崔学芝
- 作品数：13 被引量：62H指数：4
- 供职机构：南通医学院神经科学研究所江苏省神经再生重点实验室更多>>
- 发文基金：国家杰出青年科学基金国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 生长相关蛋白及其mRNA在大鼠损伤坐骨神经中的表达被引量：3
- 2002年
- 为了研究大鼠周围神经损伤后远侧端组织中生长相关蛋白 (GAP-4 3 )及其 m RNA的表达 ,采用正常 SD大鼠坐骨神经横断损伤的模型 ,于术后不同时间取坐骨神经远侧端组织 ,以 Western Blot和 RT-PCR法检测 GAP-4 3及其 m RNA的表达。RT-PCR法检测结果显示 ,正常大鼠坐骨神经组织中 GAP-4 3 m RNA表达量较低 ,而损伤坐骨神经的远侧段 GAP-4 3 m RNA的表达量明显增加 ,于损伤第 2周时达高峰。用抗 GAP-4 3抗体进行 Western Blot检测 ,结果表明 ,正常坐骨神经 43 k Da处出现弱阳性反应的蛋白区带 ,而损伤后坐骨神经远侧段 43 k Da处阳性反应条带着色明显加深 ,损伤后第 3周时阳性反应着色最强。本研究结果提示 ,GAP-4 3及其 m RNA在大鼠损伤坐骨神经远侧段组织中表达增强 ,其 m RNA表达上调高峰在神经损伤后的第 2周 ;而其蛋白合成增加最为明显的时间是在神经损伤后的第 3周。
- 丁斐崔学芝顾晓松
- 关键词：生长相关蛋白MRNA坐骨神经损伤
- 大鼠损伤神经组织中睫状神经节营养因子的基因表达
- 1999年
- 探索大鼠损伤神经组织中ＣＮＴＦ基因表达。方法：采用ＲＴ－ＰＣＲ法，半定量分析大鼠正常坐骨神经与坐骨神经横断损伤后１周、２周、４周远侧端中ＣＮＴＦ的基因表达。结果：在正常大鼠坐骨神经组织中，ＣＮＴＦ基因呈低表达。当坐骨神经受损以后，ＣＮＴＦ基因表达量明显增加。结论：外周神经受损之后，其远侧端神经组织通过基因调控使ＣＮＴＦｍＲＮＡ表达增加。
- 顾晓松丁斐曹铮姚登兵柯靖崔学芝
- 关键词：坐骨神经损伤RT-PCRCNTF基因表达
- 原核表达融合蛋白的亲和层析法纯化被引量：6
- 2001年
- 目的 :以T7·TagAffinityPurificationKit纯化原核表达Tropic 180 8基因编码的融合蛋白 ,并进行免疫印迹检测。方法 :以 0 .4mmol/LIPTG诱导含pET -2 1a -180 8重组质粒的BL2 1(DE3)大肠杆菌 ,T7·TagAffinityPurifica tionKit纯化菌体上清液 ,SDS -PAGE分析 ,将SDS -PAGE蛋白区带转移至NC膜进行免疫印迹检测。结果 :外源性Tropic 180 8基因在大肠杆菌中表达的融合蛋白可经T7·TagAffinityPurificationKit进一步纯化 ,纯化后的蛋白为单一条带 ,分子量约为 32 .0kDa ,其免疫印迹反应结果提示该蛋白为Tropic 180 8基因编码的融合蛋白。结论 :在大肠杆菌中表达的融合蛋白可以免疫亲和法进行纯化和鉴定。
- 姚登兵崔学芝王志刚刘炎顾晓松
- 关键词：原核表达融合蛋白免疫印迹亲和层析法基因编码
- 生长相关蛋白-43及mRNA在大鼠损伤坐骨神经中的表达 (英文)被引量：4
- 2003年
- 目的探讨坐骨神经离断后,其远侧端组织中生长相关蛋白-43mRNA(GAP-43mRNA)及其蛋白表达的变化,为临床神经修复过程中更好地改善微环境提供实验依据。方法正常SD大鼠24只,行坐骨神经横断术,术后1,2,3,4周取坐骨神经远侧端组织,以WesternBlot和RT-PCR法检测GAP-43及其mRNA的表达。结果RT-PCR结果显示,正常大鼠坐骨神经组织中GAP-43mRNA表达量较低,损伤坐骨神经远侧端GAP-43mRNA的表达量明显增加,于损伤第2周时达高峰。采用抗GAP-43抗体,进行WesternBlot检测结果:正常坐骨神经43kDa处出现弱阳性反应的蛋白区带,损伤后坐骨神经远侧端43kDa处阳性反应条带着色明显加深,损伤后第3周时阳性反应着色最强。结论GAP-43及其mRNA在大鼠损伤坐骨神经远侧端组织中表达增强,其mRNA表达上调高峰在神经损伤后的第2周;而其蛋白合成增加最为明显的时间是在神经损伤后的第3周。
- 丁斐崔学芝顾晓松
- 关键词：生长相关蛋白-43MRNA表达坐骨神经损伤RT-PCR法
- dd-PCR法研究中草药促神经生长过程中的基因差异表达被引量：6
- 1999年
