周琪
- 作品数：20 被引量：149H指数：9
- 供职机构：东北农业大学生物工程系更多>>
- 发文基金：霍英东青年教师基金黑龙江省杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 家兔显微受精影响因素及显微受精胚胎超微结构被引量：13
- 1997年
- 以家兔为实验动物，利用胞质内精子注射技术和透明带下精子注射技术，对卵龄、精子获能、注射针管口径、操作室温和操作方法等影响显微受精的因素以及显微受精胚胎的超微结构进行了研究。结果显示：（１）胞质内单精子注射，ｈＣＧ后１５～１７ｈ卵的存活率为６９．４％，显著（Ｐ＜０．０５）高于ｈＣＧ后１９～２１ｈ卵的存活率（４７．３％）；而受精率和卵裂率（分别为５２．９％和４１．２％）分别低于ｈＣＧ后１９～２１ｈ卵的受精率（６５．４％）和卵裂率（４６．２％）。（２）将５～１０个在ＤＭ液中获能１２～１３ｈ的精子注入卵子的透明带下，ｈＣＧ后１９～２１ｈ卵的受精率（４９．２％）和卵裂率（４０．７％）分别显著（Ｐ＜０．０５）高于ｈＣＧ后１５～１７ｈ卵的受精率（２８．６％）和卵裂率（２２．５％）。（３）以ｍＨＩＳ１５ｍｉｎ＋ｍＤＭ３～４ｈ方法和ＨＩＳ１５ｍｉｎ＋ＤＭ５～６ｈ方法获能的精子带下注射的受精率（分别为６３．６％和５１．０％）和卵裂率（分别为５４．５％和４３．１％）分别显著（Ｐ＜０．０５）高于或略高于其他方法获能的精子带下注射的受精率和卵裂率。（４）内径７μｍ的注射针管用于胞质内单精子注射，卵的存活率（６９．４％）极显著（Ｐ＜０?
- 李子义周琪邹啸环邹啸环谭景和
- 关键词：显微受精精子获能胚胎超微结构家兔
- 小鼠精子注入兔卵母细胞受精研究被引量：7
- 1999年
- 利用显微操作仪将小鼠精子注入家兔卵母细胞的胞质内和透明带下,对鼠兔异种精卵互作和异种受精胚胎的发育进行了研究,并对注射精子的数量及卵的体外成熟时间等影响鼠兔异种显微受精的因素进行了探讨,结果如下:(1)将小鼠精子分别注入兔卵胞质内和透明带下,均能激活兔卵母细胞,导致精核解聚和原核形成;(2)小鼠精子注入兔卵胞质内和透明带下受精,杂种胚胎体外培养能发育到8-细胞期;(3)鼠兔异种受精4-细胞胚胎染色体标本制备观察结果表明,它们为正常二倍体;(4)鼠兔异种受精4-细胞胚胎的超微结构观察结果表明,它们极近似兔正常4-细胞胚胎的超微结构;(5)将小鼠精子注入兔卵透明带下,注射5—10个精子组卵的受精率(32.4%)和卵裂率(16.2%)均高于注射单个精子组的,但二组间差异不显著(P>0.05);DM+15%NCS液中体外成熟培养11—12h兔卵透明带下注入1—2个小鼠精子后的受精率(42.3%)和卵裂率(30.8%)均高于体外成熟培养24—25h组的,但二组间差异未达到显著水平(P>0.05)。
- 李子义谭景和周琪孙兴参李光鹏刘忠华
- 关键词：哺乳动物受精小鼠精子
- 家兔胚胎细胞核移植与连续移植
- 1999年
- 将发育不同时期的兔胚和移核胚的卵裂球细胞核与去核的成熟卵母细胞共同组成移核胚，通过中间受体培养和移植实验检验胚胎的发育能力。结果表明，（１）兔囊胚之前各个时期的胚胎细胞核均可使移核胚发育到囊胚；（２）胚胎极化前后的卵裂球参与组成的移核胚发育到囊胚的比例无显著差异。但极化后 ６４细胞胚的卵裂球与去核卵母细胞的融合率低于极化前的 ８细胞胚胎卵裂球；（３）兔 １６细胞胚与去核的卵母细胞组成的移核胚可以发育到期，产仔率为 ３．１６％ ；（４）兔移核胚卵裂球用于连续核移植，其后 ２ 代均可发育成囊胚，其中第 １ 代移核胚与第 ２ 代移核胚发育率相似，但显著高于第 ３ 代移核胚；（５）兔移核胚和各代连续移核胚卵裂球与去核卵的融合率无显著差异。
- 周琪李子义谭景和文兴豪孙兴参刘忠华贺桂馨李德雪
- 关键词：家兔胚胎细胞核移植极化
- 昆明小鼠早期胚胎发育时程被引量：18
- 1999年
