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安怀杰: 作品数：16 被引量：39H指数：3; 供职机构：中国人民解放军海军总医院更多>>; 发文基金：海军后勤部科研基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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2个表达单元间相互位置和转录方向对表达的影响: 2007年; 目的:研究质粒表达载体中2个表达单元间相互位置和转录方向关系对表达的影响,找出利于2个表达单元表达的优化的相互关系。方法:以全抗体为研究对象,构建了轻重链方向不同的2种相互关系的单质粒表达载体pIRESdhfrA和pIRESdhfrB,转染CHO-dhfr-细胞后,对瞬时表达水平进行了比较。以pIRESdhfrA和pIRESdhfrB为基础,构建了瞬时表达载体pIRESdhfrA-sv40ori和pIRESdhfrB-sv40ori,在COS-7细胞中进行了瞬时表达水平的比较。构建了基于CHO定点细胞系的稳定表达细胞株,对pIRESdhfrA和pIRESdhfrB进行稳定表达水平的比较。结果:在CHO-dhfr-的瞬时表达水平比较中,pIRESdhfrB转染的细胞表达水平是pIRESdhfrA转染细胞的2.18倍。与pIRESdhfrA-sv40ori在COS-7细胞的瞬时表达水平相比,pIRESdhfrB-sv40ori是其表达水平的2.3倍。pIRESdhfrB-FRT构建的CHO定点细胞平均表达水平是pIRESdhfrA-FRT构建的CHO定点细胞的11.6倍。结论:在构建的真核细胞质粒表达载体pIRESdhfr中,2个表达盒的启动子头-头转录方向关系比头-尾方向关系更利于重组蛋白的表达。; 安怀杰俞炜源孙志伟

亚丁湾海域海水理化性质和主要细菌调查被引量：2: 2011年; 目的:了解亚丁湾海域海水主要理化特性、细菌种类及其对抗菌药物的敏感性。方法:采集亚丁湾海域不同地理位置海水样本;用自动生化分析仪测定海水主要理化指标;海水经增菌培养和细菌分离,对所分离细菌进行菌株鉴定及其对不同抗菌药物敏感性试验。结果:亚丁湾海域海水Na+、K+、Cl-和Ca2+离子含量分别为525.0±14.0、12.5±0.25、86.8±16.1和11.7±0.3 mmol/L;从8份不同地理位置海水水样中共分离和培养细菌菌株80株,均鉴定为斯氏假单胞菌;药敏实验分析表明该海域斯氏假单胞菌对头孢呋辛、头孢他啶、奈替米星和环丙沙星等18种临床常用抗菌药物均敏感。结论:亚丁湾海域海水理化性质和常见致病菌具有特殊性,对指导该海域从业人员健康保障和维护具有科学意义。; 韩善桥巴剑波赵晓航姜涛朱智明安怀杰陈双红徐雄利何立东; 关键词：细菌抗菌药物

不同温度海水浸泡对腹部开放伤大鼠生存时间的影响被引量：3: 2009年; 目的:观察腹部开放伤伴随不同温度海水浸泡条件下对大鼠生存时间及其伤情进展的影响。方法:建立腹部开放伤大鼠模型,健康雄性Wistar大鼠随机分为单纯腹部开放伤组和腹部开放伤伴随生理盐水或海水浸泡组。与单纯腹部开放伤相比,观察腹部开放伤合并10℃、15℃、22℃、26℃和33℃不同温度生理盐水或海水浸泡条件下大鼠的生存时间。结果:在相同温度下,与单纯腹部开放伤或腹部开放伤合并生理盐水浸泡组相比,腹部开放伤伴随海水浸泡大鼠生存时间明显缩短;与单纯腹部开放伤相比,腹部开放伤伴随10℃生理盐水浸泡大鼠生存时间明显缩短,而腹部开放伤伴随15℃、22℃、26℃和33℃生理盐水浸泡组大鼠生存时间没有显著差异;腹部开放伤合并海水浸泡条件下,大鼠在10℃、26℃和33℃水温浸泡较在15℃和22℃水温浸泡条件下生存时间明显缩短。结论:海水浸泡是加速腹部开放伤大鼠致死的重要因素之一。伴随过度低温(10℃)或接近体温(33℃)的海水浸泡都可加速腹部开放伤大鼠死亡。; 曲佳张达矜熊鸣乔媛媛王大鹏安怀杰赵晓航; 关键词：海水浸泡腹部开放伤死亡率

用反式互补表达载体实现全抗体在CHO-dhfr-细胞中的高效表达被引量：2: 2007年; 目的:通过弱化筛选基因二氢叶酸还原酶基因(dhfr),构建双顺反子全抗体表达载体,实现全抗体在CHO细胞中的高效表达。方法:将dhfr基因分为分别编码1～105和106～187氨基酸残基的2部分,分别通过linker与亮氨酸拉链GCN4融合,分别通过内部起始位点序列与抗体轻重链基因偶联,构建成2个双顺反子表达载体pIRESLZdhfr-H和pIRESLZdhfr-L。用脂质体2000转染CHO-dhfr-细胞,用无次黄嘌呤和胸腺嘧啶脱氧核苷的IMDM筛选培养基筛选阳性克隆。结果:筛选到的阳性克隆表达水平为1.47～3.5μg/(106细胞.d),经氨甲蝶呤(MTX)梯度加压,在MTX浓度为5×10-8mol/L时,表达水平达到11.5μg/(106细胞.d)。结论:构建了基于亮氨酸拉链二聚化基础的dhfr弱化方式的双顺反子表达载体,实现了全抗体在CHO-dhfr-细胞中的高效表达。; 安怀杰俞炜源孙志伟; 关键词：弱化

