吴刚
- 作品数：141 被引量：391H指数：10
- 供职机构：中国农业科学院油料作物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生政治法律更多>>
- 一种甘蓝型油菜雄性不育基因BnMS5e、cDNA、蛋白、载体、工程菌及其应用
- 本发明涉及一种甘蓝型油菜雄性不育基因BnMS5<Sup>e</Sup>、cDNA、蛋白、载体、工程菌及其应用，属于生物育种技术领域。所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明所述基因BnMS5<Sup>e<...
- 曾新华吴刚闫晓红袁荣王淼刘芳罗军玲武玉花朱莉李晓飞李均
- 转基因油菜Ms8事件外源插入载体旁侧序列及其应用
- 本发明公开了一种转基因油菜Ms8事件外源插入载体旁侧序列及其应用，涉及生物工程技术领域中转基因油菜的检测。本发明以转基因油菜品种Ms8Rf3为材料，利用引物对：MDB201：5’GCTTGGACTATAATACCTGAC...
- 卢长明吴刚武玉花肖玲
- 文献传递
- 油菜热休克蛋白基因HSP81.1启动子的克隆与功能验证
- 2011年
- 本研究从甘蓝型油菜(Brassica napus)基因组中扩增获得热休克蛋白基因启动子,并将其克隆至双元载体pBI121的GUS报告基因上游,构成双元表达载体pBI121 HSP GUS。通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导法转化烟草后获得转基因植株。对T1转基因植株研究表明,外源基因在42℃处理1h后开始表达,且即使用同样条件诱导,GUS基因的表达率和表达量在不同生长时期也有差异。在第50d左右的苗期,GUS基因的表达率和表达量高,但随植株老化而逐渐下降。研究显示,利用油菜的热休克蛋白启动子可以达到通过温度控制烟草基因表达的目的。
- 陈桂敏吴刚曹应龙武玉花肖玲卢长明
- 关键词：GUS报告基因油菜转基因烟草
- 影响农杆菌转化效率的植物因子H2A1基因的克隆、序列分析及其植物表达载体的构建被引量：4
- 2007年
- 拟南芥组蛋白H2A1是影响农杆菌T-DNA整合到宿主基因组的关键因素之一。与其它H2A组蛋白一样,它含有1个保守的H2A结构域。本研究利用PCP技术从拟南芥中成功扩增到H2A1基因组序列的全长。产物纯化后克隆到pBI121(Kmr),从而构建了H2A1的植物表达载体pBI121-H2A1。PCR和DNA测序证实载体构建成功。最后用电击法将该重组质粒导入根癌农杆菌LBA4404菌株中形成工程菌。此表达载体的构建为进一步研究H2A1的功能和提高外源基因在植物中稳定表达水平奠定了基础。
- 邹智吴刚卢长明
- 关键词：根癌农杆菌植物表达载体
- 一种Cry1Ab/Ac胶体金快速检测试剂盒
- 本实用新型涉及一种Cry1Ab/Ac胶体金快速检测试剂盒，包括试剂盒体(01)；所述试剂盒体(01)的底部设有材料盒(04)，所述材料盒(04)内分别容置有PVC底板盒(05)、若干材料卷(07)和若干试剂瓶(06),所...
- 高鸿飞吴刚翟杉杉崔丹丹武玉花李俊李晓飞李允静
- 文献传递
- 油菜种子特异表达启动子pNapB和pFAE1的结构与功能比较研究被引量：7
- 2008年
- 启动子是基因在转录水平上的一种重要调控元件。本研究通过同源序列法从甘蓝型油菜品种中油821中分离到油菜基因NapB和FAE1的上游启动子序列pNapB和pFAE1,其中pNapB长1136bp,pFAE1长1420bp。两种启动子的核苷酸序列都含有种子特异表达启动子的顺式作用元件,包括RY重复、G-box和E-box等,但两种启动子顺式作用元件的序列分布不同。将pNapB和pFAE1两个启动子分别与报告基因GUS融合并通过农杆菌介导法导入烟草,得到大量转基因烟草植株。对T1代转基因烟草进行组织化学分析,比较了不同启动子的组织表达特异性。结果表明,两种启动子都只在种子中起作用,属于典型的种子特异性表达启动子,但是它们作用的时间和空间分布以及作用强度明显不同。pNapB启动子比pFAE1作用开始的时间早,持续时间长,在早期作用比pFAE1强,但pFAE1启动子在种子发育中期启动速度快,成熟种子的GUS染色深度在两种启动子间差别不大。
- 肖娜武玉花肖玲吴刚卢长明
- 关键词：GUS转基因烟草
- 一种与油菜显性细胞核不育相关的基因辅助育种的分子标记及其应用
- 本发明公开了一种与油菜显性细胞核不育相关的基因辅助育种的分子标记及其应用，涉及油菜分子育种技术领域。本发明提供了油菜显性细胞核不育相关的基因辅助育种的分子标记、鉴定引物、试剂盒以及在油菜及相关作物显性细胞核雄性不育杂种优...
- 曾新华闫晓红吴刚袁荣王淼罗军玲刘芳朱莉李晓飞李均
- 转基因油菜筛查检测策略研究被引量：10
- 2012年
- 根据收集到的国内外已商业化转基因油菜品种的基因元件信息,构建了油菜转基因检测分子特征矩阵,在分析基因元件使用频率的基础上,建立了转基因油菜的筛查检测策略。研究发现,利用P-CaMV35S、P-FMV35S和bar这三个元件组合,对现有转基因油菜品种的筛查检出率可达100%。将P-CaMV35S、P-FMV35S、bar、CP4-EPSPS、PAT和T-NOS组合,每个转化事件可检出至少两次,增加了检测的可靠性。同时,分析了不同转化事件中同名基因元件的序列差异,进一步验证了分子特征矩阵筛查方法的可行性。
- 张丽武玉花吴刚曹应龙李均卢长明
- 关键词：转基因油菜转基因检测筛查方法矩阵分析PCR
- 基于插入位点基因组序列建立的鉴定大豆转化体MON89788基因型的方法
- 本发明公开了一种快速鉴定转基因大豆MON89788单株基因型的方法，涉及转基因育种和转基因标准物质生产领域中转基因大豆MON89788纯合单株(单粒)、杂合单株的快速鉴定技术。根据转基因大豆MON89788外源基因插入位...
- 武玉花李俊翟杉杉李允静高鸿飞吴刚
- 转基因油菜RF1的外源基因插入位点分析与事件特异性检测方法研究被引量：12
- 2008年
- 采用基因组步移和巢式PCR方法研究了转基因油菜雄性不育恢复系RF1外源基因插入位点序列特征,并根据此特征建立了RF1转化事件特异性检测方法。从RF1基因组DNA中分离到外源基因插入位点的左边界旁侧序列798bp,包括335bp的插入载体序列和463bp的旁侧基因组序列。根据已发表的RF1右边界旁侧序列的信息,发现外源T-DNA在向油菜基因组整合的过程中,在整合位点处有75bp的基因组序列丢失。根据分离的RF1左边界旁侧序列,建立了RF1事件特异性定性检测方法,扩增片断大小为284bp。利用建立起来的RF1事件特异性定性检测方法可以准确的将转基因油菜RF1与其它的转基因油菜品种区分开,检测灵敏度达到5个拷贝(0.013%)。该事件特异性检测方法具有高度的特异性和良好的灵敏性,为转基因油菜品种RF1的身份识别提供了有效的方法。
- 聂淑晶武玉花吴刚肖玲卢长明
- 关键词：GMO
