夏利龙
- 作品数：14 被引量：20H指数：2
- 供职机构：浙江医院更多>>
- 发文基金：浙江省重大科技专项基金台州市科技局资助项目浙江省科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 血红素加氧酶-1的表达对氟尿嘧啶诱导食管癌细胞凋亡的影响被引量：2
- 2015年
- 目的本研究探讨血红素加氧酶-1与氟尿嘧啶诱导食管癌细胞凋亡的关系。方法培养ECa109食管鳞癌细胞,实验组分别加入正常培养基,含20μmol/L、80μmol/L锌原卟啉(Znpp IX)的培养基培养12h,后更换为含100μg/ml 5-FU组培养;对照组予正常培养基培养;共培养96h后检测各组细胞凋亡情况。结果在凋亡早期细胞中(Annexin V+/PI-),20μmol/L Znpp IX组(25.63%±6.52%)及80μmol/L Znpp IX(22.48%±5.59%)组显著高于5-FU组(12.89%±4.42%,P均<0.05)。在中晚期凋亡细胞(Annexin V+/PI+)中,20μmol/L Znpp IX组(25.17%±5.53%)显著低于5-FU组(39.89%±6.66%)及80μmol/L Znpp IX组(41.95%±2.92%,P均<0.01)。80μmol/L Znpp IX组caspase-3的活化率显著高于正常细胞(P<0.05)。结论 Znpp IX抑制HO-1表达后,可以显著增加5-FU诱导的Eca109食管癌细胞凋亡率,caspase-3参与了其诱导细胞凋亡的过程。
- 张健马德华陈保富胡炳川夏利龙张波朱成楚
- 关键词：食管癌细胞凋亡
- 血红素加氧酶-1对食管癌Eca109细胞VEGF表达的影响被引量：2
- 2013年
- 目的:研究血红素加氧酶-1(heme oxygenase,HO-1)对食管癌Eca109细胞株血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响。方法:利用氯化高铁血红素(Hemin)及体外设计合成的靶向抑制HO-1的小分子RNA(siRNA)分别诱导和沉默食管鳞癌Eca109细胞HO-1基因的表达,应用RT-PCR、Western blot检测HO-1 mRNA和蛋白表达水平。将实验分为Hemin(10μmol/L)处理组、HO-1siRNA+Hemin(10μmol/L)组、HO-1 siRNA组、空白对照组,分别以Western blot和ELASA法检测各组细胞VEGF的表达。结果:RT-PCR、Western blot检测结果显示Hemin(10μmol/L)可以有效诱导HO-1及VEGF的表达,而转染HO-1 siRNA可以成功抑制食管鳞癌Eca109细胞HO-1的表达;干扰Hemin诱导的HO-1后,VEGF的表达水平也随之降低。结论:HO-1 siRNA可有效沉默食管癌Eca109细胞HO-1的表达,并抑制HO-1诱导的VEGF的表达。
- 夏利龙朱成楚陈保富孔敏陈宇黄磊胡炳川张健
- 关键词：食管肿瘤血红素加氧酶-1RNA干扰血管内皮生长因子
- RNA干扰HO-1表达对肺腺癌A549细胞生物学行为的影响研究
- 2016年
