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冬凌草甲素对胰腺癌BxPC-3细胞Cyclin D/Rb/p16信号蛋白的影响研究被引量：5: 2013年; [目的]通过观察冬凌草甲素对胰腺癌BxPC-3细胞形态和DNA变化的影响,研究其对Cyclin D/Rb/p16信号通路中基因表达的调节作用,分析冬凌草甲素对胰腺癌BxPC-3细胞的诱导与Cyclin D/Rb/p16信号通路之间的内在联系,为冬凌草甲素抗肿瘤提供可能的途径,为临床使用提供有利数据。[方法]冬凌草甲素作用BxPC-3细胞后,经瑞氏染色和Hoechst 33258荧光染色观察细胞形态,RT-PCR和实时荧光定量法(realtime PCR)检测Cyclin D/Rb/p16信号通路基因的表达变化;甲基化专一性PCR试剂盒检测p16基因的甲基化。[结果]冬凌草甲素(32μg·mL-1)作用于BxPC-3细胞后,瑞氏染色可见细胞出现典型的凋亡小体,Hoechst33258荧光染色可见BxPC-3细胞出现特征性凋亡变化,冬凌草甲素(32μg·mL-1)作用BxPC-3细胞36 h时,CDK4的表达量达到最低,但p16的表达量达到最高;p16基因有甲基化。[结论]1、冬凌草甲素能诱导BxPC-3细胞形态改变。2、冬凌草甲素在一定程度下调了CDK4基因的表达,上调了p16基因的表达,不能改变p16基因的甲基化,可能通过影响Cyclin D/Rb/p16信号通路而抑制胰腺癌的生长周期。; 沈雯许健孙金权牟一平吴晓莉; 关键词：冬凌草甲素 CYCLIN RB

薏苡仁油对人原位胰腺癌BxPC-3细胞生长及VEGF和bFGF表达的影响被引量：34: 2012年; 目的研究薏苡仁油(康莱特注射液)体外对人原位胰腺癌BxPC-3细胞生长和血管生长因子的影响,探讨薏苡仁油抗肿瘤作用机制。方法薏苡仁油作用BxPC-3细胞后,经瑞氏染色观察细胞形态,Hoechst 33258荧光染色、DNA梯度电泳观察细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞周期的变化;ELISA法检测血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(bFGF)的变化。结果薏苡仁油(2 mg/mL,20μL/mL)作用于BxPC-3细胞后,瑞氏染色可见细胞出现典型的凋亡小体,Hoechst33258荧光染色可见BxPC-3细胞出现特征性凋亡变化,琼脂糖电泳观察到明显的细胞凋亡特征性DNA梯形条带;细胞周期阻滞在G0/G1期;细胞上清液中VEGF、bFGF的表达水平明显下调。结论薏苡仁油能影响BxPC-3细胞生长周期,导致细胞周期阻滞,下调VEGF和bFGF的表达水平,可能对抑制胰腺癌细胞的扩散产生一定作用。; 许健沈雯孙金权吴晓莉牟一平李毅; 关键词：薏苡仁油

五种重组人源IL-18突变子表达质粒的构建及其在BxPC-3细胞中的表达被引量：1: 2012年; 目的:设计获得5段hIL-18异构体,定向插入pEGFP-C1质粒形成融合基因,转染胰腺癌Bx-PC-3细胞并表达,为进一步研究改建的hIL-18蛋白功能奠定实验基础。方法:设计引物从pGEM-T-hIL-18质粒中PCR扩增得到5段不同的hIL-18片段,分别连接入pEGFP-C1载体构建不同的突变子(Mu0、Mu1、Mu2、Mu3和Mu4),转染原位胰腺癌BxPC-3细胞,以荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR法检测转染细胞中hIL-18表达水平。结果:(1)五种重组质粒经酶切与测序证实构建成功;(2)BxPC-3细胞转染重组质粒后可观察到绿色荧光蛋白的表达。结论:(1)成功构建了hIL-18五种异构体的绿色荧光蛋白表达载体;(2)改建的hIL-18蛋白可与绿色荧光蛋白在BxPC-3细胞融合表达。; 孙金权许健沈雯吴晓莉牟一平张婷沃兴德; 关键词：PEGFP-C1

冬凌草甲素联合IL-18抗肿瘤作用机制的研究进展: 2011年; 肿瘤是一种人类自身细胞的异常增生现象。肿瘤的迅速生长和扩散极大地威胁着人类的生命和健康。几乎所有的肿瘤细胞都有一个共同的特点：细胞周期调控机制失调,导致细胞失控性生长。肿瘤疾病是严重威胁人类生命的一类疾病,尽管现有治疗手段取得了一定疗效,但多数肿瘤患者生存时间有限,缺乏有效的可以治愈的药物,亟需开发新的药物来满足患者需要。; 孙金权许健; 关键词：抗肿瘤作用机制 IL-18 冬凌草甲素细胞周期调控机制人类生命自身细胞

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孙金权