAPD分析的最佳反应体系：在20μl反应体系中，模板DNA用量20ng、Taq酶1．0U、dNTPs浓度为0．3～0．4mmol·L^-1、随机引物浓度为0．6μmol·L、Mg^2＋浓度1．5—2．0mmol·L^-1、PCR反应条件：94℃，10min；94℃，1min；36℃，1min；72℃，2min；45个循环，72℃，8min。结论该反应体系具有良好的稳定性和重复性。
- 邵敏周鹤峰唐历波刘银花李官成
- 关键词：RAPD基因组DNA
- 桑寄生水煎液对小鼠胚胎肢芽细胞生长发育的影响被引量：3
- 2016年
- 目的探讨桑寄生水提液对小鼠胚胎肢芽细胞生长发育的影响。方法取小鼠E13后肢芽制成细胞悬液,接种到细胞培养板中,分别加入0.2,0.1,0.05 g/ml桑寄生水提液和蒸馏水,设置为高,中,低,和空白对照组。培养72h后采用MTT法、甲苯胺蓝染色法、流式细胞术分别检测肢芽细胞的增殖、分化和凋亡情况。结果 (1)高剂量桑寄生水煎液抑制肢芽细胞的增殖,与空白对照组比较,差异具有显著性(P<0.05);而低和中剂量促进肢芽细胞的增殖,其中低剂量与空白对照组比较差异具有显著性(P<0.05)。(2)各剂量组桑寄生水煎液均诱导了肢芽细胞的分化,中和低剂量组与空白对照组比较均有显著性差异(P<0.05)。(3)各剂量组均诱导了肢芽细胞坏死,高剂量组与空白对照组比较具有显著性差异(P<0.05);高和低剂量诱导了肢芽细胞的凋亡,其中高剂量与空白对照组比较差异具有显著性(P<0.05)。结论桑寄生水煎液高剂量抑制肢芽细胞的增殖,诱导细胞凋亡和坏死;低和中剂量促进肢芽细胞的增殖和分化。
- 刘星李丽娟徐秀英李啸红徐安婷刘银花彭莉萍葛从祥
- 关键词：桑寄生肢芽细胞分化凋亡
- 两种新型卟啉化合物光动力体外抑癌作用的研究被引量：2
- 2011年
- 目的:考察2种新型金属卟啉化合物(药物-A:四水合氯化-氯-二-2,2’-联吡啶(-5-吡啶基-10,15,20-三苯基卟啉)合钌(Ⅱ)(Ru(bpy)2TMPP)C12);药物-B:四水合氯化-氯-二-菲咯啉(-5-吡啶基-10,15,20-三苯基卟啉)合钌(Ⅱ)(Ru(phen)2TMPP)C12)),对人宫颈癌Hela细胞株的体外抗癌活性。方法:采用MTT法测定药物对Hela细胞增殖的影响;邻二氮菲-Fe2+氧化法测定药物对细胞清除羟自由基能力的影响;Giemsa染色法观察细胞形态学的改变。结果:药物-A、B抑制Hela细胞的最适宜条件为1×10-5mol/L培养48h并光照2h。随药物浓度升高肿瘤细胞的羟自由基清除能力相应下降,给光比避光作用更明显;Giemsa染色后光学显微镜下观察到给药后的细胞形态数目发生不同程度的变化,在最高浓度处可观察到大量细胞脱壁和细胞碎片浮起,凋亡细胞数量明显增多。结论:2种药物对Hela细胞均有杀伤作用,作用的强弱与给药的浓度和光照时间有关。
- 李文娜夏嫱刘银花梅文杰
- 关键词：卟啉HELA细胞光动力疗法MTT
- 山慈菇提取液对小鼠4T1乳腺癌细胞抑制作用机制的研究被引量：23
- 2016年
- 探索山慈菇提取液对小鼠4T1细胞抑制作用机制。采用水煎法制备山慈菇提取液,MTT比色法检测小鼠4T1细胞的增殖活性,Annexin V/PI双染流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡。结果表明,山慈菇提取液对4T1细胞有明显的增殖抑制作用(P<0.05),并呈剂量依赖关系。山慈菇提取液诱导小鼠4T1细胞凋亡效果明显,并有剂量依赖性。山慈菇提取液对小鼠乳腺癌细胞有明显的增殖抑制和诱导其细胞凋亡的作用。
- 刘银花钟世军曾涛陈臻
- 关键词：山慈菇增殖抑制细胞凋亡
