周国华
- 作品数：39 被引量：77H指数：6
- 供职机构：中南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金美国中华医学基金教育部留学回国人员科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 全人源抗肝癌噬菌体单链抗体的筛选与鉴定被引量：6
- 2008年
- 目的:构建人源抗肝癌噬菌体单链抗体库,从中筛选抗肝癌单链抗体(scFv),并对其特异性进行鉴定。方法:采用体外致敏法和EBV转化技术联合噬菌体展示技术构建噬菌体抗体库。对初级抗体库进行亲和富集及ELISA筛选,获得的阳性克隆进行免疫组化鉴定并测序。结果:scFv基因与载体连接后得到库容量为1.0×108的初级噬菌体抗体库。对抗体库进行3轮正负淘选和富集后,随机挑取2798个克隆进行ELISA,发现3个克隆对HepG2呈强阳性反应,而与QSG-7701等人正常细胞系呈弱阳性或不反应。对克隆SA3进行免疫细胞化学鉴定,结果与ELISA一致。免疫组织化学鉴定表明SA3与肝癌组织和肝组织阳性率的差别有统计学意义。结论:构建了库容量达1×108的全人源抗肝癌噬菌体抗体库。通过淘选富集、ELISA和免疫组织化学鉴定获得特异性较强的噬菌体克隆,为肝癌的临床诊断及导向治疗奠定了基础。
- 黄建肖艳童永清郭锋杰周国华李跃辉胡锦跃李官成
- 关键词：EB病毒转化噬菌体抗体库单链抗体
- 骨髓中表达VEGFR—1的造血前体干细胞在肝细胞癌肺转移中的表达及临床意义
- 目的肝细胞癌是我国常见恶性肿瘤之一,每年约有23万人死于肝癌,其死亡率位居我国恶性肿瘤第二位,手术切除是肝癌获得根治的最好手段,但即使是根治性切除,5年内仍约有70%的病人出现复发转移,转移复发已成为攻克癌症最重要的难关...
- 左朝晖欧阳永忠曾亮周国华李跃辉谢平丽
- 用单克隆抗体检测结直肠癌病人血清中肿瘤相关抗原的研究被引量：2
- 1995年
- 自1975年kolher等发明杂交瘤—单克隆抗体（单抗）技术以来,国内外已生产了几种抗肠癌的单克隆抗体,并应用于癌症病人的血清学检测,其中单抗NS19—9,C50识别的CA19—9和CA50可作为胃肠道血清学检测的肿瘤标志物。孙去病等制备的单抗Hb3对结直肠癌有较好的特异性。
- 李小玲周国华李官成孙去病
- 关键词：结直肠癌肿瘤相关抗原抗体检测单克隆抗体病人血清良性疾病夹心ELISA法
- 鼻咽癌抗独特型抗体的基础和Ⅰ期临床研究
- 1996年
- 鼻咽癌抗独特型抗体的基础和Ⅰ期临床研究谢鹭李小玲杨剑飞李官成朱建高周国华戴和桥雷衍凡孙去病由于抗独特型抗体（抗Ⅰｄ抗体）在免疫网络中的特殊地位，它在肿瘤免疫治疗及预防中的潜力引起了广泛关注。国外已对几种实体瘤制备了相应抗Ⅰｄ抗体，并已试用于临床［１，...
- 谢鹭李小玲杨剑飞李官成朱建高周国华戴和桥雷衍凡孙去病
- 关键词：鼻咽肿瘤抗体
- 体内体外联合免疫法制备抗鼻咽癌单克隆抗体被引量：4
- 1999年
- 目的】获得高特异性的抗鼻咽癌单克隆抗体。【方法】以湖南鼻咽癌细胞株HNE2细胞作免疫原 ,经体内体外联合免疫方法获得免疫脾细胞 ,并与SP2 /0骨髓瘤细胞融合获得抗鼻咽癌单克隆抗体的杂交瘤细胞系 ,用ELISA、免疫组化筛选阳性克隆。【结果】获得 10株稳定分泌抗鼻咽癌单克隆抗体的杂交瘤 ,其中HNL1和HNL5用免疫组化检测对鼻咽癌组织反应的阳性率分别为 6 0 .0 %和 6 5 .0 %。【结论】抗鼻咽癌单克隆抗体HNL1。
- 李官成朱建高周国华孙去病
- 关键词：鼻咽癌单克隆抗体免疫法
- 鼻咽癌抗独特型抗体的基础和初期临床研究
- 1995年
- 基于抗独特型抗体在免疫网络中的特殊地位，尤其是抗独特型抗体在肿瘤免疫治疗及预防中的潜力引起了广泛兴趣，国外已对多种实体瘤制备了相应抗独特型抗体．并已(或准备)试用于临床。但未见有鼻咽癌抗独特型抗体的研究报导。鼻咽癌为我国有区域性分布的高发肿瘤。
- 谢鹭李小玲杨剑飞李官成王飒朱建高周国华郭敏孙去病雷衍凡
- 关键词：抗独特型抗体鼻咽癌肿瘤免疫治疗实体瘤
- 用^(99m)Tc标记大肠癌单克隆抗体的放射免疫定位研究被引量：1
- 1997年