- 以昆明种小鼠为对象,在严格控光条件下,对交配后阴道栓形成时间、排卵时间、精子入卵与原核形成时间以及2-细胞至囊胚的发育时程等进行了系统研究。结果如下:(1)从注射hCG 当天(0 d)21:00(hCG后6 h)至次日(第1 天)1:00(hCG 后10 h),有84.2% 的超排小鼠形成阴道栓;(2)大部分小鼠(66% ～100% )排卵从hCG后第1 天2:00(hCG 后11 h)开始,至3:00～4:00(hCG后12～13 h)结束;(3)从hCG 后第1 天7:00(hCG后16 h)至11:00(hCG 后20 h),小鼠卵受精率为5.6% ～82.4% ;(4)从hCG后第1 天7:00(hCG 后16 h)至11:00(hCG 后20 h),原核形成率为4.4% ～67.5% ;(5)从hCG 后第1 天21:00(hCG 后30 h)至第2 天1:00(hCG后34 h),2-细胞形成率为14.9% ～83.1% ;hCG后第2 天19:00(hCG后52 h)至23:00(hCG后56 h),4-细胞形成率为12.9% ～85.7% ;hCG 后第3 天6:00(hCG后63 h)至10:00(hCG 后67 h),8-细胞形率为12.8% ～88.2% ;(6)从hCG 后第3 天10:00(hCG 后67 h)至24:00(hCG后81 h),8～16 细胞(早期桑葚胚)形成率由100% 下降到42.9% ;从hCG 后第3 天24:00(hCG 后81 h)至第4 天4:00(hCG后85 h),17～32 细胞(晚期桑葚胚)形成率由57.1% 增加到90.0% ;(7)从hCG 后第4 天6:00(hCG后87 h)至8:00(hCG后89 h),囊胚形成率从11.4% 上升到60.9% 。
- 李子义谭景和孙兴参刘忠华李光鹏周琪贺桂馨
- 关键词：早期胚胎小鼠胚胎发育
- 小鼠2－细胞胚电融合技术影响因素的研究被引量：4
- 1994年
- 以小鼠２－细胞胚为材料，研究电融合请参数。以Ｍ２液为融合液时，除在０．３１ｋＶ／ｃｍ，１２８０ｓ，１次脉冲条件下获１００％融合率外，其他条件均造成较多的胚胎溶解。而持续时间在１０～１２８０ｓ范围内，以０．３ｍｏｌ／Ｌ甘露醇液为融合液，电场强度为０．３１～２．０４ｋＶ／ｃｍ条件下；及以０．２６ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液为融合液，电场强度为０．３１～１．４１ｋＶ／ｃｍ范围内时可获较高的融合率。实验表明：在０．４７ｋＶ／ｃｍ电场条件下，蔗糖液与甘露醇液的渗透压对融合率无显著的影响；电场强度为２．０４ｋＶ／ｃｍ，以高渗甘露醇液（０．３０ｍｏｌ／Ｌ）为融合液时，胚的融合率比等渗甘露醇液（０．２５ｍｏｌ／Ｌ）和低渗甘露醇液（０．２０ｍｏｌ／Ｌ）做融合液时的融合结果高，而胚的死亡率低。融合后的胚与对照２－细胞胚都可继续发育．４８ｈ后发生致密化，此时融合胚发育到４－细胞，对照组为８－细胞。根据０．２６ｍｏｌ／Ｌ蔗糖液做融合液时的结果，绘制一条获高融合率时电场强度与脉冲持续时间的关系曲线。
- 周琪谭景和徐立滨张秋明秦鹏春
- 关键词：电融合渗透压细胞融合
- 小鼠不同卵龄卵母细胞电刺激后第二极体形成和原核发育的研究被引量：12
- 1994年
- 实验以强度为0.45kV/cm,持续不同时间(80、160、320、640μs)的电脉冲刺激不同卵龄(注hCG后13、15、17、19小时)小鼠卵母细胞,观察电刺激后第二极体形成和原核发育情况。实验结果说明:(1)卵母细胞完全活化(形成原核)率随卵龄增加而明显升高,(2)电刺激小鼠卵母细胞也出现MⅢ现象,未活化卵母细胞形成第二极体(MⅢ)者随卵龄增加而明显增多;(3)电刺激活化小鼠卵母细胞在培养6—9小时之间仍有6.7％形成原核。
- 谭景和杨婵云周琪初振辉贺桂馨秦鹏春
- 关键词：卵母细胞电刺激原核
- 东北细毛羊发情和排卵规律的研究被引量：3
- 1994年
