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负性筛选策略与食管鳞癌循环肿瘤细胞检测被引量：2: 2008年; 目的建立基于细胞学水平的循环肿瘤细胞负性筛选方法,检测食管鳞癌患者外周血循环肿瘤细胞。方法选用负性筛选策略,分步去除7.5ml食管鳞癌外周血样本中的红、白细胞,富集上皮来源的稀有细胞。比较3种免疫磁珠(Miltenyi、AVIVA和Xinzhi磁珠)去除白细胞、富集外周血循环肿瘤细胞的特点和效率。用经典的细胞化学染色鉴定循环肿瘤细胞。结果Miltenyi和AVIVA磁珠去除白细胞、富集肿瘤细胞效果较好。从富集后的食管鳞癌患者外周血稀有细胞中鉴定到形态各异的循环肿瘤细胞。结论负性筛选策略可以有效分离鉴定食管鳞癌患者外周血形态各异的循环肿瘤细胞。; 何平王伟任传利乔媛媛张金强文峰周兰萍刘芳赵晓航; 关键词：循环肿瘤细胞食管鳞癌

一种自身抗原表位、其编码基因及其用途: 本发明涉及免疫化学、蛋白质组学和肿瘤免疫领域。具体地涉及一种自身抗原表位、其编码基因及其用途。更具体地，涉及人组织蛋白酶D(cathepsin D)抗原表位区及其编码基因，以及这种多肽在鉴定胰腺癌患者血清中自身抗体中的用...; 赵晓航何平刘飞孙玉琳刘芳周兰萍谢鹏张金强安怀杰李潜; 文献传递

食管癌NDRG1表达与肿瘤进展关系的初步研究: N-myc下游调节基因1（N-myc downstream regulated gene 1,NDRG1）在进化中高度保守,属于α/β水解酶超家族。在正常组织中主要表达于分化上皮的胞浆,特殊条件下转移至细胞核或细胞膜。N...; 艾润娜周兰萍许杨赵晓航; 文献传递

人乳头瘤病毒16型E6E7反义RNA抑制宫颈癌细胞恶性表型的作用被引量：1: 1998年; 目的研究癌基因的特异性反义ＲＮＡ对癌细胞生长繁殖和恶性程度的影响。方法用逆转录病毒载体将人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）－１６Ｅ６Ｅ７反义ＲＮＡ导入ＨＰＶ－１６ＤＮＡ阳性的宫颈癌细胞株ＣａＳｋｉ中，观察该细胞在导入反义ＲＮＡ后其表型特征和在裸鼠体内致癌能力的变化。结果ＨＰＶ－１６Ｅ６Ｅ７反义ＲＮＡ能降低宫颈癌细胞ＣａＳｋｉ的生长速率，抑制其在软琼脂上的集落形成能力，并能明显地抑制其在裸鼠体内的致癌能力。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析发现ＨＰＶ－１６Ｅ６Ｅ７反义ＲＮＡ能使宫颈癌细胞中病毒ＨＰＶ－１６Ｅ６基因的表达水平降低。结论ＨＰＶ－１６Ｅ６Ｅ７反义ＲＮＡ能使宫颈癌细胞ＣａＳｋｉ恶性表型逆转；由其引起的癌细胞中ＨＰＶ－１６癌基因表达水平的降低可能是癌细胞表型逆转的原因之所在；ＨＰＶ－１６癌基因的表达水平对维持癌细胞的恶性表型起着重要作用。; 明利华周兰萍商铭孙亚洲; 关键词：逆转录病毒人乳头瘤病毒反义RNA 子宫颈肿瘤

