尚增甫
- 作品数：14 被引量：21H指数：3
- 供职机构：军事医学科学院放射与辐射医学研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- c-Myc蛋白与DNA-PKcs作用位点的鉴定
- DNA-PKcs是属于P13K家族成员的DNA依赖蛋白激酶催化亚基,与其它两个亚单位Ku70和Ku80共同构成DNA-PK复合物,参与DNA双链断裂的非同源末端连接修复过程。近年来有越来越多的研究报道,DNA-PKcs在...
- 尚增甫徐勤枝安静王豫周平坤
- 文献传递
- DNA-PKcs-CHK2信号通路调节细胞有丝分裂进程
- 染色体不稳定性(CIN)是肿瘤细胞的重要特征,在肿瘤发生过程中起重要作用.有丝分裂进程正常有序,对于维持染色体稳定性至关重要.实验室前期工作发现DNA-PKcs沉默细胞多倍体比率增加.有报道,CHK2蛋白参与有丝分裂调控...
- 尚增甫涂文志让蔚清周平坤
- 关键词：DNA-PKCSCHK2
- DNA-PKcs缺陷导致细胞周期反应机制紊乱及有丝分裂灾变死亡
- DNA-PKcs是DNA依赖蛋白激酶的催化亚单位(DNA Dependent Protein Kinase Catalytic Subunit),与另外两个亚单位Ku70和Ku80共同构成DNA-PK复合物。与ATM、A...
- 尚增甫徐勤枝涨士猛刘晓丹王豫周平坤
- 60Co γ射线诱导正常人淋巴母细胞PIG3基因mRNA表达的剂量相关性研究被引量：2
- 2011年
- 目的 探讨正常人淋巴母细胞AHH1电离辐射作用后PIG3基因mRNA表达变化的剂量-效应规律,建立一种基于基因表达变化的新型辐射生物剂量计的可能性.方法 激光共聚焦检测DNA双链断裂分子标记γ-H2AX集簇点,1、2、4、6、8和10 Gy 60Coγ射线照射AHHI细胞后4、10和24h收集细胞,应用实时荧光定量PCR技术对PIG3基因mRNA表达水平进行相对定量检测.结果 γ射线照射后30 min检测发现PIG3蛋白与γ-H2AX在细胞核内有部分共定位,形成集簇点(foci),表明其参与电离辐射致DNA双链断裂损伤信号识别反应.γ射线诱导PIG3基因mRNA表达水平随时间推移不断提高,持续时间可达24 h.PIG3基因mRNA表达水平具有显著的剂量依赖性,其表达丰度变化的剂量依赖范围在照射后4h为0～6Gy、照射后10和24 h均为0～10 Gy.结论 PIG3基因参与DNA双链断裂损伤信号识别反应,其mRNA的辐射诱导表达具有良好的剂量-效应关系,具有发展成为新的放射生物剂量计的价值.
- 刘晓丹张士猛李兵尚增甫徐勤枝周平坤
- 关键词：生物剂量计DNA损伤实时定量PCR
- DNA-PKcs在ATM缺陷细胞中调节DNA损伤周期检查点反应机制的研究
- DNA-PKcs与ATM同属于磷脂酰肌醇3-激酶相关蛋白激酶(Phosphatidylinositol-3 kinase-related protein kinase, PIKK)超家族成员,具有丝氨酸/苏氨酸激酶活性,...
- 黄波尚增甫徐勤枝张士猛刘晓丹王豫周平坤
- Tat蛋白与Plk1相互作用位点的鉴定
- 2011年
- 目的确定Tat蛋白与Plk1的相互作用及作用位点。方法构建tat和plk1基因的不同表达载体,通过GST-pull down、免疫共沉淀检测它们表达产物的相互作用位点,激光共聚焦确定其在细胞内的定位。结果 GST-pull down和免疫共沉淀实验发现Tat蛋白能结合在Plk1 N端的激酶区域,激光共聚焦发现Tat蛋白和Plk1在细胞核内有相同的亚细胞定位。结论 Tat蛋白能结合在Plk1 N端的激酶区域引起Plk1 T210的磷酸化水平提高,从而激活Plk1的活性,导致细胞周期的紊乱。
- 杨天一张士猛尚增甫刘晓丹周平坤
- 关键词：PLK1
- DNA-PKcs调控有丝分裂进程与机制
- DNA-PKcs是DNA依赖蛋白激酶的催化亚单位(DNA Dependent Protein Kinase Catalytic Subunit),与另外两个亚单位Ku70和Ku80共同构成DNA-PK复合物。与ATM、A...
