娄强
- 作品数：18 被引量：27H指数：3
- 供职机构：河南大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 免疫调节因子TIPE2慢病毒载体的构建及病毒包装
- 2013年
- 目的:TIPE2[Tumor necrosis factor(TNF)-αinduced protein 8-like 2(TNFAIP8L2),TIPE2]慢病毒载体的构建及病毒包装。方法:首先构建带有3×FLAG标签的pCDNA3.1-3×FLAG-TIPE2质粒,确认表达后再将标签连同TIPE2序列一起克隆入pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro慢病毒表达载体,然后与pMD2.G、psPAX2共转染293T细胞并收获上清,进一步用含病毒颗粒的上清感染PLC/PRF/5及HEK293T细胞,Western blot检测感染后TIPE2蛋白表达情况。结果:pCDNA3.1-3×FLAGTIPE2及pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro-TIPE2质粒构建成功,并能最终产出具有感染性的病毒颗粒。结论:成功构建了TIPE2慢病毒载体并获得具有感染性的病毒颗粒,为进一步研究TIPE2功能提供了有力的支持。
- 王耀辉娄强陈九格张军马远方
- 关键词：免疫调节因子慢病毒
- 草决明对临床MRSA菌株毒力的影响及机制研究被引量：1
- 2013年
- 目的:探讨草决明对MRSA菌株的色素产生及毒力表达影响,寻找抑制毒力表达的基因靶标,探讨草决明的药理作用及MRSA菌株的毒力变化机制。方法:草决明采用水提和醇提法,用血浆凝固酶实验、光密度测定技术、抗过氧化氢实验观察草决明对不同组MRSA菌株的作用,通过荧光定量PCR技术观察各毒力表达基因及调控基因变化。结果:12.5、3.125μg/mL的草决明水提液和醇提液不影响MRSA菌的生长,草决明提取液降低了MR-SA菌色素合成及血浆凝固酶表达,MRSA菌抗氧化能力降低;MRSA菌分别受水提液及醇提液处理后,溶血素活性出现分离现象;荧光定量PCR结果表明抑制毒力表达的基因靶标为agr,但溶血素基因不受其调控。结论:草决明通过基因靶标agr降低了MRSA菌的部分毒素表达,具有一定的临床应用价值。
- 李小红刘强娄强卢峰黄红莹
- 关键词：草决明MRSA菌株调节基因
- 双组份信号转导系统ArlRS通过ica依赖性通路调控表皮葡萄球菌生物膜形成
- 吴旸Friedrich G(o)tz瞿涤许涛王家学俞文琦刘敬然娄强朱涛贲海静胡健
- 关键词：表皮葡萄球菌生物膜
- 医学微生物学实验教学中大学生创新能力培养探讨被引量：1
- 2012年
- 传统的实验教学中学生往往处于被动的地位,如何提高其教学效果、提高大学生的科研创新能力是实验教学改革的目的。通过对教材内容进行重组和修订,将实验内容分解为基本技能实验、综合实验和研究型实验三个层次进行教学,提高了学生的学习积极性及科研创新能力,有利于对学生进行科学方法、科学思维及创新能力的培养。
- 黄红莹许国强刘英杰娄强
- 关键词：微生物实验教学改革
- 影响表皮葡萄球菌icaA+/BF-临床株生物膜形成因素的研究
- 刘敬然江娟胡健朱涛娄强吴吻瞿涤
- 联合应用CD3/CD28单克隆抗体对小鼠T淋巴瘤细胞EL4活化的影响被引量：2
- 2013年
- 目的:研究联合应用CD3/CD28单克隆抗体对小鼠T淋巴瘤细胞EL4活化的影响。方法:ELISA方法检测不同浓度CD3/CD28抗体在不同时间点体外刺激EL4细胞后培养上清中IL-2的分泌;CCK-8方法检测EL4细胞增殖能力;流式细胞术检测EL4细胞周期;RT-PCR检测IL-2、NF-κB和NF-AT转录因子的转录情况。结果:在48小时抗CD3抗体(25μg/ml)与抗CD28抗体(2μg/ml)共刺激EL4细胞明显增加IL-2的分泌和细胞增殖能力,不影响细胞周期。结论:EL4细胞可以作为研究小鼠T淋巴瘤细胞活化的细胞模型。
- 娄强张薇刘广超马远方
- 关键词：CD3共刺激IL-2
- 表皮葡萄球菌双组分信号转导系统SaeRS调控功能的研究
- 表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis)是寄居于人体皮肤表面常见的一种条件致病菌,通常并不致病。然而,随着各种人工医疗材料(如人工瓣膜、静脉留置管和导尿管等)的普遍使用,表皮葡萄球菌已成为引起...