- 目的 :为探讨中药促神经生长的分子机理提供实验依据。方法 :采用 dd-PCR方法 ,从体外培养大鼠背根神经节细胞加中药组和不加中药组中获得两者的差异表达片段 ,并克隆测序分析。结果 :获得 7个差异条带 ,其中 2个条带的 c DNA序列分别与酪氨酸磷酸酶受体 ( PTPR) m RNA、促生长素抑制素受体 ( SSTR) m RNA的序列部分同源。结论 :在中药促神经生长过程中 。
- 刘梅顾晓松刘炎崔学芝邱一华张沛云
- 关键词：神经生长DD-PCR基因表达
- 周围神经65KD蛋白对培养鼠胚脊髓运动神经元的影响
- 1999年
- 目的了解周围神经损伤后其远侧端特异性表达的65KD蛋白对鼠胚脊髓运动神经元的影响。方法选用SD大鼠坐骨神经横断后二周的动物模型,自然凝胶系统电泳分析损伤后神经远侧端中的蛋白组分,将65KD蛋白区带胶条与14天鼠胚脊髓运动神经元联合培养。结果损伤后二周的坐骨神经远侧端中特异性地出现表达增强的65KD蛋白;与含65KD蛋白区带胶条联合培养的脊髓运动神经元细胞存活数量多、突起生长旺盛。结论坐骨神经损伤后其远侧端组织中65KD蛋白表达增强,该蛋白具有促进鼠胚脊髓运动神经元存活与突起生长的作用。
- 张沛云顾晓松崔学芝周亚军何江虹
- 关键词：KD脊髓运动神经元蛋白鼠胚突起生长周围神经
- 中药“神经再生素”促神经生长过程中基因差异性表达的初步研究被引量：27
- 2001年
- 为了探索中药“神经再生素”促神经生长过程中基因水平的变化。本实验采用 dd-PCR方法 ,从体外培养背根神经节细胞加药组和不加药组中获得两者的差异表达片段 ,并经反杂交筛选、克隆测序、DNA序列检索分析、Northern验证。结果表明 ,差异显示共获得 8个差异条带 ,一个为下调基因 ,其余为上调基因 ,其中 2个 c DNA序列与 RRAJ5 16 1基因 (增殖相关基因 )、AF196 3 15基因 (锌指样蛋白 DDP2 ) 10 0 %同源 ,2个 c DNA序列与 AK0 0 175 7基因、STA5 SRR基因 (t RNA合成酶 )部分同源。结论是中药“神经再生素”在促神经生长过程中 ,对神经元基因的选择性表达起着重要的调控作用。
- 刘梅顾晓松刘炎崔学芝彭聿平张沛云
- 关键词：神经再生素神经生长DD-PCR基因表达中药药理
- 生长相关蛋白在损伤坐骨神经中的表达被引量：2
- 2003年
- 目的 :研究大鼠周围神经损伤与再生过程中生长相关蛋白的表达。方法 :取正常SD大鼠坐骨神经和离断损伤后不同时间近侧端和远侧端神经组织 ,采用Anti GAP 43抗体以WesternBlot方法检测GAP 43的表达变化。结果 :NC膜上 43kDa位置出现阳性反应条带 ,在正常坐骨神经中反应微弱 ,损伤后明显加强 ,随损伤时间延长 ,神经近侧端的反应无明显改变 ,神经远侧端的反应逐渐加强 ,以第 3周为最强 ,之后逐渐减弱。结论 :GAP 43在正常坐骨神经中低表达 ,损伤后近侧端与远侧端表达均增加 ,远侧端的表达增加以第 3周为高峰。
- 崔学芝王志刚顾晓松
- 关键词：生长相关蛋白坐骨神经损伤
- Tropic1808基因在大肠杆菌中的表达被引量：2
- 2000年
- 目的 :在大肠杆菌宿主系统中表达 Tropic180 8基因编码的蛋白。方法 :用 PCR方法从质粒中扩增出 Tropic180 8c DNA开放阅读框架片段 (82 8bp) ,并重组入表达载体 p ET-2 1a中 ,转化大肠杆菌 BL2 1(DE3) ,用 IPTG诱导 Tropic180 8融合蛋白的表达 ,经 SDS-PAGE,表达蛋白条带转至 PVDF膜进行氨基酸序列分析。结果 :构建了 p ET-2 1a-180 8重组质粒 ,外源性 Tropic180 8基因可在大肠杆菌中获得表达 ,目的蛋白占细菌总蛋白的 14 %以上 ,表达蛋白的 N端氨基酸序列与基因编码序列一致。结论 :Trop-ic180 8基因可在大肠杆菌中获得表达 ,这为进一步纯化该基因表达蛋白。
- 崔学芝刘梅刘炎谭湘陵顾晓松
- 关键词：克隆大肠杆菌
- 周围神经65KD蛋白对培养鼠胚脊髓运动神经元的影响
- 1998年
- 目的：为了解周围神经损伤后其远侧端特异性表达的６５ＫＤ蛋白对鼠胚脊髓运动神经元的影响。方法：选用ＳＤ大鼠坐骨神经横断后２周的动物模型，自然凝胶系统电泳分析损伤后神经远侧端中的蛋白组分，将６５ＫＤ蛋白区带胶条与１４天鼠胚脊髓运动神经元联合培养。结果：损伤后２周的坐骨神经远侧端中特异性地出现表达增强的６５ＫＤ蛋白；与含６５ＫＤ蛋白区带胶条联合培养的脊髓运动神经元细胞存活数量多、突起生长旺盛。结论：坐骨神经损伤后其远侧端组织中６５ＫＤ蛋白表达增强，该蛋白具有促进鼠胚脊髓运动神经元存活和突起生长的作用。
- 张沛云崔学芝周亚军何江虹顾晓松
- 关键词：周围神经损伤运动神经元
