吕雪莲
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 基于单核细胞增生李斯特菌prfA基因新型原核温控表达载体的构建
- 单核细胞增生李斯特茵的prfA基因编码一个温度控制启动蛋白,具有在37℃条件下启动下游基因表达的功能.为构建新型原核温控诱导表达载体,本研究利用PCR方法扩增prfA基因,并将其与EGFP或DsRed基因分别插入到pET...
- 田秋丰于申业衣菲吕雪莲倪宏波刘思国
- 关键词：调控基因荧光蛋白
- 文献传递
- 肠炎沙门氏菌三种主要毒力岛基因缺失株的构建及其免疫效力研究
- 目的 :沙门氏菌病属于重要的食源性致病菌之一,经常通过污染的水和食物引起人类疾病。沙门氏菌的致病性与其毒力岛基因密切相关。因此,构建沙门氏菌单个或多个毒力岛的基因缺失株,并评估这些毒力岛对沙门氏菌致病性的影响以及在鸡体内...
- 吕雪莲周薇刘松艳曹俊张童利王曼宇刘思国于申业
- 关键词：肠炎沙门氏菌免疫效力
- 文献传递
- 基于单核细胞增生李斯特菌prfA基因新型原核温控表达载体的构建被引量：1
- 2014年
- 单核细胞增生李斯特菌的prfA基因编码一个温度控制启动蛋白,具有在37℃条件下启动下游基因表达的功能。为构建新型原核温控诱导表达载体,本研究利用PCR方法扩增prfA基因,并将其与绿色荧光蛋白(GFP)或红色荧光蛋白(DsRed)基因分别插入到pET-28a和pUC19载体中,构建重组质粒pET-prfA-EGFP和pUC-prfA-DsRed。将重组质粒转化大肠杆菌DH5α,在37℃条件下培养,利用激光共聚焦显微镜观测细菌中荧光蛋白的表达情况。结果表明,构建的两种重组质粒的荧光蛋白基因于37℃条件下,在受体菌中均获得有效表达,而30℃时则仅有微弱的本底荧光蛋白表达。本研究构建了以最适生理温度为单一诱导条件的温控表达的新型原核细胞表达载体,为蛋白的表达与功能研究提供了新的平台。
- 田秋丰于申业衣菲倪宏波吕雪莲刘思国
- 关键词：单核细胞增生李斯特菌荧光蛋白
- 肠炎沙门氏菌三种主要毒力岛基因缺失株的构建及其免疫效力研究
- 目的：沙门氏菌病属于重要的食源性致病菌之一，经常通过污染的水和食物引起人类疾病。沙门氏菌的致病性与其毒力岛基因密切相关。因此，构建沙门氏菌单个或多个毒力岛的基因缺失株，并评估这些毒力岛对沙门氏菌致病性的影响以及在鸡体内诱...
- 吕雪莲周薇刘松艳曹俊张童利王曼宇刘思国于申业
- 关键词：肠炎沙门氏菌免疫效力
- 通过改进Red重组方法快速构建肠炎沙门菌毒力岛SPI-1缺失株被引量：3
- 2014年
- 沙门菌依赖毒力岛SPI-1编码的Ⅲ型分泌系统在侵染宿主肠道上皮细胞中起重要作用。为制备沙门菌毒力岛SPI-1缺失株,本研究利用PCR扩增毒力岛SPI-1上下游同源臂和含有氯霉素抗性基因片段,连接p ET-28a构建打靶质粒,采用电击法将其转入含有p KD46a质粒的肠炎沙门菌中。经L-阿拉伯糖诱导同源重组后,鉴定阳性重组子,转化诱导产生重组酶FLp的p CP20质粒,从而删除氯霉素抗性基因,通过PCR方法鉴定缺失株,命名为SM6ΔSPI-1。连续培养鉴定表明缺失株具有良好的遗传稳定性。生长特性研究显示缺失株生长速率高于野生菌株。本研究利用改进的Red重组系统通过一步法构建了肠炎沙门菌毒力岛SPI-1缺失株,为沙门菌毒力岛的功能研究与基因工程减毒疫苗研制奠定了基础。
- 吕雪莲于申业倪宏波衣菲田秋丰刘思国
- 关键词：RED同源重组