- 本实验系统观察了东北细毛羊的繁殖季节开始时间、发情周期长度、发情持续时间、排卵时间及早期胚胎发育进程等。结果表明：（１）在黑龙江地区大多数（７０．３％）东北细毛羊于７月２１日至８月９日开始发情季节，也即于夏至后１个月至５０ｄ内开始发情；（２）发情周期平均长度１６．６３±０．８４ｄ，８０％的羊为１６～１７ｄ，方差组分估计和Ｆ检验判断，发情周期长度在羊个体间和个体内的差异均不显著；（３）平均发情持续时间３８．３４±１３．７３ｈ，８５％的羊为２４～４８ｈ，方差组分估计和Ｆ检验证明，发情持续时间的个体差异显著且个体间差异显著大于个体内差异；（４）发情开始后２６～３５ｈ排卵；（５）发情５１ｈ胚胎处２．细胞期，６６～７２ｈ处４～６细胞期，７６～８１ｈ处８－细胞期。
- 谭景和刘瑞祥周琪贺桂馨张秋明徐丽滨张春生秦鹏春
- 关键词：发情排卵胚胎发育
- 家兔胚胎细胞核移植的研究
- 1998年
- 本研究以兔为实验材料，对细胞核过程中显微操作、电融合、电活化以及移核胚的培养等基本问题进行了研究。对兔进行PMSG－hCG超数排卵，收集成熟母细胞和16－细胞胚；后者经胰蛋白酶消化，去除胶膜和透明带，在不含Ca62+、Mg^2+的分离中分成单个卵裂球；然后，分别对两者做CB预处理；首次尝试采用WQilladsen法，去除卵母细胞核、并将单个卵裂球注入透明带，同时、与McGrath-Solter法进行比较；通过电融合使供体核进入去核的卵母细胞内；将所得移核胚在体外或在中间内体内培养并观察。结果表明：一、Willadsen法与McGrath-Solter法比较，核移植操作的成功率及以后的电融合率均无明显差异（Tab.1)。相对于后者，Willadsen法更简便、易于掌握并提高去核率。二、hCG超排注射后13－15h，观察卵母细胞发现：其中，67．8％保留有第一极体。此时的卵子若去除1／3胞质量，去核率可以达到58．3％。若推迟去核时间，第一极体退化，失去去核标志。三、比较不同电脉冲条件，发现强度为0．63kv/cm，持续160μs的一次电脉冲可获较高移核胚的融合率（70．8％）（Tab.2）；并可使61．1％的成熟卵母细胞活化。四、比较移核胚在体外和在中间有体内两种培养条件，前者只有34．6％能发育到6－8细胞期，而后者有23．0％能发育到桑椹胚或囊胚（Tab.3)。说明：需进一步优化家兔胚体外培养条件。
- 周琪谭景和等
- 关键词：家兔胚胎培养细胞核移植
- 核质比对家兔胚胎发育的影响被引量：17
- 1999年
- 通过显微操作和电融合方法人为改变原核期胚胎的核质比 ,比较异常核质比胚胎发育与正常胚胎发育的异同 .结果表明 :改变 (增加或减少 )原核期胚胎的核质比会使胚胎发育出现异常 ;虽然发育到囊胚的比例与正常胚胎无显著差异 (P >0 .0 5 ) ,而且囊胚形成的时间相似 ,但具有异常核质比的胚胎发育到囊胚时的细胞数较正常胚胎的细胞数少 .
- 周琪李子义谭景和文兴豪孙兴参刘宗华贺桂馨李德雪
- 关键词：家兔胚胎发育显微操作
- 卵龄和脉冲持续时间对小鼠卵母细胞电活化效果的影响被引量：22
- 1995年
- 实验研究了相同电场强度，一次脉冲条件下，不同脉冲持续时间和不同卵龄对小鼠卵母细胞电活化效果的影响。结果说明：（１）在场强０．４５ＫＶ／ｃｍ，一次脉冲持续时间为１０、２０和４０ｓ时，卵母细胞活化率很低，仅为９．８％、５． ５％和１２％；当脉冲持续８０、１６０、３２０、６４０和１２８０ｓ时，活化率明显升高，分别为３６．５％、５３．３％、５９．７％，５１．２％和３９．４％；脉冲持续时间对卵母细胞碎裂率影响不明显，但死亡率随脉冲持续时间延长有增加趋势。（２）在脉冲持续时间为１６０—６４０范围内，注射ｈＣＧ后１９和１７小时卵母细胞活化率（平均分别为６７．７％和５６．４％）明显高于注射ｈＣＧ后１３和１５小时卵母细胞活化率（平均３２．８％和４０.５％）。
- 谭景和周琪杨婵云孙兴参贺桂馨初振辉秦鹏春
- 关键词：小鼠卵母细胞脉冲持续时间