- 娄强
- 关键词：表皮葡萄球菌生物膜组氨酸激酶AAPPIA
- 文献传递
- 表皮葡萄球菌基因删除突变株构建方法的研究被引量：2
- 2008年
- 目的 探讨高效的表皮葡萄球菌基因删除突变株构建方法。方法 分别应用2种不同的穿梭质粒pMAD和pBT2,连接目的基因表皮葡萄球菌双组分信号转导系统arlS、saeRS和lytS的上下游片段,构建重组质粒,电转入金黄色葡萄球菌RN4220后转入表皮葡萄球菌1457,利用抗性和生物标志筛选出针对特定目的基因的突变株SE1457-ΔarlS、SE1457-ΔsaeRS和SE1457-ΔlytS,比较2种方法的优、缺点。结果 利用pMAD和pBT2分别构建基因删除同源重组质粒pMAD-ΔsaeRS、pBT2-ΔarlS和pBT2-ΔlytS,并均获得相应的表皮葡萄球菌基因删除突变株。在筛选过程中,以pMAD为载体构建基因删除突变株,仅需1轮抗性/蓝白斑筛选过程即获突变株;而以pBT2为载体构建基因删除突变株筛选方法,需经过5～10轮的筛选才可获得突变株。基因删除突变株经聚合酶链反应（PCR）和测序等鉴定确认。与野生株相比,SE1457-ΔarlS突变株的生物膜形成能力降低90.96%,而SE1457-ΔsaeRS和SE1457-ΔlytS株的生物膜形成能力略有增加。结论 以pMAD载体构建表皮葡萄球菌突变株比较快速和简便。
- 娄强朱涛王家学吴旸朱于莉瞿涤
- 关键词：基因删除表皮葡萄球菌
- Huntington舞蹈病一家系4例遗传分析
- 2012年
- 目的对Huntington舞蹈病一家系4例进行遗传学分析,为家系成员提供遗传咨询并为后续Huntington舞蹈病发病机制及实验治疗研究提供依据。方法对患者家系进行家系调查和分析,观察患者症状,对患者进行医院常规检查及实验室遗传学分析。结果通过基因诊断,家系中有7人携带Huntington舞蹈病基因。其中2人表现为Huntington舞蹈病典型不自主震颤;2人具有高度区域选择性的脑萎缩和神经元脱失;3人表型正常,未到发病年龄,表现为延迟显性。结论 Huntington舞蹈病是一种以神经系统退行性改变为主要特征的常染色体显性遗传病,发病年龄通常在32～50岁。其遗传学基础是由于基因的动态突变———IT15基因5′端编码区(CAG)n三核苷酸的异常扩增引起的,呈现典型的延迟显性和遗传印记现象。
- 王艳鸽娄强董烁
- 关键词：亨廷顿舞蹈病常染色体显性遗传IT15基因
- 表皮葡萄球菌双组分信号转导系统arlS基因生物学功能研究被引量：3
- 2007年
- 目的探讨表皮葡萄球菌arlS/R双组分信号转导系统(two-component signal transduction system,TCS)的组氨酸激酶arlS基因删除对细菌生物学的影响。方法构建含有红霉素抗性基因(ermB)的pBT2-△arlS质粒,随后将电转入表皮葡萄球菌1457的重组质粒在43℃条件下振摇培养,筛选表皮葡萄球菌1457菌株的arlS缺失突变株(SE1457-△arlS);采用微量板半定量方法检测arlS删除突变对细菌生物被膜形成的影响,通过检测A595值观察其生长曲线,检测过夜培养上清液对菌细胞裂解的活性,并用0.1%TritonX-100诱导细菌自溶的方法检测SE1457-△arlS突变株的自溶情况。结果成功构建pBT2-△arlS质粒,利用同源重组基因删除的方法表皮葡萄球菌1457 arlS基因被删除。△arlS突变株与野生株的生长曲线基本相似,提示arlS基因删除对细菌的增殖无明显影响,但SE1457-△arlS突变株形成生物被膜的能力明显低于野生株,降低90.96%;在0.1%Triton X-100诱导下SE1457-△arlS基因删除突变株的裂解率为97.83%,野生株为55.38%;而△arlS突变株过夜培养上清液对靶细菌裂解的活性则低于野生株,其裂解率为20.50%,野生株为56.12%。结论表皮葡萄球菌arlS/R双组分信号转导系统arlS基因可调控细菌生物被膜形成、菌细胞自溶以及胞外细菌裂解酶的活性。
- 王家学朱涛娄强吴旸韩聪瞿涤
- 关键词：表皮葡萄球菌
