国果 作品数:132 被引量:329 H指数:10 供职机构: 贵州医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
人工繁育蝇蛆对鸡免疫应答功能的影响 被引量:12 2004年 目的 :观察在饲料中添加鲜蛆、进口鱼粉、国产鱼粉对鸡免疫应答功能的影响。方法 :选成年罗曼褐壳蛋鸡 ,在基本饲料相同的前提下 ,添加鲜蝇蛆、进口鱼粉、国产鱼粉养鸡 ,每种饲料均设全量和减量两组 ,共 6组 ,每隔一定时间以伤寒沙门菌O抗原免疫 ,测定血清凝集效价和脾脏指数 ,观察鸡的免疫应答情况 ,每组随机设立未免疫对照。结果 :血清凝集效价各全量组之间差别无显著性意义 (P >0 0 5 ) ,减量鲜蝇蛆和减量国产鱼粉差别无显著性意义 (P >0 0 5 ) ,但均高于减量进口鱼粉组 (P <0 0 5 ) ;各饲料减量组凝集效价均明显高于全量组 (P <0 0 5 ) ;脾脏增大以全量和减量鲜蛆组、全量进口鱼粉组、减量国产鱼粉组最为明显 ,增大率达 77 2 8%(P <0 0 0 1 )。结论 郎书源 国果 洪牧 王惠群 吴建伟关键词:蝇科 幼虫 家蝇几丁质酶基因MDCII重组表达质粒的构建及表达模式研究 被引量:4 2017年 从家蝇EST测序数据库中筛选获得家蝇几丁质酶基因MDCII,对该基因进行克隆及分子特性分析,探讨其在家蝇不同组织、不同发育时期及经不同微生物诱导后的时空表达模式。利用EST测序技术从已构建的家蝇幼虫c DNA质粒文库筛选出MDCII基因,运用生物信息学方法分析该基因序列及其编码蛋白的理化特性,采用邻接法构建系统进化树;PCR技术扩增目的基因,构建p EASY-E1-MDCII重组质粒,转化到Trans1-T1克隆感受态细胞中;采用实时荧光定量PCR(Real Time PCR)技术,检测MDCII基因在不同发育时期和不同组织部位的表达差异;采用注射法将不同微生物导入到家蝇3龄幼虫体内,Real Time PCR检测诱导后不同时间点MDCII基因表达水平的变化。结果显示,MDCII基因的ORF框全长1 374 bp,编码457个氨基酸,理论分子量51.6 k D,进化树分析比对与果蝇成虫盘生长因子的遗传距离较近。构建了具有正确基因序列的p EASY-E1-MDCII重组质粒。MDCII基因在家蝇不同发育阶段中均有不同程度的表达,在3龄幼虫中,以唾液腺和脂肪体中的表达水平较高;在白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌诱导后3 h,MDCII基因均出现明显的表达上调。MDCII基因属于几丁质酶中成虫盘生长因子,参与了家蝇的生长发育,在免疫防御过程中也发挥了一定作用。 杨尉锦 国果 吴沁怡 李妍 付萍 张勇关键词:家蝇 几丁质酶 克隆 家蝇热休克蛋白HSP20基因克隆、表达和序列分析 被引量:5 2015年 目的对家蝇热休克蛋白20(HSP20)基因进行生物信息学分析,并进行克隆、表达研究。方法利用美国国家生物技术信息中心和瑞士生物信息学研究所的蛋白分析专家系统中有关基因和蛋白序列的分析工具,结合其他生物信息学分析软件包,从Gen Bank上家蝇基因组序列识别出编码HSP20的基因,分析预测该蛋白质的结构功能;设计引物PCR扩增HSP20基因,将其克隆到原核表达质粒PEASY-E1中,重组质粒在大肠杆菌Origmi B/DE3中经用异丙硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)诱导表达,表达产物用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)鉴定。结果 HSP20基因序列全长865bp,最大开放阅读框(ORF)为567bp,编码188个氨基酸,理论分子量为21443.2 Da,等电点为5.96;所构建的重组质粒经PCR、双酶切及测序鉴定成功;SDS-PAGE分析结果显示,重组质粒在Origmi B/DE3中表达并纯化,得到的融合蛋白相对分子质量约为21443.2 Da,诱导12 h蛋白表达量最高,SDS-PAGE法得到的蛋白条带与目的蛋白大小相符。