周国华
- 作品数：39 被引量：75H指数：6
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金美国中华医学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 全人源抗肝癌噬菌体单链抗体的筛选与鉴定被引量：6
- 2008年
- 目的:构建人源抗肝癌噬菌体单链抗体库,从中筛选抗肝癌单链抗体(scFv),并对其特异性进行鉴定。方法:采用体外致敏法和EBV转化技术联合噬菌体展示技术构建噬菌体抗体库。对初级抗体库进行亲和富集及ELISA筛选,获得的阳性克隆进行免疫组化鉴定并测序。结果:scFv基因与载体连接后得到库容量为1.0×108的初级噬菌体抗体库。对抗体库进行3轮正负淘选和富集后,随机挑取2798个克隆进行ELISA,发现3个克隆对HepG2呈强阳性反应,而与QSG-7701等人正常细胞系呈弱阳性或不反应。对克隆SA3进行免疫细胞化学鉴定,结果与ELISA一致。免疫组织化学鉴定表明SA3与肝癌组织和肝组织阳性率的差别有统计学意义。结论:构建了库容量达1×108的全人源抗肝癌噬菌体抗体库。通过淘选富集、ELISA和免疫组织化学鉴定获得特异性较强的噬菌体克隆,为肝癌的临床诊断及导向治疗奠定了基础。
- 黄建肖艳童永清郭锋杰周国华李跃辉胡锦跃李官成
- 关键词：EB病毒转化噬菌体抗体库单链抗体
- 骨髓中表达VEGFR—1的造血前体干细胞在肝细胞癌肺转移中的表达及临床意义
- 目的肝细胞癌是我国常见恶性肿瘤之一,每年约有23万人死于肝癌,其死亡率位居我国恶性肿瘤第二位,手术切除是肝癌获得根治的最好手段,但即使是根治性切除,5年内仍约有70%的病人出现复发转移,转移复发已成为攻克癌症最重要的难关...
- 左朝晖欧阳永忠曾亮周国华李跃辉谢平丽
- 用单克隆抗体检测结直肠癌病人血清中肿瘤相关抗原的研究被引量：2
- 1995年
- 自1975年kolher等发明杂交瘤—单克隆抗体（单抗）技术以来,国内外已生产了几种抗肠癌的单克隆抗体,并应用于癌症病人的血清学检测,其中单抗NS19—9,C50识别的CA19—9和CA50可作为胃肠道血清学检测的肿瘤标志物。孙去病等制备的单抗Hb3对结直肠癌有较好的特异性。
- 李小玲周国华李官成孙去病
- 关键词：结直肠癌肿瘤相关抗原抗体检测单克隆抗体病人血清良性疾病夹心ELISA法
- 鼻咽癌抗独特型抗体的基础和Ⅰ期临床研究
- 1996年
- 鼻咽癌抗独特型抗体的基础和Ⅰ期临床研究谢鹭李小玲杨剑飞李官成朱建高周国华戴和桥雷衍凡孙去病由于抗独特型抗体（抗Ⅰｄ抗体）在免疫网络中的特殊地位，它在肿瘤免疫治疗及预防中的潜力引起了广泛关注。国外已对几种实体瘤制备了相应抗Ⅰｄ抗体，并已试用于临床［１，...
- 谢鹭李小玲杨剑飞李官成朱建高周国华戴和桥雷衍凡孙去病
- 关键词：鼻咽肿瘤抗体
- 体内体外联合免疫法制备抗鼻咽癌单克隆抗体被引量：3
- 1999年
- 目的】获得高特异性的抗鼻咽癌单克隆抗体。【方法】以湖南鼻咽癌细胞株HNE2细胞作免疫原 ,经体内体外联合免疫方法获得免疫脾细胞 ,并与SP2 /0骨髓瘤细胞融合获得抗鼻咽癌单克隆抗体的杂交瘤细胞系 ,用ELISA、免疫组化筛选阳性克隆。【结果】获得 10株稳定分泌抗鼻咽癌单克隆抗体的杂交瘤 ,其中HNL1和HNL5用免疫组化检测对鼻咽癌组织反应的阳性率分别为 6 0 .0 %和 6 5 .0 %。【结论】抗鼻咽癌单克隆抗体HNL1。
- 李官成朱建高周国华孙去病
- 关键词：鼻咽癌单克隆抗体免疫法
- 全人源抗结肠癌噬菌体单链抗体库的构建及筛选鉴定被引量：2
- 2010年
- 采用体外致敏法和EBV转化技术联合噬菌体展示技术构建噬菌体呈现型单链抗体库.从中筛选获得阳性克隆,并进行ELISA、免疫组化及测序鉴定.结果得到了库容为4.0×109的初级噬菌体抗体库,全长ScFv(Single-chain Fv)基因的插入率为90%.筛选获得两个克隆对HT-29呈强阳性反应,而与HFF等人正常细胞系呈弱阳性或阴性反应.免疫组织化学鉴定表明克隆F12与结肠癌组织和结肠癌旁组织阳性率的差别有统计学意义.由上述结果可见构建库容量达4.0×109的全人源抗结肠癌噬菌体单链抗体库是完全可行的,经筛选及鉴定获得了特异性较强的噬菌体克隆,为结肠癌的临床导向诊断和治疗奠定了基础.
