张晓飞 作品数:7 被引量:42 H指数:4 供职机构: 浙江大学医学院附属第二医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
VITEK MS基质辅助激光解析电离飞行时间质谱在病原菌鉴定中的应用评价 被引量:12 2016年 目的使用VITEK MS质谱鉴定系统对临床分离的病原菌进行鉴定,并评价其性能,为病原菌的快速鉴定提供新的方法。方法收集2014年4-7月医院临床分离病原菌共948株,经VITEK-2Compact细菌鉴定仪及16SrRNA、rpoB、hisA、ITS基因片段测序确认,使用VITEK MS基质辅助激光解析电离飞行时间质谱进行鉴定,并对8株真菌连续检测测试质谱仪稳定性。结果共分离到链球菌属191株、肠球菌属94株、葡萄球菌属144株、肠杆菌科细菌193株、非发酵革兰阴性菌170株、临床常见其他菌36株、酵母菌属102株和丝状真菌18株。VITEK MS对入选菌株的鉴定总准确率达97.10%,但其对沙门菌属和鲍氏不动复合群的鉴定仅能到菌属或复合群水平;对酵母菌属的准确鉴定率为100.00%,丝状真菌中除链格孢外(数据库未包含此菌),88.89%的丝状真菌得到准确鉴定;VITEK MS质谱仪对真菌连续5d检测结果一致,稳定性良好。结论 VITKE MS表现稳定、准确率高、耗时短,尤其在真菌的鉴定上凸显优势,可作为临床细菌快速鉴定的手段。 邱炳峰 张晓飞 顾丹霞 李佳萍 周宏伟关键词:细菌鉴定 MALDI Biotyper和VITEK MS基质辅助激光解析电离飞行时间质谱对链球菌鉴定的比较研究 <正>目的研究比较两种基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定系统(MALDI Biotyper和VITEK MS)在临床分离链球菌鉴定中的表现。方法 2014年4-6月收集本院临床分离的链球菌162株,经16s rRNA基... 顾丹霞 余涛 张晓飞 张嵘文献传递 分枝杆菌的质谱分型及其对利奈唑胺耐药机制的研究 目的:研究基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI TOFMS)在鉴定临床结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌中的可行性和准确性;检测利奈唑胺对多重耐药结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌的体外活性并研究脓肿分枝杆菌对利奈唑胺的耐药... 张晓飞关键词:分枝杆菌 利奈唑胺 耐药机制 文献传递 MALDI Biotyper和VITEKMS基质辅助激光解析电离飞行时间质谱对链球菌鉴定的比较研究 被引量:11 2015年 目的以16SrRNA基因测序鉴定结果为金标准,研究比较两种基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定系统(MALDI Biotyper和VITEKMS)在临床分离链球菌鉴定中的表现。方法2014年4至6月收集浙江大学医学院附属第二医院临床分离的链球菌162株,经16SrRNA基因测序确认菌种,分别使用MALDI Biotyper和VITEKMS质谱鉴定系统进行鉴定,并评价其鉴定能力。结果MALDI Biotyper鉴定系统将155株(155/162,95.68%)链球菌准确鉴定到种,将3株缓症链球菌群鉴定为肺炎链球菌,1株副血液链球菌鉴定为澳大利亚链球菌,另有3株肺炎链球菌不能准确鉴定(分值〈1.7);VITEKMS鉴定系统将156株(156/162,96.30%)链球菌准确鉴定至种(包括亚种),其将2株肺炎链球菌鉴定为缓症链球菌/口腔链球菌,1株马肠链球菌鉴定为婴儿链球菌婴儿亚种。两系统对化脓性链球菌和无乳链球菌的鉴定准确率均为100%(51/51),对肺炎链球菌的准确率均〉85%。结论两系统对临床分离的链球菌均有较强的鉴定能力,VITEKMS系统对某些亚种的准确鉴定更有临床意义。质谱可作为临床链球菌快速鉴定的手段。 顾丹霞 余涛 张晓飞 张嵘关键词:链球菌科 RNA 核糖体 细菌分型技术 利奈唑胺对耐多药结核分枝杆菌及非结核分枝杆菌体外敏感性研究 被引量:13 2014年 目的 研究利奈唑胺对耐多药结核分枝杆菌(MDR-TB)和非结核分枝杆菌(NTM)的体外药物敏感性.