- 尚增甫
- 关键词：DNA-PKCS细胞有丝分裂PLK1CHK2C-MYC
- 文献传递
- 香兰素衍生物VND3207对α粒子辐射诱发人成纤维细胞基因组DNA损伤的防护研究被引量：7
- 2010年
- 高能α粒子辐射所致基因组DNA损伤形式为复杂的簇集损伤。修复难度大，生物效应严重，目前尚缺乏有效防护药物。前期发现香兰素衍生物VND3207具有抗氧化损伤、促进DNA双链断裂损伤修复的作用．能有效防护低传能线密度（LET）γ射线诱发细胞凋亡和基因组损伤。本研究旨在探讨VND3207对高能α粒子辐射诱发人成纤维细胞基因组DNA损伤的防护效应。细胞克隆形成实验表明，VND3207无论是照射前加药还是照射后加药作用均能增强人成纤维HFS细胞对α粒子的辐射损伤抗性。通过中性单细胞凝胶电泳（彗星电泳）、γ-H2AX免疫荧光簇集点、γ—H2AX蛋白表达水平、细胞微核等多个基因组DNA损伤指标分析，表明了VND3207对α粒子辐射诱发细胞基因组DNA损伤的有效防护作用，其在5～10μmol／L浓度下。就可产生显著辐射防护效果，既能减轻α粒子辐射诱发细胞DNA的原初损伤水平。又能提高细胞的DNA修复能力。因此。VND3207具有维护高能粒子辐照细胞的基因组稳定性的作用。有开发成为抗高LET辐射损伤新药的价值。
- 陈倩倩汪黎尚增甫刘晓丹王豫郑红汪思应周平坤
- 关键词：Α粒子辐射防护剂DNA损伤微核
- DNA-PKcs调节DNA修复与细胞有丝分裂进程及其偶联机制
- DNA依赖蛋白激酶催化亚基(DNA-PKcs)是DNA双链断裂非同源末端连接修复途径的关键功能分子,与ATM、ATR等属于PIKK激酶家族成员,具有磷酸化丝氨酸/苏氨酸激酶活性,底物包括H2AX、p53、Akt等.采用A...
- 周平坤黄波尚增甫徐勤枝
- 关键词：DNA-PKCSDNA损伤修复有丝分裂纺锤体蛋白磷酸化
- c-Myc蛋白与DNA-PKcs作用位点的鉴定被引量：1
- 2009年
- DNA-PK复合物由Ku蛋白和DNA依赖蛋白激酶催化亚基（DNA-PKcs）组成,DNA-PKcs属于PI3K相关激酶家族成员.我们前期工作发现,DNA-PKcs沉默后,c-Myc的稳定性下降,且二者存在相互作用.为进一步确定c-Myc蛋白与DNA-PKcs相互作用位点,本研究利用原核表达系统活动了c-Myc及其截短体蛋白,利用GSTpull-down技术结合Western印迹法,发现c-Myc蛋白294-370位氨基酸与DNA-PKcs存在相互作用.在细胞内表达GFP-c-Myc各截短体蛋白,发现294-370位氨基酸是c-Myc蛋白降解必需的.利用免疫荧光技术,发现DNA-PKcs与c-Myc蛋白有相同的细胞亚定位,进一步表明两者在生物学功能上具有相关性.有文献报道294-370位氨基酸是乙酰转移酶p300的底物,此位点的乙酰化导致c-Myc的降解.本实验结果提示,c-Myc蛋白的294-370位氨基酸与DNA-PKcs结合,可能阻止了乙酰转移酶p300的结合,从而达到提高c-Myc蛋白稳定性的作用.
- 尚增甫徐勤枝安静王豫周平坤
- 关键词：C-MYC蛋白质相互作用