生物节律基因period3的研究进展被引量：2: 2011年; 昼夜节律是所有真核生物和部分原核生物的基本特征,一组节律表达的生物钟基因形成24 h周期振荡的自主调节转录-翻译反馈回路。period(per)基因家族是生物钟反馈回路中重要组成成分,per3基因是period基因家族成员之一。人类的per3基因定位于染色体1p36,其编码区第18外显子中含有一个灵长类特有的串联重复序列(variable number tandem repeat,VNTR)。该VNTR包含一簇理论上的磷酸化位点,能影响PER3蛋白的磷酸化降解,影响PER3蛋白的功能。近年研究发现,per3基因多态性与睡眠结构、睡眠紊乱发病年龄、睡眠剥夺后次日清晨执行能力等密切相关。; 安怀杰俞炜源赵晓航; 关键词：昼夜节律

治疗性全抗体的表达及其研究进展被引量：2: 2004年; 治疗性全抗体是一类前景良好的治疗药物,具有潜在的巨大市场。截至2003年6月,美国FDA批准的治疗性全抗体有20种。全抗体表达是抗体工程的研究重点之一,本文对全抗体的表达及其研究进展进行了阐述。; 安怀杰刘志刚俞炜源; 关键词：基因抗体药物

IIn-UK融合基因在CHO细胞中的高表达研究被引量：2: 2004年; 目的 :构建新型高效真核表达载体 ,实现人源化鼠抗人纤维蛋白单链抗体低分子量尿激酶 (IIn UK)在CHO细胞中的高表达。方法 :利用常规分子生物学方法 ,通过对neo基因的表达进行不同程度的弱化 ,构建了一系列新型真核表达载体 ,以IIn UK融合基因为目的基因 ,比较这些真核表达载体实现外源基因高表达的能力 ,然后挑选高表达的克隆 ,通过MTX加压扩增 ,以提高IIn UK融合基因的拷贝数及表达水平。结果与讨论 :构建了 5种新型真核表达载体 ,并筛选出优化的真核表达载体 ,通过MTX加压扩增 ,实现了IIn UK融合基因在CHO细胞中的高表达 ,表达量达到 10 μg/ (10 6细胞·2 4h )。; 刘志刚林建波张国强安怀杰徐桂清俞炜源; 关键词：真核表达载体重组蛋白

内部核糖体进入位点及其研究进展被引量：4: 2007年; 内部核糖体进入位点(IRES)是mRNA5'端非编码区的一段特殊序列,允许核糖体直接在此序列结合mRNA并起始翻译。对IRES的发现、分类、特征,以及细胞中是否存在该元件进行了简要综述。; 安怀杰俞炜源孙志伟; 关键词：内部核糖体进入位点双顺反子非编码区翻译

紫芪方对失血性休克大鼠肠道通透性的影响被引量：2: 2016年; 目的观察紫芪方对失血性休克Wistar大鼠肠道通透性的影响。方法实验采用Wistar大鼠,按照改良Wigger’s法复制失血性休克模型,然后将模型大鼠随机分为正常对照组、失血性休克组、紫芪方组、参附组及蒸馏水组(各组n=6)。除正常对照组和休克组,其他组在给予2倍失血量液体复苏后分别灌胃给予不同干预药物,观察肠道黏膜组织结构变化,并测定血浆内毒素含量、肠道细菌移位情况、血浆D-乳酸含量和血浆二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)含量。结果紫芪方组肠黏膜损伤程度明显轻于失血性休克组。紫芪方组血浆内毒素含量、血浆细菌移位菌落数、肝脏细菌移位菌落数和血浆D-乳酸分别为(177.0±45.0)EU/L、(29±8)CFU、(31±16)CFU、(0.39±0.04)mmol/L,较失血性休克组显著降低(P<0.01)。紫芪方组血浆DAO含量为(0.40±0.06)kU/L,较失血性休克组降低(P<0.05),且紫芪方在降低血浆细菌移位菌落数、肝脏细菌移位菌落数和血浆DAO 3个方面的效应强于阳性对照药物参附(P<0.05)。结论紫芪方对失血性休克大鼠肠道通透性有保护作用,为紫芪方保护肠道屏障功能的有效性提供了重要依据。; 史成和吴成林张达矜安怀杰李玉军; 关键词：失血性休克肠道通透性

高性能战斗机飞行员的PERIOD3基因多态性频率及与睡眠的关系: 2011年; 目的鉴定高性能战斗机飞行员的PERIOD3（PER3）基因型频率，并分析其与睡眠分型的关系。方法获取104名高性能战斗机飞行员的外周静脉血样本各2m1，提取基因组DNA样本。应用PCR扩增基因片段，鉴定个体的PER3基因型。根据Horne-Ostberg生理时钟问卷调查，进行睡眠类型分类。结果104名高性能战斗机飞行员的PER3基因型频率为：PER3^4/4基因型频率占70．2％（73／104）；PER3^4/5基因型频率占26．9％（28／104）；PER3^5/5频率占2．9％（3／104）。高性能战斗机飞行员与普通汉族人PER3基因型频率比较，差异无统计学意义（X^2=2．737，P〉0．05）。Horne-C）stberg生理时钟问卷调查结果显示：高性能战斗机飞行员PE船的3种基因型在睡眠分型上没有差别。结论高性能战斗机飞行员与普通汉族人PER3基因型频率分布相似。飞行员睡眠分型中，未提示PER3^5与昼行睡眠偏好相关。; 安怀杰李鸣皋熊鸣何立东赵晓航; 关键词：昼夜节律睡眠剥夺生物钟基因型基因频率

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