封毅
- 作品数：26 被引量：59H指数：4
- 供职机构：广西大学更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程自然科学总论更多>>
- 一种β-葡萄糖苷酶及其编码基因与应用
- 本发明公开了一种β-葡萄糖苷酶及其编码基因与应用。该β-葡萄糖苷酶，是如下(a)或(b)的蛋白质：(a)由序列表中序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列表中序列3的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或...
- 冯家勋郭鸿封毅莫新春段承杰唐纪良
- 文献传递
- 堆肥未培养细菌的宏基因组文库构建及新的木聚糖酶基因的克隆和鉴定被引量：11
- 2005年
- 从自制堆肥样品中提取未培养细菌的总DNA,用柯斯质粒pW EB∷TNC为载体构建宏基因组文库,对文库进行筛选获得表达木聚糖酶活性的克隆,再进行亚克隆、测序分析以及B lastx搜索G enB ank分析木聚糖酶基因。结果构建得到一个包含约5万个克隆的宏基因组文库,文库中外源DNA总容量约为1.8×106kb,获得2个表达木聚糖酶活性的克隆:pGXN 1050和pGXN 1051,鉴定分析表明:pGXN 1050上潜在的木聚糖酶基因um xyn 11A具1个771bp的ORF(Open R ead ing F ram e),可编码含257个氨基酸的蛋白质,所编码产物与混合纤维弧菌(C ellv ibr io m ix tus)的内切-1,4-β-木聚糖酶(G enB ank索引号Z48925.1)的氨基酸序列有46%的一致性和57%的相似性;pGXN 1051上潜在的木聚糖酶基因um xyn 11B具一个723bp的ORF,可编码含241个氨基酸的蛋白质,编码产物与混合纤维弧菌的内切-1,4-β-木聚糖酶(G enB ank索引号Z48925.1)的氨基酸序列有73%的一致性和80%的相似性。木聚糖酶Um xyn11A和Um xyn11B都属于糖基水解酶家族11的成员。
- 张鹏段承杰庞浩封毅靳振江许跃强莫新春唐纪良冯家勋
- 关键词：细菌宏基因组文库木聚糖酶基因
- 一种纤维素酶和它的编码基因与应用
- 本发明公开了一种纤维素酶及其编码基因与应用。该纤维素酶是具有下述氨基酸残基序列之一的蛋白质：1)序列表中的SEQ ID №：2的氨基酸残基序列；2)将序列表中SEQ ID №：2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的...
- 冯家勋刘利段承杰封毅唐纪良
- 文献传递
- 在医学分子生物学教学中开展研究生创新能力培养探索
- 以理论教学为切入点，教师承担的科研课题项目为引导，以组织分子生物学兴趣小组开放实验室为平台，指导研究生从课题设计到研究计划实施进行了一系列探索.通过课堂的理论学习一课后查阅相关资料一课堂讨论一实验设计一综合实践的过程，培...
- 李丽帆卓少元封毅杨品纯蒙美师
- 关键词：研究生教育高等教育分子生物学
- 文献传递
- 水牛瘤胃宏基因组的一个新的β-葡萄糖苷酶基因umcel3G的克隆、表达及其表达产物的酶学特性被引量：31
- 2008年
- 以木质纤维素为原料、应用同步糖化共发酵工艺发酵生产酒精时需要酸性中低温高活力纤维素酶包括β-葡萄糖苷酶。本工作分6次构建了水牛瘤胃未培养微生物宏基因组文库,获得1.26×10~5个克隆,文库含外源DNA的总长度约为4.8×10~6 kb。从文库中筛选到118个表达β-葡萄糖苷酶活性的独立克隆。发现其中8个克隆表达的β-葡萄糖苷酶在pH5.0、37℃条件下活性较强。对其中一个克隆进行了亚克隆,序列分析发现一个2223 bp的潜在的编码β-葡萄糖苷酶基因(umcel3G)的开放阅读框(ORF),其编码产物的氨基酸序列与来自于Bacillus sp.的一个β-葡萄糖苷酶同源性最高,具有60%的一致性和73%的相似性。