孙建利 作品数:10 被引量:45 H指数:4 供职机构: 承德市中心医院 更多>> 发文基金: 河北省医学科学研究重点课题 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
基于PI3K/AKT信号通路探讨miR-26a对急性胰腺炎细胞凋亡与增殖的影响 2024年 基于磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶A(AKT)信号通路探讨miR-26a对急性胰腺炎细胞AR42J凋亡与增殖的影响。将细胞分为4组:正常组、模型组(100 nmol/L雨蛙素)、miR-26a NC组(100 nmol/L雨蛙素+miR-26a NC)和miR-26a inhibitor组(100 nmol/L雨蛙素+miR-26a inhibitor)。MTT法检测细胞活力,AnnexinV-PI流式双染法检测细胞凋亡率,ELISA法检测IL-6、TNF-α水平,Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2、cleaved caspase 3、PI3K及p-AKT蛋白表达。与正常组比较,模型组及miR-26a NC组细胞活力降低(P<0.01),细胞早期凋亡率、晚期凋亡率、IL-6、TNF-α水平、Bax、Cleaved caspase 3、PI3K、p-AKT表达量均升高(P<0.01),Bcl-2表达量降低(P<0.01);与模型组及miR-26a NC组比较,miR-26a inhibitor组细胞活力升高(P<0.01),细胞早期凋亡率、晚期凋亡率、IL-6、TNF-α水平、Bax、Cleaved caspase 3、PI3K、p-AKT表达量均降低(P<0.01),Bcl-2表达量升高(P<0.01)。miR-26a通过调控PI3K/AKT信号通路影响雨蛙素诱导的AR42J细胞的增殖与凋亡。 孙建利 王久吉 朱丽美 刘前 韩崇屹 陈治国关键词:急性胰腺炎 细胞凋亡 细胞增殖 连续性血液净化联合醒脑静注射液对42例行心肺复苏心脏骤停患者的疗效评价 被引量:2 2018年 心搏骤停具有突发性,预后差,且发生人群有年轻化趋势的特点。经复苏后自主循环的建立仅是心肺复苏术后复杂而漫长的治疗过程的开始,虽然呼吸与循环支持、脑复苏治疗等方面进展迅速,但最终仍然只有很少一部分人能够存活出院^[1]。复苏后多器官功能障碍,导致复苏后的高死亡率,有研究指出复苏后多器官功能障碍综合征的发生、发展是一个由炎症反应、凝血活化、纤溶抑制相互作用形成的级联反应过程^[2]。因此凝血功能障碍是影响心肺复苏患者预后的原因之一。 孙建利 陈治国 关亚男 姜润东 檀立端 杜金龙 刘海洋 付丽君关键词:连续性血液净化 醒脑静注射液 心脏骤停 心肺复苏 炎症因子 微小RNA-181d-5p靶向转导素β1X连锁受体蛋白1保护缺氧心肌细胞损伤的机制研究 被引量:1 2021年 目的研究微小RNA(miR)-181d-5p是否通过靶向转导素β1X连锁受体蛋白1(TBL1XR1)保护缺氧诱导的心肌细胞损伤。方法选取H9C2心肌细胞分为对照组,缺氧组,缺氧+miR对照组(A组),缺氧+miR-181d-5p组(B组),缺氧+小干扰RNA对照组(C组),缺氧+TBL1XR1小干扰RNA组(D组),转染miR阴性对照组(E组),miR-181d-5p组(F组),转染miR抗体阴性对照组(G组),转染miR-181d-5p抗体组(H组),缺氧+miR-181d-5p+pcDNA对照组(I组),缺氧+miR-181d-5p+pcDNA-TBL1XR1组(J组)。检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、活化的半胱氨酸天冬氨酸酶蛋白3(Caspase-3)、细胞存活率、细胞凋亡率、TNF-α、白细胞介素6(IL-6)水平。