- 目的应用RNA干扰技术特异性抑制血红蛋白加氧酶-1(HO-1)的表达,观察HO-1对肺腺癌A549细胞增殖、凋亡及侵袭能力的影响。方法将体外构建的HO-1小分子RNA(siRNA)转染入肺腺癌A549细胞,分为空白对照组(blank组)、脂质体组(mock组)、阴性对照组(NC组)、HO-1 siRNA组;应用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法检测HO-1 mRNA和蛋白表达水平;分别以CCK-8法、流式细胞术检测细胞增殖能力和凋亡率,用Transwell试验检测细胞迁移能力。结果细胞培养48、72h后,与blank组、mock组、NC组比较,HO-1 si RNA组细胞存活率均降低(均P<0.05),细胞凋亡率均增高(均P<0.05),G_0期/G_1期细胞比例均增高(均P<0.05),Transwell试验中穿膜细胞数均减少(均P<0.05)。结论 RNA干扰HO-1基因表达后能有效调控肺腺癌A549细胞的恶性生物学行为,抑制肺腺癌A549细胞的增殖,促进凋亡,降低细胞的侵袭能力。
- 夏利龙具晟袁丰祝鑫海舒跃陈国平
- 关键词：肺肿瘤HO-1RNA干扰
- 组织块悬液法建立兔食管VX2移植瘤模型的研究被引量：1
- 2013年
- 目的利用组织块悬液法建立兔VX2食管移植瘤模型,观察其肿瘤的成功率,生长情况及转移情况,为研究食管癌提供一个更好的研究方法。方法将VX2肿瘤制作成组织块悬液,直接注射至兔食管黏膜下层,每周进行B超检测,观察肿瘤的生长情况,并结合大体解剖及病理学检查,评价其生物学特性。结果 14只实验兔,成瘤率100%,其中1只死于并发症(术后感染),1只食管穿孔,余皆正常成瘤,其成瘤时间约为5～9天左右,14天后可出现吞咽困难,B超示食管内见一低回声结节(紧贴食管后壁),3周后实验兔明显消瘦,进食困难,中位生存时间约为20天。结论该方法可成功制成兔VX2食管肿瘤模型,生长稳定,难度较易。
- 陈宇朱成楚孔敏陈保富夏利龙黄磊朱敏
- 关键词：VX2肿瘤食管
- RNA干扰HO-1的表达增强食管鳞癌Eca109细胞对氟尿嘧啶化疗的敏感度被引量：1
- 2014年
- 目的探讨小干扰RNA沉默HO-1基因表达后食管鳞癌Eca109细胞对氟尿嘧啶化疗敏感度的影响。方法利用HO-1小干扰RNA(siRNA)及氯化高铁血红素分别沉默和诱导食管鳞癌Eca109细胞HO-1基因的表达,RT-PCR检测HO-1 mRNA水平,Western blot法检测HO-1蛋白表达水平,分别应用MTS法、流式细胞仪检测干预后Eca109细胞对氟尿嘧啶敏感度的变化。结果 RT-PCR、Western blot法检测结果显示,HO-1 siRNA能够有效抑制食管鳞癌Eca109细胞HO-1的表达。HO-1基因干扰后,氟尿嘧啶对Eca109细胞增殖抑制作用增强、凋亡细胞比例增加。结论干扰HO-1的表达可以显著增强食管鳞癌Eca109细胞对氟尿嘧啶化疗的敏感度。
- 王佶郭海谢夏利龙陈宇胡炳川张健朱成楚陈保富
- 关键词：食管肿瘤HO-1RNA干扰化疗
- 经胸腔镜建立巴马小型猪慢性心肌缺血模型被引量：8
- 2014年
- 目的本研究目的在于探索采用胸腔镜微创技术建立小型猪慢性心肌缺血模型。方法选用实验用巴马小型猪,采用胸腔镜技术,在左冠状动脉回旋支(left circumflex coronary artery)主干放置Ameroid缩窄环,术后第6周经选择性冠状动脉造影,了解冠脉狭窄程度及侧支循环形成并行心脏核素显像了解心肌缺血情况,以对胸腔镜下建立小型猪慢性心肌缺血模型进行评估。结果造模成功率80%(8/10),手术时间45.3±7.1min,术中出血量32.5±11.3ml。术后第6周造影显示6头左回旋支完全闭塞,见侧支循环形成,2头狭窄程度大于70%。心肌灌注显像见左后下壁明显缺损。结论采用胸腔镜方式应用Ameroid缩窄环建立小型猪慢性心肌缺血模型技术微创、可行,模型均一、稳定,适用于慢性心肌缺血模型相关实验研究。
- 张波陈保富马德华王益兵叶敏华夏利龙陈宇王斌王铮朱成楚
- 关键词：慢性心肌缺血小型猪胸腔镜
- VEGF165基因重组腺相关病毒构建及转染猪骨髓间充质干细胞的研究