- 目的：Ｈｂ３是一株针对大肠癌相关抗原ＣＡ－Ｈｂ３的ＩｇＭ型单克隆抗体，免疫组织化学显示与大肠癌组织反应的阳性率为８６．４％，与正常大肠组织无反应。为确定Ｈｂ３用于放射免疫定位诊断大肠癌的可能性和实用价值进行了本研究。方法：采用羟基磷灰石层析法纯化抗体，冷消化法制备片段Ｆ（ａｂ′）２，标记方法采用ＳｎＣｌ２·２Ｈ２Ｏ为还原剂、直接法标记９９ｍＴｃ，所用放射性剂量为１５～４０ｍＣｉ，显像用ＳＰＥＣＴ，显像时间为２．５～４８小时，共进行了１０例放射免疫显像，其中完整Ｈｂ３显像７例，Ｆ（ａｂ′）２显像３例，病人都经组织病理确诊。结果：纯化抗体及Ｆ（ａｂ′）２片段纯度符合要求。９９ｍＴｃ标记率为８０．６～９１．５％。ＳＰＥＣＴ显像，在使用完整Ｈｂ３的７例病人中，阳性３例，阴性４例；在使用Ｆ（ａｂ′）２的３例病人中，阳性２例，阴性１例。结论：Ｈｂ３及片段用于临床放射免疫定位诊断大肠癌有一定的实用价值，其中Ｆ（ａｂ′）２片段的效果较佳。
- 胡锦跃苏见知皮执民朱建高周国华孙去病
- 关键词：大肠癌放射性核素显像锝99M放射免疫法
- 抗人心肌肌钙蛋白T杂交瘤细胞系的建立及初步鉴定
- 2007年
- 【目的】建立稳定分泌抗人心肌肌钙蛋白T(cardic troponin,cTnT)单克隆抗体的杂交瘤细胞株。【方法】以纯化的cTnT(分子质量为3.7×107)加福氏佐剂免疫8周龄雌性Balb/c小鼠,取免疫脾细胞与骨髓瘤细胞sp2/0融合,以酶联免疫吸附法(ELISA)筛选。阳性克隆以有限稀释法进行克隆化、Western blot法鉴定所制备的单克隆抗体。【结果】共筛出4株稳定分泌抗cTnT单克隆抗体的杂交瘤细胞株,所分泌的抗体效价高达10-6,经免疫学鉴定其分泌的免疫球蛋白类型均为IgG1、κ型,且Western blot鉴定4株细胞株所分泌的抗体均与人cTnT均有很好的反应性。【结论】获得4株稳定分泌抗人cTnT单克隆抗体的杂交瘤细胞株,为cTnT的临床研究提供了可能性。
- 李跃辉周国华胡锦跃谢平丽李官成
- 关键词：肌钙蛋白杂交瘤
- 鼻咽癌人源抗独特型单链抗体的制备及筛选被引量：18
- 2004年
- 背景与目的:抗独特型抗体作为肿瘤抗原替代物可用于肿瘤治疗,这已在临床试验中得到证实。但由于目前所使用的抗独特型抗体多为鼠源性,用于人体可产生人抗鼠抗体反应,从而影响疗效。本实验拟构建噬菌体人源抗独特型抗体库,并从中筛选出能模拟鼻咽癌相关抗原的β型抗独特型单链抗体scFv(Ab2βscFv),以解决鼠源性抗独特型抗体用于临床所产生的人抗鼠抗体反应。方法:体外致敏并用EB病毒(Epstein-Barrvirus,EBV)转化鼻咽癌患者的外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC),用RT-PCR分别扩增VH和VL基因并连接成scFv基因,将scFv基因与载体fUSE5连接后,转化大肠杆菌MC1061,构建噬菌体呈现型scFv库。在用单抗FC2对文库进行4轮筛选后,用SandwichELISA和结合抑制法从中筛选出β型Ab2scFv。结果:用单抗FC2体外致敏并经EBV转化的10例鼻咽癌患者的PBMC中,8例有鼻咽癌抗独特型抗体产生。经PCR分别扩增出5种VH(γ、μ)和7种VL(κ、λ)基因,经连接组成14种scFv基因。在与载体连接后,导入大肠杆菌MC1061,得到库容为1.5×108的初级噬菌体抗独特型抗体库。经富集筛选后,从中随机挑取270个克隆进行ELISA筛选,得到91个Ab2scFv单克隆,阳性率为33.7%。再用结合抑制法从中初步筛选出5个可能为β型的Ab2scFv。
- 何小鹃李官成朱建高李跃辉周国华
- 关键词：鼻咽癌噬菌体呈现技术EB病毒免疫治疗
- 用抗独特型疫苗主动免疫治疗鼻咽癌病人的临床研究被引量：2
- 2002年
- 目的探讨抗独特型疫苗主动免疫治疗鼻咽癌病人的抗肿瘤效应.方法用两株具有鼻咽癌相关抗原内影像的抗独特型单克隆抗体2H4、5D3,经氢氧化铝凝胶沉淀法制备成抗独特型疫苗Alum-2H4、Alum-5D3,对19例晚期鼻咽癌放疗病人作主动免疫治疗,9例放疗加生理盐水注射为对照组.用ELISA检测治疗前后病人血清抗体和细胞因子水平.用原位Northern杂交检测外周血单个核细胞(PBMC)IL-2 mRNA的表达.结果接受Alum-2H4或Alum-5D3治疗的病人无一例有过敏或其他毒副反应,血清中均检测到抗抗独特型抗体(Ab3)、抗肿瘤抗体(Ab1')水平均有不同程度的增高,但也产生了人抗鼠抗体(HAMA).血清细胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-2水平在大多数治疗组病人中升高.而对照组Ab1'、IFN-γ、TNF-α及IL-2血清水平均未升高.病人血清的IL-2含量与PBMC IL-2 mRNA的表达呈正相关关系(r=0.8829).结论 (1)疫苗化的2H4和5D3用于晚期鼻咽癌病人的主动免疫治疗是安全的.(2)抗独特型疫苗可作为模拟抗原激发鼻咽癌病人的主动免疫应答,产生抗肿瘤效应.
- 李官成谢鹭周国华孙去病符红普周建华
- 关键词：鼻咽癌抗独特型疫苗主动免疫治疗