结果与对照组比较,缺氧组H9C2心肌细胞中miR-181d-5p(0.38±0.03 vs 1.00±0.11)下调,TBL1XR1 mRNA(2.17±0.17 vs 1.01±0.09)和TBL1XR1蛋白(0.89±0.08 vs 0.42±0.04)上调(P=0.000)。B组较A组及D组较C组H9C2细胞中CyclinD1蛋白、细胞存活率明显升高,活化的Caspase-3蛋白、细胞凋亡率、TNF-α、IL-6水平明显降低(P<0.05,P<0.01)。F组较E组及H组较G组TBL1XR1明显升高(P<0.05)。与I组比较,J组CyclinD1、细胞存活率明显减少,TBL1XR1、活化的Caspase-3、细胞凋亡率、TNF-α、IL-6水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-181d-5p通过靶向TBL1XR1,促进缺氧诱导的心肌细胞存活,并抑制其凋亡和炎性因子分泌,从而保护缺氧诱导的心肌细胞损伤。 杜金龙 耿永芝 关亚男 李志军 石彪 姜润东 檀立端 段云鹏 孙建利关键词:微RNAS 细胞周期蛋白D1 不同血液净化方式对尿毒症患者血清Fetuin-A及Apelin表达的影响 被引量:9 2021年 目的探讨不同血液净化方式对尿毒症患者血清胎球蛋白A(Fetuin-A)及脂肪因子(Apelin)表达的影响。方法选择承德市中心医院肾内科2017年2月~2019年2月收治的114例尿毒症患者,随机数字表法分为高通量血液透析(high throughput hemodialysis,HFHD)组、血液透析滤过(hemodiafiltration,HDF)组、血液透析联合血液灌流(hemodialysis and hemoperfusion,HD+HP)组,每组38例,治疗后,比较3组患者血清Fetuin-A、Apelin、尿素氮(urea nitrogen,BUN)、血肌酐(serum creatinine,Scr)、Kt/V、血磷、血钙、钙磷乘积、血清β_(2)-微球蛋白(β_(2)-microglobulin,β_(2)-MG)、甲状旁腺素(parathyroid hormone,PTH)水平以及治疗总有效率。结果治疗后HD+HP组Fetuin-A水平显著高于HFHD组并高于HDF组(F=48.814,P<0.001),Apelin水平显著低于HFHD组并低于HDF组(F=8.578,P<0.001);HD+HP组BUN水平低于HFHD组和HDF组(F=3.001,P=0.053),Scr水平高于HFHD组和HDF组(F=1.206,P=0.303),3组Kt/V指标比较差异不明显(F=1.942,P=0.148);治疗后3组患者血磷、钙磷乘积比较差异显著(F值分别为14.144,11.590;P值分别为<0.001,<0.001),3组血钙水平无显著差异(F=0.045,P=0.956);HD+HP组β_(2)-MG水平显著低于HFHD组并低于HDF组(F=355.820,P<0.001),PTH水平显著低于HFHD组并低于HDF组(F=182.270,P<0.001);HD+HP组总有效率为92.11%,HFHD组总有效率为89.47%,HDF组总有效率为63.16%,3组间比较差异显著(χ^(2)=34.100,P<0.001)。结论HD+HP、HFHD以及HDF治疗尿毒症患者均展现出较好的治疗效果,能够提高血清Fetuin-A水平并降低Apelin水平,但HD+HP血液透析效果较好,HFHD位列其次,而HDF稍弱。 孙建利 杜金龙 耿永芝 关亚男 李志军 檀立端关键词:血液净化 尿毒症 β-Catenin在雨蛙肽诱导的胰腺腺泡细胞凋亡中的作用 2019年 目的:研究β-连环蛋白(β-catenin)在雨蛙肽诱导的胰腺腺泡细胞凋亡中的作用及机制。方法:用雨蛙肽处理大鼠胰腺腺泡AR42J细胞,real-time PCR和Western blot检测细胞中β-catenin的mRNA和蛋白表达变化。