- 谢平丽李官成李艳东周国华李跃辉郭锋杰王甲甲
- 关键词：EB病毒转化噬菌体抗体库结肠癌单链抗体
- GOLPH2的原核表达及单克隆抗体的制备
- 背景:研究发现II型高尔基体膜蛋白(GOLPH2)与肝癌的发生发展关系密切,不管是由病毒感染引起还是由非病毒原因引起的肝病患者中,GOLPH2水平均可能上调。同样发现在急性肝炎和进行性肝硬化患者中,GOLPH2也体现出高...
- 鞠强李峰李跃辉赵艳洁刘艳红陈琳周国华谢平丽李官成
- 关键词：杂交瘤单克隆抗体
- 鼻咽癌抗独特型抗体的基础和初期临床研究
- 1995年
- 基于抗独特型抗体在免疫网络中的特殊地位，尤其是抗独特型抗体在肿瘤免疫治疗及预防中的潜力引起了广泛兴趣，国外已对多种实体瘤制备了相应抗独特型抗体．并已(或准备)试用于临床。但未见有鼻咽癌抗独特型抗体的研究报导。鼻咽癌为我国有区域性分布的高发肿瘤。
- 谢鹭李小玲杨剑飞李官成王飒朱建高周国华郭敏孙去病雷衍凡
- 关键词：抗独特型抗体鼻咽癌肿瘤免疫治疗实体瘤
- 用^(99m)Tc标记大肠癌单克隆抗体的放射免疫定位研究被引量：1
- 1997年
- 目的：Ｈｂ３是一株针对大肠癌相关抗原ＣＡ－Ｈｂ３的ＩｇＭ型单克隆抗体，免疫组织化学显示与大肠癌组织反应的阳性率为８６．４％，与正常大肠组织无反应。为确定Ｈｂ３用于放射免疫定位诊断大肠癌的可能性和实用价值进行了本研究。方法：采用羟基磷灰石层析法纯化抗体，冷消化法制备片段Ｆ（ａｂ′）２，标记方法采用ＳｎＣｌ２·２Ｈ２Ｏ为还原剂、直接法标记９９ｍＴｃ，所用放射性剂量为１５～４０ｍＣｉ，显像用ＳＰＥＣＴ，显像时间为２．５～４８小时，共进行了１０例放射免疫显像，其中完整Ｈｂ３显像７例，Ｆ（ａｂ′）２显像３例，病人都经组织病理确诊。结果：纯化抗体及Ｆ（ａｂ′）２片段纯度符合要求。９９ｍＴｃ标记率为８０．６～９１．５％。ＳＰＥＣＴ显像，在使用完整Ｈｂ３的７例病人中，阳性３例，阴性４例；在使用Ｆ（ａｂ′）２的３例病人中，阳性２例，阴性１例。结论：Ｈｂ３及片段用于临床放射免疫定位诊断大肠癌有一定的实用价值，其中Ｆ（ａｂ′）２片段的效果较佳。
- 胡锦跃苏见知皮执民朱建高周国华孙去病
- 关键词：大肠癌放射性核素显像锝99M放射免疫法
- 抗大肠癌噬菌体单链抗体的筛选及初步鉴定被引量：8
- 2001年
- 应用 3种方法 (肿瘤细胞膜表面和胞内、裸鼠体内和组织切片 ) ,从全人源化的抗大肠癌噬菌体初级抗体库中筛选肿瘤特异性的噬菌体单链抗体 (Sc Fv) .在肿瘤细胞经过 3轮亲和选择 ,回收结合胞膜和内化进入胞内的噬菌体 ,得到抗肿瘤噬菌体单链抗体的富集倍数为 430倍 ;荷瘤裸鼠体内注入初级抗体库后 ,在不同时刻点处死裸鼠 ,回收肿瘤组织内的噬菌体 ,其回收率在 2 4 h时最高 ;初级抗体库与大肠癌组织切片亲和选择后 ,从冰冻组织切片上比从石蜡组织切片上回收得到的噬菌体高出约 1 .6倍 .从上述方法挑选单克隆 ,经 ELISA筛选抗大肠癌阳性噬菌体克隆株 ,分离得到 5个对大肠癌细胞反应较好的单克隆噬菌体单链抗体 .进一步用细胞 ELISA检测对各种肿瘤细胞的特异性反应 ,其中 4个对大肠癌细胞有很好的特异性 ,1个克隆对所有肿瘤细胞均有反应 .因此 ,3种方法用于筛选抗大肠癌噬菌体初级抗体库是有效的 ,具有推广和应用价值 .
- 朱建高胡锦跃李官成李跃辉周国华李小玲孙去病
- 关键词：噬菌体呈现技术大肠癌单链抗体噬菌体抗体
