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机械牵张对诱导多能干细胞向心肌细胞分化的研究被引量：4: 2012年; 目的研究机械牵张对诱导多能干细胞向心肌细胞分化效率的影响。方法诱导多能干细胞形成拟胚体后将拟胚体分为四组:对照组(未行牵张处理),牵张组1(5-6天行24小时牵张),牵张组2(5-6天行24小时牵张,7-8天再行24小时牵张),牵张组3(5-6天行24小时牵张,7-10天再行72小时牵张),通过对小鼠诱导多能干细胞施加20%形变率的机械牵张力后,于第15天,分别计数每组跳动克隆数目从而初步在上述四组中选出诱导效率最高组,此后用荧光免疫染色、Westernblot、RT-PCR和激光共聚焦法,进一步鉴定对照组和初步筛选出的牵张组最终分化效率和细胞成熟度差异。结果机械牵张刺激下,分化15天时,牵张组2的跳动克隆数上升(P<0.05),初步筛选出牵张组2可以提高分化效率;统计α-MHC免疫荧光染色面积发现牵张组2是对照组的2.1倍(P<0.05);牵张组2TroponinI的蛋白表达量为对照组的1.7倍(P<0.05);半定量PCR结果发现,心肌细胞标志基因β-MHC,MLC-2v及心肌细胞早期转录因子Nkx2.5的表达量分别提高了6.7倍、4.4倍和11.4倍(P值均<0.05);激光扫描共聚焦显微镜对分化来的单个心肌细胞进行α-actinin观察发现,牵张组2有利于心肌细胞的伸展和成熟。结论初步验证机械牵张力作为一种刺激诱导因素,20%拉伸形变率,牵张组2(贴壁的拟胚体5-6天行24小时牵张,7-8天再行24小时牵张)的处理方法可以显著促进诱导多能干细胞向心肌细胞的分化效率,为以后的深入研究和临床应用提供了实验基础。; 薛媛媛龚惠闫媛周寅叶勇蒋国良苑洁周宁葛均波邹云增; 关键词：诱导多能干细胞机械牵张分化心肌细胞

尾加压素Ⅱ调控硫化氢生成保护氧化应激介导的心肌凋亡: 背景尽管尾加压素Ⅱ在慢性心力衰竭中促进心脏肥大及纤维化,但最近的研究表明,急性心肌梗死患者血浆尾加压素Ⅱ升高,以及低水平的尾加压素Ⅱ与心功能受损严重程度相关,提示了尾加压素Ⅱ可能在急性心肌梗死早期对心脏有保护作用.目的...; 龚惠陈志丹张潇伊李洋叶勇杨春杰张国平邹云增; 关键词：氧化应激心肌细胞

芪苈强心胶囊通过抑制血管紧张素Ⅱ改善压力超负荷致小鼠心肌肥厚: 叶勇邹云增

参芎葡萄糖注射液对缺血再灌注损伤心肌的保护作用被引量：15: 2012年; 目的探讨参芎葡萄糖注射液对小鼠急性心肌缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用及可能的分子机制。方法建立急性心肌缺血再灌注(Ischemia-Reperfusion,I/R)损伤的小鼠模型,将野生型小鼠(C57BL/6)随机分为3组,假手术组(Sham),缺血再灌注+生理盐水组(Vehicle),缺血再灌注+参芎葡萄糖注射液预处理组(20mL/kg,SL),术前2小时给予腹腔注射生理盐水或参芎葡萄糖注射液,于缺血再灌注后不同时间点,通过心脏超声观察各组小鼠心功能的变化,心肌组织TTC染色确定心梗面积大小,脱氧核糖核苷酸末端转移酶法(TUNEL)检测凋亡心肌,蛋白免疫印迹法(Western Blot)及酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测心肌组织以及血清炎症因子肿瘤坏死因子(TNF-α)表达水平变化。结果 I/R手术48小时后,与假手术组相比,左室射血分数(LVEF)明显降低(P<0.01)。参芎葡萄糖注射液预处理明显改善I/R组的LVEF,并降低了心肌梗死面积,抑制I/R引起的心肌细胞凋亡和组织炎症反应。进一步的研究表明,参芎葡萄糖注射液预处理明显抑制了I/R后心肌组织以及血清中TNF-α表达水平升高(P<0.01)。结论参芎葡萄糖注射液预处理通过抑制TNF-α表达水平发挥对缺血再灌注(I/R)损伤心肌的保护作用。; 李达文龚惠叶勇路静蒋国良贾剑国吴超能张国平邹云增; 关键词：参芎葡萄糖注射液心肌缺血再灌注损伤炎症反应细胞凋亡

机械牵张调控LRP6磷酸化介导心脏侧群干细胞增殖: 2016年; 目的研究机械牵张对心脏侧群干细胞(cardiac side population cell,CSP)增殖的作用及机制。方法通过流式细胞仪分选并培养大鼠乳鼠CSP,牵张后观察细胞的增殖。并通过胸主动脉缩窄(transverse aorta constriction,TAC)建立压力负荷小鼠模型,流式细胞仪分选后观察CSP的比例。进一步通过荧光染色以及Western blot检测CSP的LRP6磷酸化水平。结果成功分离及培养CSP,机械牵张可促进CSP增殖。体内实验表明,压力负荷可明显促进CSP比例的升高。免疫荧光及Western blot实验表明,机械牵张可明显促进CSP的LPR6磷酸化。CSP过表达LRP6可明显增强机械牵张介导的促增殖效应。结论机械牵张可促进LRP6磷酸化,从而促进CSP增殖,有利于机体对病理性刺激产生适应性反应以维持心功能。; 陈志丹龚惠叶勇张国平李洋杨春杰贾剑国邹云增; 关键词：机械牵张增殖

芪苈强心胶囊联合氯沙坦改善压力超负荷引起的小鼠心力衰竭: 目的探讨联合使用芪苈强心胶囊和氯沙坦对压力超负荷引起小鼠心肌肥大和心力衰竭(心衰)的影响。方法取8～10周龄C57BL/6体重22～25g小鼠,行小鼠升主动脉缩窄(TAC)制作压力超负荷慢性心衰模型。所有小鼠分为5组,分...; 李磊叶勇吴剑杨春杰游洁芸蒋国良龚惠张国平贾剑国葛均波邹云增; 文献传递

心肌细胞过表达BMP-2激活Smad6/Smurf1信号复合物有效拮抗TGF-β1/ROCK通路介导的纤维化发生: 目的Rho激酶(ROCK)活化在压力超负荷介导的左心室重构中发挥重要作用,其潜在的病理分子机制尚不明确。在本研究中,我们发现TGF-β1可诱导ROCK活化,并通过抑制内源性BMP-2加重心肌纤维化。因此,利用外源性补充B...; 王时俊杨春杰龚惠叶勇孙爱军葛均波邹云增

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叶勇

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