- 2014年
- 目的构建携带人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)的重组腺相关病毒载体,在体外转染猪骨髓间充质干细胞并观察其表达。方法细胞AAV包装质粒pAAV-IRES-ZsGreen及含hVEGF的质粒经EcoRⅠ+BamHⅠ双酶切、连接,构建pAAV-hVEGF165-IRES-ZsGreen载体,采用磷酸钙法转染293AAV细胞系,获得rAAV2-hVEGF165及对照重组腺相关病毒,rea1-time PCR法测定病毒效价。Western blot检测重组rAAV2-hVEGF165在猪骨髓间充质干细胞的表达,MTS法检测VEGF蛋白活性。结果成功构建rAAV2-hVEGF165重组腺相关病毒载体,rAAV2-hVEGF165经双酶切和测序鉴定正确,rea1-time PCR法测定病毒效价为5×1012vg/ml。转染rAAV2-hVEGF165的猪骨髓干细胞能够有效表达VEGF蛋白,并能促进血管内皮细胞的增殖。结论成功构建rAAV2-hVEGF165重组腺相关病毒载体,并能在猪骨髓间充质干细胞中有效转染和表达,为进一步探索rAAV2-hVEGF165对治疗缺血性心肌疾病的研究提供实验基础。
- 夏利龙朱成楚陈保富张波陈宇胡炳川张健
- 关键词：心肌缺血骨髓间充质干细胞
- 血红素加氧酶-1对食管癌细胞株Eca109增殖及凋亡作用的影响被引量：2
- 2013年
- 目的研究血红素加氧酶-1(heme oxygenase,HO-1)对食管癌细胞株Eca109增殖活性及凋亡作用的影响。方法利用体外设计合成的靶向抑制HO-1的低分子RNA(siRNA)沉默食管鳞癌Eca109细胞HO-1基因的表达,应用RT-PCR、Western blot检测HO-1 mRNA和蛋白表达水平,分别以MTS法、流式细胞术检测干扰HO-1后食管鳞癌Eca109细胞增殖和凋亡水平。结果 RT-PCR、Western blot检测结果显示转染HO-1 siRNA可以成功抑制食管鳞癌Eca109细胞HO-1的表达;与空白组、阴性对照组比较,HO-1 siRNA干扰组Eca109细胞增殖能力明显减弱,细胞凋亡率显著增加。结论 HO-1siRNA可有效沉默食管癌细胞HO-1的表达,抑制细胞的增殖活性,促进细胞的凋亡。
- 夏利龙朱成楚陈保富孔敏陈宇黄磊张健胡炳川
- 关键词：食管肿瘤HO-1RNA干扰
- 胸腔镜下小型猪慢性心肌缺血模型的建立与评价
- 2015年
- 开发慢性心肌缺血模型是缺血性心脏病研究领域重要内容,电视胸腔镜技术具有创伤小、疼痛轻、恢复快等优点.为了提高建立模型成功率和再次进胸实验性研究可行性,本研究采用胸腔镜微创技术在左回旋支（LCX）放置Ameroid 缩窄环建立小型猪慢性心肌缺血模型,并通过血清学、超声心动图和影像学等手段评价,探索制备慢性心肌缺血模型新技术.材料和方法 健康雄性巴马小型猪20头,体质量（27.2±4.1）kg,购于中国泰州实验用小型猪培育基地[生产许可证号：SCXK（苏）2011-0002].本研究由浙江省台州医院动物伦理委员会批准.
- 陈保富张波马德华朱成楚王益兵叶敏华夏利龙陈宇王斌朱通伟
- 关键词：电视胸腔镜技术缺血性心脏病巴马小型猪
- HO-1对食管鳞癌Eca109细胞VEGF表达及氟尿嘧啶化疗敏感性的影响
- 研究背景及目的: 我国是食管癌高发区，多数食管癌患者就诊时已属中晚期，因此预后较差，化疗是食管癌综合治疗的有效手段。血红素加氧酶1(heme oxygenase，HO-1)是体内降解血红素重要的限速酶，与肿瘤增殖、凋亡...
- 夏利龙
- 关键词：氟尿嘧啶化疗敏感性
- 文献传递