在AR42J细胞中转染β-catenin过表达载体,用雨蛙肽处理后,用real-time PCR和Western blot测定过表达效果,MTT法测定细胞活力的变化,二硝基苯肼法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,碘-淀粉比色法检测淀粉酶(AMY)漏出率,流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot检测细胞中内质网应激相关蛋白CHOP和cleaved caspase-12的蛋白水平。结果:AR42J细胞经雨蛙肽处理后细胞中β-catenin的mRNA和蛋白水平均降低(P<0.05)。β-Catenin过表达载体转染可明显提高雨蛙肽作用下胰腺腺泡细胞中β-catenin的表达水平。雨蛙肽处理后的AR42J细胞活力降低,LDH和AMY漏出率升高,细胞凋亡率及细胞中CHOP和cleaved caspase-12的蛋白水平升高(P<0.05)。过表达β-catenin可以提高雨蛙肽处理后的AR42J细胞活力,降低LDH和AMY漏出率,减少细胞凋亡,降低细胞中CHOP和cleaved caspase-12的蛋白水平(P<0.05)。结论:β-Catenin可明显抑制雨蛙肽诱导的胰腺腺泡细胞凋亡,作用机制与减少内质网应激有关。 石彪 孙建利 许再超 李艳兵 杜金龙 孙晓光 党翠玲关键词:胰腺腺泡细胞 雨蛙肽 Β-连环蛋白 内质网应激 连续性血液净化治疗心肺复苏术后凝血功能障碍的临床疗效观察 被引量:9 2015年 目的探讨连续性血液净化(CBP)治疗心肺复苏术(CPR)后凝血功能障碍的临床疗效。方法选取2010年10月—2013年5月承德市中心医院经急诊院前、院内行CPR的心搏骤停患者56例,采用随机数字表法分为对照组20例和治疗组36例。对照组采用常规治疗,治疗组入重症监护室(ICU)后予以CBP联合常规治疗,记录两组患者治疗前(T1)及治疗后24 h(T2)、48 h(T3)及72 h(T4)凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fg)水平及72 h存活率、多器官功能障碍综合征(MODS)发生率。结果对照组和治疗组不同时间PT、APTT、TT、Fg水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);T1时治疗组与对照组PT、APTT、TT、Fg水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);T2、T3、T4时治疗组与对照组PT、APTT、TT比较,差异均有统计学意义(P<0.05);T4时治疗组Fg水平较对照组升高(P<0.05);治疗组PT、APTT和TT在T2、T3、T4时较T1时降低,T3、T4时较T2时降低,T4时较T3时降低(P<0.05);治疗组Fg水平T3、T4时较T1时升高,T4时较T2、T3时升高(P<0.05)。治疗组患者72 h后存活率高于对照组,MODS发生率低于对照组(P<0.05)。结论早期应用CBP可使CPR后凝血功能障碍患者短期内临床获益,CBP是治疗CPR后凝血功能障碍、防治MODS和改善预后的一种有效手段。 孙建利 檀立端 陈治国 王久吉 周大鹏 王海珠 程瑞年关键词:心肺复苏术 连续性血液净化 凝血酶原时间 葛根素调节PINK1/parkin信号通路对横纹肌溶解致大鼠急性肾损伤的影响 2023年 目的 探讨葛根素是否可通过调节PTEN诱导激酶1/帕金森病相关基因(PINK1/parkin)信号通路影响横纹肌溶解诱导的急性肾损伤大鼠线粒体自噬。方法 将60只SPF级成年雄性SD大鼠分为正常组(等量生理盐水)、模型组(50%甘油10 mL/kg)、葛根素低剂量组(葛根素50 mg/kg)、葛根素中剂量组(葛根素100 mg/kg)、葛根素高剂量组(葛根素200 mg/kg)、3-MA组(腹腔注射3-MA 15 mg/kg),每组10只。