卢迎新
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 供职机构：广西医科大学附属肿瘤医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 卵巢上皮性癌淋巴结高转移细胞和脐静脉内皮细胞交互和共同培养后细胞特征的变化被引量：2
- 2014年
- 目的：探讨卵巢上皮性癌（卵巢癌）淋巴结高转移细胞和脐静脉内皮细胞体外交互和共同培养后细胞特征的变化。方法建立绿色荧光蛋白（GFP）标记的卵巢癌淋巴结高转移细胞株SKOV3/PM4细胞和细胞膜红色荧光染料DiI标记的人脐静脉内皮细胞株HUVEC细胞，分别收集SKOV3/PM4、HUVEC细胞的培养上清液，作为交互培养的条件培养基（如以HUVEC细胞培养的上清液培养SKOV3/PM4细胞），建立两种细胞交互培养和共同培养体系。细胞交互培养后，光镜观察细胞形态的变化并计算细胞分裂指数，透射电镜观察细胞超微结构的变化，四甲基偶氮唑蓝（MTT）比色法检测细胞生长速度，流式细胞仪分析细胞周期比例；细胞共同培养后，激光共聚焦显微镜观察两种细胞间的相互作用情况，明胶酶谱法检测细胞中基质金属蛋白酶2（MMP-2）和MMP-9的表达。结果细胞交互培养后，与单独培养的SKOV3/PM4细胞相比，交互培养的SKOV3/PM4细胞伪足增多，核分裂象[细胞分裂指数分别为（4.8±0.8）%、（11.2±0.3）%；P〈0.05]增多，生长速度明显增快，G0/G1期细胞比例[分别为（69.4±3.6）%、（48.4±4.6）%；P〈0.05]降低，G2/M期细胞比例[分别为（5.2±1.6）%、（24.9±2.2）%；P〈0.05]升高；与单独培养的HUVEC细胞相比，交互培养的HUVEC细胞形态改变明显，出现空泡化超微结构，核分裂象[细胞分裂指数分别为（2.7±0.5）%、（5.7±0.6）%；P〈0.05]增多，生长速度略降低，G0/G1期细胞比例[分别为（51.4±2.2）%、（79.0±4.1）%；P〈0.05]升高，G2/M期细胞比例[分别为（19.1±1.2）%、（3.3±0.5）%；P〈0.05]降低。细胞共同培养48 h后，激光共聚焦显微镜观察，绿色荧光标记的SKOV3/PM4细胞和红色荧光标记的HUVEC细胞出现融合现象；明胶酶谱法检测显示，MMP-2在HUVEC细胞中不表达，在SKOV3/PM4细胞中低表达，在共同培养的SKOV3/
- 卢迎新高婷陈艳华张新颖李力谢一泓李鸿阮和云黎丹戎
- 关键词：人脐静脉血管内皮细胞共同培养技术
- 人淋巴管内皮细胞对卵巢癌淋巴结定向转移细胞分泌蛋白表达的分析被引量：3
- 2013年
- 目的:初步探讨人淋巴管内皮细胞(HLEC)对卵巢癌淋巴结定向转移细胞(SKOV3-PM4)分泌蛋白的影响。方法:将细胞体系分为4组(A组:SKOV3;B组:SKOV3+HLEC;C组:SKOV3-PM4;D组:SKOV3-PM4+HLEC),采用抗体芯片和iTRAQ-2D-LC-MALDI-TOF/TOF/MS方法检测各组细胞培养基中的蛋白,筛选出差异明显的分泌蛋白,对其行生物信息学分析,并采用ELISA方法在人血清标本和细胞培养基中进行验证。结果:抗体芯片与质谱分析结果提示,C组与A组相比、D组与C组相比Progranulin(GRN)、VEGFA表达上调,SPARC、IGFBP7表达下调。经过综合生物信息学分析,IGFBP7和VEGFA联系紧密,相互影响。与正常组血清相比,VEGFA在卵巢癌中的表达最高,IGFBP7表达最低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:淋巴结定向转移与淋巴管内皮细胞微环境关系密切,共培养后的差异蛋白涉及到基质细胞蛋白、细胞黏附作用因子等方面。其中VEGFA、GRN的表达上调及SPARC、IGFBP7的表达下调与卵巢癌淋巴结定向高转移密切相关。
- 张新颖尹富强刘丽高婷阮和云冠潇卢迎新黎丹戎
- 关键词：卵巢癌肿瘤微环境淋巴转移分泌蛋白