方法 2013年3至6月使用hsp65基因测序比对的方法鉴定杭州地区762株结核分枝杆菌和20株NTM,通过比例法药敏试验获得70株MDR-TB,测定其与20株NTM对利奈唑胺的MIC,分析利奈唑胺对MDR-TB和NTM体外抑菌浓度的差异.结果 所测70株MDR-TB的利奈唑胺MIC均≤1 mg/L,MIC50为0.5 mg/L,MIC90为1 mg/L.对异烟肼、利福平、链霉素和乙胺丁醇耐药的MDR-TB菌株占MIC为1 mg/L菌株的6/8,提示其对利奈唑胺的敏感性有降低的趋势.NTM中18株胞内分枝杆菌对利奈唑胺MIC为8~ 16 mg/L,为非耐药株,2株脓肿分枝杆菌MIC均>32 mg/L,为耐药株.结论 利奈唑胺对MDR-TB具有很好的抗菌活性,本研究未发现其耐药株.MDR-TB对利奈唑胺的MIC随着其对一线药物耐药种类增多而升高.不同NTM种类的菌株对利奈唑胺具有不同的敏感性. 张晓飞 张范华 张艳 刘伟 张嵘一株解鸟氨酸拉乌尔菌的鉴定及其β内酰胺酶编码基因的研究 被引量:6 2013年 拉乌尔菌属隶属于变形菌门,γ变形菌纲,肠杆菌目,肠杆菌科.植生克雷伯菌和土生克雷伯菌在1981年被发现,并被归入肠杆菌科的克雷伯菌属[1-2];而解鸟氨酸克雷伯菌则在1989年被发现,该菌种最初被认定为解鸟氨酸阳性的产酸克雷伯菌[3].2001年Drancourt等[4]学者根据16S rDNA序列分析发现,产酸克雷伯菌与其他吲哚阳性的克雷伯菌属之间的系统发育树相距较远,因此提议成立了拉乌尔菌属,将解鸟氨酸克雷伯菌、植生克雷伯菌和土生克雷伯菌3个种从克雷伯菌属中转移到了拉乌尔菌属,分别命名为解鸟氨酸拉乌尔菌、植生拉乌尔菌和土生拉乌尔菌.拉乌尔菌属可从水、土壤、植物中分离,是一种条件致病菌,在免疫力低下人群且由于侵入性操作提供感染途径后可发生感染.本研究用Vitek-2 Compact全自动微生物鉴定仪,基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)及16S rRNA基因测序3种方法对该菌进行鉴定,并对β内酰胺酶编码基因进行研究. 池丹 胡燕燕 马继华 黄永禄 张晓飞 张嵘 陈功祥关键词:Β内酰胺酶 编码基因 MALDI-TOF 克雷伯菌属 parC基因突变致环丙沙星不敏感化脓性链球菌及其同源性研究 2013年 目的研究环丙沙星不敏感化脓性链球菌的耐药机制及其同源性。方法对2012年3月北京地区分离自猩红热患者的48株化脓性链球菌采用稀释法检测环丙沙星及临床常用7种抗生素的MIC。对环丙沙星MIC≥4mg/L的13株化脓性链球菌检测氟喹诺酮染色体介导的耐药基因gyrA,gyrB,parC,parE的突变,同时以环丙沙星MIC40.25mg/L的4株化脓性链球菌做比对。采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)对分离自北京不同地区的菌株进行同源性分析。结果化脓性链球菌对左氧氟沙星、氨苄西林和青霉素的敏感率均为100%。对四环素、红霉素和克林霉素的耐药率分别为91.7%(44/48)、91.7%(44/48)和89.6%(43/48)。环丙沙星、左氧氟沙星和莫西沙星的MIC50分别为2mg/L、1mg/L和40.25mg/L;MIC90分别为4mg/L、2mg/L和0.5mg/L。48株化脓性链球菌中有12株对环丙沙星MIC为4mg/L,1株MIC为8mg/L,菌株来自北京朝阳区。对这13株耐药基因检测结果显示,12株在parC基因上出现79位丝氨酸突变为苯丙氨酸或酪氨酸(Ser79Phe/Tyr),10株在parG基因的121位出现丙氨酸突变为缬氨酸(Ala121Val)。发现1株在parC基因上Ser79Phe突变合并parE基因上371位丝氨酸突变为亮氨酸(Ser371Leu)的化脓性链球菌,但该菌株对环丙沙星的MIC未显著增高(MIC=4mg/L)。17株试验菌株的PFGE结果显示为7个克隆,其中克隆A均为环丙沙星MIC≥4mg/L的菌株,主要分布在朝阳区、大兴区、丰台区、顺义区和石景山区,占MIC≥4mg/L菌株的69.2%。克隆c菌株也为环丙沙星MIC94mg/L菌株,均分布在怀柔区。克隆B、D、E、F和G分别分散在不同地区。结论parC基因突变是北京地区分离的化脓性链球菌对环丙沙星MIC略有升高的主要原因,PFGE分析显示化脓性链球菌感染在北京部分地区有小范围流行。 张晓飞 胡云建 池丹 胡燕燕 周宏伟 张嵘关键词:链球菌 环丙沙星 电泳 脉冲场