3-MA组灌胃葛根素200 mg/kg同时腹腔注射15 mg/kg自噬抑制剂3-MA,各给药组连续灌胃给药7 d后,除正常组外其余各组大鼠在双侧后肢肌肉一次性注射50%甘油10 mL/kg,建立横纹肌溶解诱导的急性肾损伤大鼠模型。血清生化分析血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)和肌酐磷酸激酶(CK)水平;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)水平;HE染色法观察大鼠肾组织病理变化;试剂盒法测量大鼠肾脏组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)水平;透射电子显微镜观察大鼠线粒体和自噬小体变化;免疫荧光法检测肾脏组织LC3和线粒体的共定位信号变化;Western Blot检测大鼠肾组织LC3 II/I、PINK1、parkin蛋白表达。结果 与正常组相比,模型组大鼠血清SCr、BUN、CK、TNF-α、IL-1β、IL-6水平明显升高,肾脏组织可见明显肾小球、肾小管扩张,出现空泡化、间质水肿以及炎性细胞浸润,肾脏组织病理学损伤评分、MDA、ROS水平,LC3标记的自噬小体与COX4标记的线粒体共定位信号以及LC3 II/I、PINK1、parkin蛋白表达升高,SOD、GSH水平降低(均P<0.05),并可观察到大鼠肾脏明显的线粒体肿胀,线粒体脊紊乱、断裂或消失,伴有明显的空泡变性,并有少量自噬小体形成;与模型组相比,葛根素低、中、高剂量组血清SCr、BUN、CK、TNF-α、IL-1β、IL-6水平,肾脏组织病理学损伤评分、MDA、ROS水平明显降低,SOD、GSH水平升高,LC3标记 耿永芝 李国伟 刘晓豆 韩磊 孙建利 檀立端关键词:葛根素 急性肾损伤 参芪扶正注射液联和血必净对脓毒性休克患者早期复苏及氧代谢的影响 被引量:8 2020年 目的探究参芪扶正注射液联合血必净对脓毒性休克患者液体复苏的干预作用及氧代谢的影响.方法选取2016年8月至2018年10月承德市中心医院急诊科收治的64例脓毒性休克患者,随机分为联合治疗组、参芪扶正注射液组、血必净组和对照组(每组各16例).四组患者进行目标导向性治疗(EGDT),对照组仅给0.9%氯化钠注射液和白蛋白液体复苏,必要时使用多巴酚丁胺或去甲肾上腺素升压;联合治疗组在对照组基础上早期加用参芪扶正注射液(250 mL/d)联合血必净(50 mL血必净加0.9%氯化钠注射液100 mL,200 mL/d),参芪扶正注射组和血必净注射液组是在对照组的基础上早期只加参芪扶正注射液(250 mL/d)或血必净(50 mL血必净加0.9%氯化钠注射液100 mL,200 mL/d)进行液体复苏.观察四组患者达到EGDT目标所需要的液体量、复苏完成时间、血管活性药物种类及剂量,以及氧代谢指标变化情况、并发症发生率和28 d病死率.结果四组患者EGDT时,联合治疗组复苏液体量、所需的多巴酚丁胺剂量及去甲肾上腺素均明显少于其他三组(均P<0.05),而四组复苏时间差异无统计学意义(P>0.05).联合治疗组试验过程中1例发生急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS),3例死亡;参芪扶正注射组和血必净注射液组试验过程中发生ARDS均为2例,3例死亡;对照组试验过程中4例发生ARDS,3例死亡,而病死率差异无统计学意义(P>0.05).联合治疗组、参芪扶正注射液组和血必净注射液组自复苏后24 h起氧输送(DO2)、中心静脉血氧饱和度(ScvO2)明显上升,而VO2、O2ER明显下降,均较复苏前明显改善(均P<0.05),而对照组多数指标在复苏后48 h才有明显变化,且联合治疗组的改善程度明显优于其他三组(P<0.05).结论参芪扶正注射液联合血必净能更早帮助脓毒性休克患者脱离休克状态,降低并发症的发生风险,改善体内氧代谢,是脓毒性休克患� 姜润东 段云鹏 李国伟 孙建利关键词:脓毒性休克 参芪扶正注射液 血必净注射液 氧代谢 小剂量肝素在心脏骤停复苏成功后应用的临床研究 被引量:1 2009年 目的观察心脏骤停患者复苏成功后应用小剂量肝素对凝血功能的影响及弥漫性血管内凝血(DIC)的发生率。