Stathmin表达与食管鳞癌细胞对紫杉醇敏感性的机制研究被引量：1: 2016年; 目的微管解聚蛋白Stathmin在食管鳞癌中的表达水平显著升高,而紫杉醇是靶向微管的临床食管癌常用化疗药物,文中探讨Stathmin高表达对食管鳞癌细胞紫杉醇敏感性的影响。方法以食管鳞癌KYSE 510和KYSE 170细胞为研究对象,构建过表达STMN1基因的食管鳞癌细胞系KYSE 510-Stathmin、KYSE 170-Stathmin和对照细胞KYSE 510-Control、KYSE 170-Control;过表达Stathmin的设定为Stathmin过表达组,同时以转染空载体筛选获得的单克隆细胞KYSE 510-Control做为对照组。MTT实验和集落形成实验比较实验组细胞与对照组细胞对紫杉醇敏感性;流式分析检测紫杉醇处理后KYSE 510-Stathmin与KYSE 510-Control细胞凋亡情况;Western blot检测凋亡和自噬相关分子的变化情况。结果在KYSE510和KYSE 170细胞中外源表达STMN1基因,Stathmin蛋白水平显著高于对照细胞(P<0.01);紫杉醇浓度为50、100、250nmol/L处理24 h,KYSE 510-Control的抑制率均高于KYSE 510-Stathmin细胞(P<0.01);250 nmol/L的紫杉醇处理24、48、60h,KYSE 510-Control细胞抑制率均高于KYSE 510-Stathmin(P<0.01),在KYSE 170-Stathmin细胞中获得一致性结果;紫杉醇处理后,KYSE 510-Stathmin集落数量显著高于KYSE 510-Control(P<0.01);流式细胞仪检测KYSE 510-STMN1细胞凋亡比例低于KYSE 510-Control细胞[(11.90±0.78)%vs(29.63±3.26)%,P<0.05]。Western blot提示凋亡相关分子Caspase8和Caspase9活化片段增多。结论过表达Stathmin影响食管鳞癌细胞对微管相关化疗药物紫杉醇的敏感性。; 韩改净颜露牛芳斐刘芳周兰萍赵晓航许杨; 关键词：STATHMIN 食管鳞状细胞癌紫杉醇

Cyfra21-1和鳞状细胞癌抗原对食管鳞状细胞癌的诊断和临床意义被引量：5: 2015年; 目的:探讨血清肿瘤标志物角化素蛋白片段19(Cyfra21-1)和鳞状细胞癌抗原(squamous cell carcinoma antigen,SCC)对食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)早期诊断和临床意义的影响.方法:应用酶联免疫吸附法(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)检测了食管鳞癌、不典型增生和健康对照血清中Cyfra21-1及SCC水平;应用电发光免疫测定法(electrochemiluminescence immunoassay,ECLIA)和微粒酶联免疫测定法(microparticle enzyme immunoassay,MEIA)检测了50例食管鳞癌和139例健康对照血清中SCC水平.结果:与健康对照组相比,Cyfra21-1在食管不典型增生和食管癌患者血清中高表达(P<0.05).SCC在食管不典型增生和食管癌患者血清中表达升高,与健康对照相比差异具有显著性(P<0.05).伴有淋巴结转移的食管癌患者血清Cyfra21-1水平显著高于无转移组(P=0.005).而血清Cyfra21-1和SCC水平与患者年龄、性别、肿瘤部位、分化程度、肿瘤大小和TNM分期等特征无关.化学发光法定量检测Cyfra21-1和SCC表达水平并计算曲线下面积(area under curve,AUC),结果提示联合检测Cyfra21-1和SCC血清标志诊断食管癌效果(AUC=0.777)优于单独检测Cyfra21-1(AUC=0.757)或SCC(AUC=0.661)的效果.化学发光与ELISA法检测血清Cyfra21-1和SCC表达水平结果一致.结论:血清Cyfra21-1和SCC定量检测可用于食管鳞癌的辅助诊断,联合检测可提高诊断的敏感性.; 贾坤李薇蔡梦周兰萍刘芳赵晓航; 关键词：CYFRA21-1 鳞状细胞癌抗原食管鳞状细胞癌

血清饥饿对结肠癌HCT116细胞外泌体分泌的影响被引量：4: 2016年; 目的:本研究尝试使用添加无外泌体血清(E x o s o m e-d e p l e t e d F B S)的培养基培养细胞并提取外泌体,比较无外泌体血清和传统的无血清两种不同的培养条件对结肠癌H C T116细胞外泌体分泌的影响,旨在优化外泌体提取条件,使之有利于后续功能研究.方法:采用提取前24 h无血清和添加无外泌体血清培养基培养结肠癌细胞,普通光学显微镜下观察两种培养条件下细胞的生长和形态,用超速离心法分步提取分泌到细胞培养上清中的外泌体,透射电子显微镜下观察外泌体的形态,蛋白免疫印迹法分析外泌体标志蛋白,以及纳米颗粒追踪计数分析外泌体大小和含量.结果:与无血清培养条件相比,添加无外泌体血清培养的HCT116细胞生长状态良好,细胞无明显死亡现象.两种培养条件分泌的外泌体形态相近,均呈圆形或椭圆形,由脂质双分子层包裹的小囊泡,直径为40-100 nm.无外泌体血清培养条件分泌的外泌体大约是无血清培养的6倍,二种培养条件下提取的外泌体直径均为90 nm左右,与电镜结果一致.两种培养条件提取的外泌体中均检测到HSP70和CD63外泌体标志蛋白.结论:添加无外泌体血清培养HCT116细胞分泌的外泌体与无血清培养相比无明显差异,但添加无外泌体血清培养的细胞状态比无血清培养的细胞状态好,外泌体的分泌可能更接近生理条件下的生长环境,分泌的外泌体数量更多,因此无外泌体血清培养条件较无血清培养更适合结肠癌来源外泌体的提取和研究.; 高佳佳李薇鞠强周兰萍赵晓航; 关键词：外泌体结肠癌血清饥饿