该ORF在E.coli中的表达产物Umcel3G的分子量与预测大小相似,酶谱分析表明该表达产物具有β-葡萄糖苷酶活性,证实该基因为一个β-葡萄糖苷酶基因。测定了用Ni-NTA纯化的Umcel3G的酶学特性,其最适pH和最适温度分别为6.0～6.5和45℃。一些金属离子如Ca^(2+)、Zn^(2+)能显著提高该酶的酶活,而另外一些金属离子如Fe^(3+)、Cu^(2+)能抑制Umcel3G的活性。在pH4.5、35℃和5 mmol/L的Ca^(2+)存在的条件下,用Ni-NTA纯化的重组酶的比活为22.8 IU/mg,说明该酶在用SSCF工艺发酵生产酒精中有潜在的应用价值。
- 郭鸿封毅莫新春段承杰唐纪良冯家勋
- 关键词：未培养微生物宏基因组Β-葡萄糖苷酶
- 牛瘤胃未培养细菌中一个β-葡萄糖苷酶基因umbgl3A的克隆及鉴定被引量：20
- 2005年
- 通过构建牛瘤胃未培养细菌的宏基因组文库,共获得12000个克隆,文库外源DNA总容量为4.2×108bp,筛选得到九个表达β-葡萄糖苷酶活性的克隆,并对其中的一个表达β-葡萄糖苷酶活性的克隆pGXN1009进行亚克隆,将β-葡萄糖苷酶基因定位在4.3kb的片段上。测序结果表明在4.3kb的片段上有一个全长为1956bp的ORF,编码一个可能的β-葡萄糖苷酶基因um-bgl3A,其编码产物与一个来源于小鼠大肠未培养细菌的β-葡萄糖苷酶(GenBankAcessionNO:AAX16378.1)一致性为63%、相似性为79%;与哈氏噬纤维菌(Cytophagahutchinsonii)的β-葡萄糖苷酶(GenBankAcessionNO:ZP-00308419)的一致性为50%、相似性为67%。利用SMART软件对Umbgl3A结构组件预测表明,Umbgl3A包含一个家族3糖基水解酶(glycosylhydrolase)功能域和一个家族3C糖基水解酶功能域。遗传进化分析表明umbgl3A基因可能是来自牛瘤胃微生物噬纤维菌属未培养的一个种。
- 赵广存段承杰庞浩封毅许跃强莫新春唐纪良冯家勋
- 关键词：牛瘤胃宏基因组
- 未培养微生物纤维素酶基因资源的挖掘
- ＜正＞纤维素是地球上最丰富的生物质（biomass）资源,全球每年通过光合作用产生的纤维素高达1.55×109吨,其中89%尚未被人类利用。纤维素的利用与转化对于解决世界能源危机、粮食短缺、环境污染等问题具有重要意义。纤...
- 冯家勋庞浩段承杰封毅许跃强张鹏赵广存莫新春唐纪良
- 文献传递
- 堆肥宏基因组柯斯质粒文库的构建和DNA提取技术的改进被引量：1
- 2009年
- 堆肥环境中高浓度腐殖酸的存在阻碍了对这个环境中的未培养微生物的宏基因组研究。我们提出了一个确实可行的提取堆肥环境DNA的方法,这个方法通过使用Sephadex G200+酸洗PVPP层析柱与电洗脱两步纯化的方法成功地纯化堆肥环境来源的DNA,用提取的DNA成功构建了一个包含约10万个克隆的柯斯质粒文库。从这个文库中筛选到一个新的β-葡萄糖苷酶基因。针对文库低的阳性筛选率问题,利用分子技术研究了不同的分离速度对提取到的总DNA中真核生物DNA量的影响,以减少文库中真核生物DNA的污染。
- 庞浩封毅唐纪良冯家勋
- 关键词：堆肥宏基因组
- 一种编码糖基水解酶家族5的纤维素酶的基因及其应用
- 本发明涉及一种编码纤维素酶的基因umcel5A，其特征在于含有SEQID NO：2的核苷酸序列或其同源序列，其中所述同源序列具有与SEQID NO：2的核苷酸序列80％以上的同源性。本发明还涉及该基因编码的纤维素酶(SE...
- 冯家勋段承杰庞浩靳振江张鹏封毅许跃强唐纪良
- 文献传递
- 基于宏基因组技术的新型纤维素酶基因的发现和酶功能研究
- 冯家勋唐纪良段承杰封毅庞浩刘利刘君梁
- 1.课题来源与背景：该项目获得了国家“863”计划、国家自然科学基金、国家国际科技合作重点项目计划及教育部新世纪优秀人才支持计划的资助。纤维素是地球上最丰富的可再生的生物质资源，纤维素的有效利用对于解决世界能源危机、粮食...
- 关键词：
- 关键词：纤维素酶基因生物精炼酶法降解酶学特性