方法50例心脏骤停成功复苏患者。随机均分为治疗组[男14例,女11例,年龄(54.29±10.98)岁]和对照组[男13例,女12例,年龄(55.38±12.37)岁1。2组均给予常规处理,治疗组加用小剂量肝素(20~40IU/kg)静注1次/d,共给予7d,观察2组患者于CPR成功ROSC后24h活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(Fg)、血小板计数(PLT)、D-二聚体(D-D)含量的变化以及DIC发生率。结果治疗组APTT时间显著长于对照组,Fg、PLT含量显著高于对照组。治疗组D—D含量显著低于对照组。治疗组DIC发生率为8.0%,显著低于对照组(32.0%,P〈0.05)。结论心脏骤停患者复苏成功后应用小剂量肝素可以延长APTT时间,升高Fg、PLT含量水平,降低D—D含量,并可明显降低DIC发生率。 周景霞 王建祥 程瑞年 孙建利关键词:心脏骤停 小剂量肝素 脓毒症Toll样受体信号通路和细胞免疫炎症因子水平 被引量:15 2021年 目的分析脓毒症患者Toll样受体(TLRs)信号通路和细胞免疫炎症因子水平及临床意义。方法回顾性分析承德市中心医院收治的124例脓毒症患者的临床资料,根据其病情程度分为重症脓毒症组(重症组,28例)及非重症脓毒症组(非重症组,96例),并纳入38名同期健康体检者作为对照组。比较三组入院时TLRs信号传导途径分子TLR-2、TLR-4表达水平、外周血单核细胞(PBMC)表面核因子-κB(NF-κB)及外周血T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+/CD8+)、炎症因子[C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]差异,使用受试者工作特征(ROC)曲线评估上述指标对重症脓毒症的诊断价值。结果重症组糖尿病患病占比46.43%高于非重症组11.46%(P<0.001)。重症组入院时PBMC表面TLR-2、TLR-4、NF-κB表达水平及外周血CRP、TNF-α分别为(37.60±6.69)%、(17.46±4.71)%、(3.57±0.70)及(93.71±17.27)mg/L、(79.15±13.75)ng/L高于非重症组(25.02±4.86)%、(12.12±3.01)%、(2.86±0.55)及(70.68±15.00)mg/L、(60.82±12.11)ng/L及对照组(P<0.05),而非重症组上述指标均高于对照组(P<0.05);重症组入院时外周血CD3+、CD4+/CD8+分别为(45.54±11.58)%、(0.89±0.16)均低于非重症组(57.38±12.30)%、(1.37±0.30)及对照组(P<0.05),而非重症组低于对照组(P<0.05);入院时PBMC表面TLR-2、TLR-4、NF-κB表达水平及外周血CD3+、CD4+/CD8+、CRP、TNF-α水平均对重症脓毒症具有较高诊断价值(P<0.05)。非重症组临床疗效优于重症组(P<0.001);治疗5 d时,两组PBMC表面TLR-2、TLR-4、NF-κB表达水平及外周血CRP、TNF-α水平均较治疗前降低(P<0.05),且外周血CD3+、CD4+/CD8+水平较治疗前升高(P<0.05);重症组治疗前后PBMC表面TLR-2、TLR-4、NF-κB表达水平及外周血CRP、TNF-α水平均高于非重症组(P<0.05),外周血CD3+、CD4+/CD8+水平均低于非重症组(P<0.05)。结论 TLRs信号通路异常激活、免疫抑制、炎症反应强烈是脓毒症发生、发展的重要因素,积极监测相� 关亚男 孙建利 王久吉 高军武 张倩关键词:脓毒症 重症脓毒症 TOLL样受体 核因子-ΚB T淋巴细胞亚群