结论成功构建PEASY-E1-HSP20重组原核表达质粒并表达出融合HSP20蛋白,为进一步研究该蛋白的功能奠定基础。 彭传林 王宇 吴建伟 修江帆 魏川川 国果关键词:家蝇 克隆 蝇蛆壳聚糖急性毒性实验 被引量:8 2009年 目的观察蝇蛆壳聚糖的急性毒性反应。方法蝇蛆壳聚糖以最大浓度及最大给药体积的药液灌胃连续给药3次。连续观察14 d,记录小鼠毒副反应情况。蝇蛆壳聚糖腹腔注射给药1次,连续观察14 d,记录小鼠毒副反应情况。结果观察14 d,灌胃给药全部动物健存,小鼠体重与空白对照组差异无显著性,未见任何毒性反应。计算蝇蛆壳聚糖最大给药量为2 700 mg/kg体重,相当于成人日用量的67.5倍。腹腔注射给药亦未见任何毒性反应。结论蝇蛆壳聚糖毒性较小。 覃容贵 吴建伟 国果 付萍关键词:小鼠 急性毒性 家蝇幼虫血淋巴抗肿瘤活性蛋白功能分子的筛选及分子鉴定 目的:从家蝇幼虫血淋巴中筛选抗肿瘤活性蛋白功能分子。方法:以剪头法提取家蝇三龄幼虫血淋巴,依次收集C18固相萃取柱不同乙腈洗脱梯度洗脱组分,用MTT法测定抗肿瘤活性,并进一步用RP-HPLC纯化活性组分和测定分子特性,实... 魏洪 吴建伟 徐楠 国果 张勇 付萍 罗振华 刘萍 胡蓉 张殊关键词:家蝇 血淋巴 HPLC 文献传递 蝇蛆蛋白粉对小鼠免疫功能的影响 被引量:24 2007年 目的:探讨蝇蛆蛋白粉对正常小鼠及免疫抑制小鼠免疫功能的调节作用。方法:利用正常及环磷酰胺(Cy)所致免疫低下模型小鼠,通过血清溶血素含量检测及碳粒廓清指数测定考察蝇蛆蛋白粉对巨噬细胞巨噬功能及体液免疫功能的影响。结果:蝇蛆蛋白粉可显著提高正常小鼠半数溶血值(HC50),对吞噬指数(α)无影响;对免疫功能低下小鼠HC50无影响,但可显著提高其α值。结论:蝇蛆蛋白粉可有效地增强正常小鼠体液免疫功能;对Cy造成的免疫功能低下有一定的预防和治疗作用。 覃容贵 傅平 吴建伟 国果关键词:免疫活性 小鼠 家蝇分泌型抗菌肽的分离方法及其产品和应用 本发明公开了一种家蝇分泌型抗菌肽的分离方法及其产品和应用,将抗菌肽粗提液进行透析,透析内液经固相萃取,洗脱组分经超滤分离,活性组分进一步用反相高效液相色谱纯化出两个抗菌活性组分,即得家蝇分泌型抗菌肽。本发明提供了一条简便... 吴建伟 国果 宋智魁 付萍 秦容贵 张勇文献传递 家蝇幼虫分泌物抗菌肽的生化特性初步研究 被引量:19 2006年 研究了不同温度、蛋白酶及反复冻溶对家蝇Musca domestica幼虫活体浸泡法获得的分泌物抗菌肽抗菌活性的影响;并检测其凝血效应;试管稀释法测定其最低抑菌浓度(MIC)、最低杀菌浓度(MBC);SDS-PAGE分析其分子量范围。结果表明,该抗菌肽具有较强的热稳定性、酶稳定性及较强抗菌活性的特性,无凝血作用。对大肠埃希菌的最低抑菌浓度为37μg/mL、最低杀菌浓度为75μg/mL;分子量约10kD。 国果 吴建伟 付萍 张勇 宋玉竹 宋智魁关键词:家蝇 分泌物 抗菌肽 抗菌活性 家蝇(Musca domestica)羧肽酶基因克隆及原核表达 被引量:2 2014年 从构建的家蝇幼虫cDNA质粒文库中筛选到羧肽酶(Carboxypeptidase,CP)基因,以该基因的cDNA文库质粒为模板,通过PCR扩增,获得CP基因完整编码序列(登录号:KF939629.1)。运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的基本理化性质、信号肽和亚细胞定位等进行预测和分析。构建PEASY-E1-CP重组质粒,转化到大肠杆菌OrigamiB(DE3)中进行诱导表达。研究结果表明,CP基因ORF全长1 284 bp,编码428个氨基酸,理论分子量47.8ku,等电点为6.10,具有CP家族的蛋白保守结构域;重组原核质粒pEASY-E1-CP经IPTG诱导,蛋白在大肠杆菌中获得表达。 修江帆 魏川川 尚小丽 国果 吴沁怡 吴建伟关键词:家蝇 羧肽酶 克隆 原核表达 一种畜禽饲料添加剂 本发明公开了一种畜禽饲料添加剂,以重量份数计,由壳聚糖50-62份、植物药渣12-15份、干蛆粉20-30份和畜禽饲料营养填充料6-12份配制而成。本发明提供的畜禽饲料添加剂,采用壳聚糖作为主要成分,与其他原料进行粉碎混... 吴建伟 国果 魏成熙文献传递