呼锐
- 作品数:8 被引量:14H指数:2
- 供职机构:黑龙江八一农垦大学更多>>
- 发文基金:黑龙江省教育厅资助项目黑龙江省科技攻关计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 大肠杆菌外膜蛋白A在原核表达载体中的克隆表达被引量:5
- 2011年
- 对大肠杆菌的外膜蛋白A基因进行克隆,鉴定,并在原核系统中表达,为大肠杆菌重组疫苗的构建奠定基础。以大肠杆菌分离株308-2菌株基因组DNA为模板,用PCR法对基因ompA进行扩增,产物与T载体连接,经测序鉴定正确后与表达载体pET32a(+)连接构建表达ompA的重组质粒,将此重组质粒转化入表达宿主E coli Rosetta菌株内抽提质粒,酶切鉴定正确后对转化菌株以IPTG进行诱导后,离心,上清进行SDS-PAGE,将胶中蛋白转到硝酸纤维素薄膜上后进行western-blotting分析。测序结果显示,ompA为完整的编码区基因1 041 bp,编码347个氨基酸残基,蛋白相对分子质量约为37 kDa。原核表达产物经SDS-PAGE分析表明,以37℃、1 mM的IPTG诱导3 h,该基因表达效果最好,诱导产物是与理论值相符的60 kDa的融合蛋白。经western-blotting检测,表达的重组蛋白OmpA可与His抗体反应得到清晰且分子量正确的条带,表明表达的重组蛋白具有良好的反应原性。成功进行了大肠杆菌外膜蛋白ompA基因的克隆表达,为进一步研究其免疫保护作用及功能奠定了试验基础。
- 呼锐佟春玉崔玉东
- 关键词:大肠杆菌外膜蛋白克隆
- 大肠杆菌OmpA蛋白的表达及免疫保护作用
- 奶牛乳房炎是由多种非特定的病原微生物引起奶牛的常见病,是危害奶牛业的主要疾病之一。大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和链球菌是奶牛乳房炎的主要致病菌,约91%以上的病例是由这三种菌引起,其中肠杆菌群性乳房炎发病率高达33.6%,在...
- 呼锐
- 关键词:奶牛乳房炎原核表达免疫保护
- 文献传递
- 预防奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌和链球菌感染的融合蛋白GIT免疫原性研究
- 金黄色葡萄球菌和无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌是引起奶牛乳房炎最为常见的病原菌。研究表明,金黄色葡萄球菌Tra P-Isd B(137-361aa)融合蛋白能较好地预防小鼠金黄色葡萄球菌感染,停乳链球菌Gap C(1...
- 樊自尧呼锐孙虎男马金柱朱战波崔玉东
- 关键词:金黄色葡萄球菌停乳链球菌乳房链球菌免疫原性
- 无乳链球菌Sip蛋白的表达及免疫保护作用研究
- 无乳链球菌(S.agalactiae)为链球菌科、链球菌属细菌,人医临床常以B群链球菌(GBS)相称。无乳链球菌是一种能够引起新生儿败血症、脑膜炎、心肌炎、肺炎、妇女妊娠围产期相关感染及成人感染(如糖尿病、恶性肿瘤和免疫...
- 穆飞飞孙龚刘乐锋李闰婷邓洪宇佟春玉姜海芳陈亮呼锐朱战波崔玉东
- 文献传递
- 微生态制剂对籽鹅盲肠菌群变化的影响被引量:1
- 2008年
- 选用120只(公母各半)健康1日龄籽鹅,随机分成3组(对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组),每组40只。对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ组在基础日粮中分别添加1.5,1.0mL/kg微生态制剂。结果表明,盲肠中双歧杆菌在60~90d、乳酸杆菌在30~90d的菌群数量试验组均高于对照组(P!0.05);大肠杆菌在30~90d、沙门氏菌在60~90d菌群数量均低于对照组(P!0.05)。平均日耗料量和料肉比试验组低于对照组(P!0.05),试验Ⅱ组平均日增重比对照组提高27.8%。说明微生态制剂能够调节籽鹅盲肠主要微生态菌群,提高机体免疫力和生长性能。
- 李馨董巍张玉杰呼锐
- 关键词:籽鹅微生态制剂肠道菌群
- 黑龙江地区断奶仔猪腹泻大肠杆菌种系类群、血清型和毒力基因分析被引量:6
- 2013年
- 揭示黑龙江地区集约化猪场仔猪断奶腹泻(PWD)直肠棉拭子分离到的123株大肠埃希菌所属种系分类群、O血清型及其与毒力基因的特征。采用常规凝集试验进行测定,种系分类群标记的chuA、yjaA基因和TSPE4.C2DNA片段及肠毒素基因STa、STb、LT、SLT2e采用PCR方法检测。在123株分离菌株中,除21株未定型、10株自凝外,测定出92株分离的血清型,覆盖18个血清型,其中以O 8、O 9、O 149 3种血清型为主,共57株,占定型菌株的61.96%。环境共生的种系进化A群113株占91.87%,肠外强致病D种系进化群2株占1.63%。肠毒素检出菌株74,占分离株的60.16%,其中以STa、STb为主,共占肠毒素检出株的94.59%。结果显示黑龙江省PWD病原性大肠埃希菌优势血清型为O 8、O 9、O 149,大肠埃希菌肠毒素主要毒力因子为STa、STb,种系进化群为A。
- 佟春玉呼锐崔玉东
- 关键词:血清型肠毒素
- 无乳链球菌Sip蛋白的表达及免疫保护作用研究
- 无乳链球菌(S.agalactiae)为链球菌科、链球菌属细菌,人医临床常以B群链球菌(GBS)相称。无乳链球菌是一种能够引起新生儿败血症、脑膜炎、心肌炎、肺炎、妇女妊娠围产期相关感染及成人感染(如糖尿病、恶性肿瘤和免疫...
- 穆飞飞孙龑刘乐锋李闰婷邓洪宇佟春玉姜海芳陈亮呼锐朱战波崔玉东
- 文献传递
- 奶牛乳房炎肠杆菌OmpA的免疫原性分析及对小鼠感染模型的免疫保护效果评估
- 本研究旨在评估肠杆菌OmpA蛋白的免疫原性和免疫保护效果。首先扩增大肠杆菌308-2、C83919、O157、J96、2002-1菌株及克雷伯氏菌、志贺氏菌的ompA基因并系统进化分析,构建重组质粒pET32a-ompA...
- 呼锐樊自尧佟春玉迟佳琦李闰婷丁兆凤陈龙欣陈亮于立权马金柱宋佰芬朱战波崔玉东
- 关键词:奶牛乳房炎免疫原性