食管鳞癌肿瘤相关抗原磷酸甘油酸激酶1的鉴定被引量：5: 2008年; 目的:鉴定新的食管鳞癌肿瘤相关抗原.方法:食管癌EC0156细胞总蛋白先经亚组分预分离,有效富集胞质、胞膜和胞核等组分蛋白;胞质组分蛋白经SDS-PAGE分离后分别与食管癌患者血清或健康志愿者血清共孵育,分离血清结合蛋白条带;胶内酶解阳性蛋白条带,肽段经色谱分离后用SynaptTM HDMS质谱鉴定.候选蛋白进一步Western blot经免疫组化验证.结果:总蛋白经亚组分分离后,不同组分蛋白均得到有效富集.食管癌患者血清能与EC0156细胞胞质蛋白结合,即选择性识别肿瘤相关抗原.其中,43kDa蛋白条带与食管癌血清(41.4%,12/29)和对照(3.6%,1/28)结合阳性率具有明显差异.从该蛋白条带中共鉴定到磷酸甘油酸激酶、β-actin、蛋白酶体26s亚基、S-腺苷高半胱氨酸水解酶和磷酸核糖酰氨基咪唑羧化酶5个高可信度蛋白.磷酸甘油酸激酶(PGK1)定位于胞质和胞核,在食管癌组织中高表达(69.23%,18/26).结论:改良血清蛋白质组分析策略(mSERPA)可有效分离鉴定肿瘤相关抗原.PGK1是食管癌候选肿瘤相关抗原,在食管癌发生发展中可能发挥重要作用.; 高红军周兰萍毛友生王伟乔媛媛刘芳蔡毅然赵晓航; 关键词：食管鳞癌肿瘤相关抗原

食管鳞癌clusterin表达及其临床意义被引量：1: 2010年; 目的:探讨食管鳞癌组织clusterin表达和单纯手术治疗前后外周血clusterin含量变化与食管鳞癌临床参数的相关性.方法:RT-PCR分析5对食管鳞癌及其远端切缘食管上皮中clusterin基因mRNA表达水平;ELISA分析41例单纯手术治疗食管鳞癌患者治疗前后的血清clusterin蛋白表达水平及其与临床特征的相关性.结果:与正常食管上皮相比食管鳞癌组织中clusterin基因表达显著下降或缺失.食管鳞癌患者术前血清中clusterin含量明显低于术后血清含量(3.23mg/Lvs25.71mg/L,P<0.0001).食管鳞癌患者术前血清clusterin含量与肿瘤大小相关(P<0.01),而与年龄、性别、分化程度、肿瘤分期、淋巴结转移,以及总蛋白、白蛋白、血糖、血脂和总胆红素浓度无关(r=-0.1334,-0.1602,0.2413,0.0389,-0.2882,均P>0.05).结论:Clusterin基因在食管鳞癌组织中表达明显下调或缺失,血清clusterin含量明显降低,提示在食管鳞状细胞癌中clusterin基因可能具有潜在的抑癌基因作用,动态检测外周血clusterin含量有助于判断食管癌进展.; 宋振梅孙玉琳毛友生刘芳周兰萍赵晓航; 关键词：食管鳞状细胞癌 CLUSTERIN 双向电泳

一种自身抗原表位、其编码基因及其用途: 本发明涉及免疫化学、蛋白质组学和肿瘤免疫领域。具体地涉及一种自身抗原表位、其编码基因及其用途。更具体地，涉及人组织蛋白酶D(cathepsin D)抗原表位区及其编码基因，以及这种多肽在鉴定胰腺癌患者血清中自身抗体中的用...; 赵晓航何平刘飞孙玉琳刘芳周兰萍谢鹏张金强安怀杰李潜

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周兰萍

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